| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| 1.1 壳聚糖 | 第8-9页 |
| 1.1.1 壳聚糖介绍 | 第8页 |
| 1.1.2 壳聚糖的生物学功能 | 第8-9页 |
| 1.2 硒化合物及其抗癌作用 | 第9-11页 |
| 1.2.1 硒多糖 | 第10页 |
| 1.2.2 硒蛋白 | 第10-11页 |
| 1.2.3 硒核酸 | 第11页 |
| 1.3 肺癌概述 | 第11-13页 |
| 1.3.1 肺癌的发病机理 | 第11-12页 |
| 1.3.2 肺癌的治疗现状 | 第12-13页 |
| 1.4 肿瘤细胞凋亡概述 | 第13-16页 |
| 1.4.1 细胞坏死与凋亡的区别 | 第13页 |
| 1.4.2 细胞凋亡的调控因素 | 第13-15页 |
| 1.4.3 细胞凋亡途径 | 第15-16页 |
| 1.5 蛋白质组学研究现状 | 第16-18页 |
| 1.5.1 蛋白质组学的概念 | 第16-17页 |
| 1.5.2 蛋白质组学研究的主要技术 | 第17-18页 |
| 1.5.3 双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用 | 第18页 |
| 1.6 本课题研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 硒酸壳聚糖的制备 | 第21-23页 |
| 2.2 主要方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第23页 |
| 2.2.2 MTT法检测硒酸壳聚糖对A549细胞生长的抑制作用 | 第23-24页 |
| 2.2.3 硒酸壳聚糖共培养的A549细胞的形态学变化 | 第24页 |
| 2.2.4 Hoechst/PI双染观察与硒酸壳聚糖共培养的A549细胞的凋亡情况 | 第24页 |
| 2.2.5 荧光显微镜观察细胞学形态变化 | 第24-25页 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC/PI试剂盒检测A549细胞凋亡情况 | 第25页 |
| 2.2.7 流式细胞仪检测硒酸壳聚糖对A549细胞周期的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.8 罗丹明123(Rh123)染色检测细胞线粒体内跨膜电位的变化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 硒酸壳聚糖诱导A549细胞MPTP的开放 | 第27-28页 |
| 2.2.10 细胞钙离子浓度测定 | 第28页 |
| 2.2.11 细胞内活性氧含量的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.12 SDS-PAGE电泳检测细胞蛋白变化 | 第29-30页 |
| 2.2.13 二维电泳分析硒酸壳聚糖作用A549细胞前后差异蛋白质组学的研究 | 第30-36页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-55页 |
| 3.1 MTT法检测壳聚糖对A549细胞的增殖抑制作用 | 第37-39页 |
| 3.2 倒置相差显微镜观察细胞学形态变化 | 第39页 |
| 3.3 Hoechst/PI双染观察与硒酸壳聚糖共培养的A549细胞的凋亡情况 | 第39-40页 |
| 3.4 DAPI染色观察细胞形态变化 | 第40-41页 |
| 3.5 Annexin V-FITC/PI检测A549细胞凋亡情况 | 第41-43页 |
| 3.6 流式细胞术检测A549细胞周期变化与凋亡 | 第43-44页 |
| 3.7 Rh123染色检测A549细胞线粒体内跨膜电位的变化 | 第44-45页 |
| 3.8 硒酸壳聚糖诱导A549细胞MPTP的开放 | 第45-46页 |
| 3.9 细胞钙离子浓度测定 | 第46-48页 |
| 3.10 细胞内活性氧含量的检测 | 第48-49页 |
| 3.11 SDS-PAGE分析A549凋亡前后蛋白变化 | 第49-50页 |
| 3.12 二维电泳结合MALDI-TOF-MS/MS分析结果 | 第50-55页 |
| 3.12.1 二维电泳结果 | 第50-51页 |
| 3.12.2 差异表达蛋白MALDI-TOF-MS/MS质谱分析及鉴定 | 第51-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 5 展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-65页 |
| 7 攻读学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
