| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 第一章 PCV2 Cap蛋白及其相互作用分子研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1 PCV2病原学特征 | 第12页 |
| 1.2 Cap蛋白分子特征 | 第12-13页 |
| 1.3 Cap蛋白在PCV2病毒复制和致病中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3.1 Cap蛋白在PCV2病毒复制中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3.2 Cap蛋白在PCV2致病中的作用 | 第14页 |
| 1.4 Cap蛋白相互作用的细胞蛋白及其功能 | 第14-17页 |
| 1.4.1 gC1qR蛋白及其功能 | 第14-15页 |
| 1.4.2 其他5种相互蛋白及其功能 | 第15-17页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9基因编辑技术研究进展 | 第17-19页 |
| 2.1 基因编辑技术概况 | 第17页 |
| 2.2 CRISPR/Cas9基因编辑技术原理及研究概况 | 第17-18页 |
| 2.3 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 试验研究 | 第19-49页 |
| 第三章 靶向于猪gClqR基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统的构建及鉴定 | 第19-36页 |
| 3.1 试剂材料 | 第19-20页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第19页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 3.2 方法 | 第20-27页 |
| 3.2.1 载体的构建 | 第20-23页 |
| 3.2.2 慢病毒的包装 | 第23-24页 |
| 3.2.3 相对定量标准曲线的建立 | 第24-25页 |
| 3.2.4 慢病毒滴度的测定 | 第25-26页 |
| 3.2.5 筛选稳定转染的阳性细胞 | 第26页 |
| 3.2.6 western blotting检测 | 第26-27页 |
| 3.2.7 测序鉴定 | 第27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 3.3.1 gC1qR基因敲除位点的确定 | 第27-29页 |
| 3.3.2 双酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3.3 标准曲线及慢病毒滴度测定 | 第30-31页 |
| 3.3.4 慢病毒感染PK-15 细胞的筛选 | 第31-32页 |
| 3.3.5 western blotting检测gC1qR基因敲除情况 | 第32-33页 |
| 3.3.6 测序 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 3.5 小结 | 第35-36页 |
| 第四章 gC1qR基因缺失对PCV2感染猪组织病变的影响 | 第36-49页 |
| 4.1 试剂材料 | 第36-37页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第36-37页 |
| 4.2 方法 | 第37-42页 |
| 4.2.1 动物试验分组 | 第37页 |
| 4.2.2 试验动物病原检测 | 第37-38页 |
| 4.2.3 CRISPR/Cas9慢病毒感染构建部分肺组织gC1qR-/-仔猪 | 第38-39页 |
| 4.2.4 PCV2感染猪模型的构建 | 第39-40页 |
| 4.2.5 gC1qR缺失对PCV2在机体内复制的影响 | 第40页 |
| 4.2.6 石蜡切片的制作 | 第40-41页 |
| 4.2.7 免疫组织化学染色 | 第41-42页 |
| 4.2.8 HE染色 | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-48页 |
| 4.3.1 浓缩慢病毒后拷贝数测定 | 第42-43页 |
| 4.3.2 仔猪病原学检测 | 第43页 |
| 4.3.3 慢病毒感染仔猪的体温和体重变化 | 第43-44页 |
| 4.3.4 仔猪组织中gC1qR基因敲除鉴定 | 第44-46页 |
| 4.3.5 组织部分缺失gC1qR对PCV2复制及所致病理变化的影响 | 第46-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48页 |
| 4.5 小结 | 第48-49页 |
| 结论与创新点 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 主要缩略词和中英文对照表 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
