| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 本文所用缩略语 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-22页 |
| ·棉花概述 | 第12-13页 |
| ·棉花的植物学分类 | 第12页 |
| ·棉花的染色体组分类 | 第12页 |
| ·棉花的逆境胁迫 | 第12-13页 |
| ·WRKY转录因子的研究进展 | 第13-15页 |
| ·WRKY转录因子概述 | 第13页 |
| ·WRKY转录因子的结构 | 第13-14页 |
| ·WRKY蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
| ·植物启动子的研究 | 第15-20页 |
| ·启动子分析在研究基因功能中的意义 | 第15页 |
| ·植物启动子的一般结构 | 第15-16页 |
| ·植物启动子的分类 | 第16-19页 |
| ·启动子的研究方法 | 第19-20页 |
| ·棉花抗病 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二部分 棉花3个WRKY基因表达特征分析及启动子的克隆 | 第22-38页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·酶与试剂 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·实验所用到的软件工具 | 第22页 |
| ·引物和测序 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-28页 |
| ·CTAB法提取棉花TM-1与Hai7124总RNA | 第23-24页 |
| ·RNA反转录 | 第24页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·WRKY54、WRKY82、WRKY64逆境处理 | 第24-25页 |
| ·WRKY54、WRKY82、WRKY64启动子分离与测序 | 第25-27页 |
| ·启动子调控元件的预测与分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-34页 |
| ·GhWRKY54、GhWRKY64、GhWRKY82基因在棉花组织器官中的qRT-PCR检测 | 第28页 |
| ·三个WRKY基因在逆境诱导处理下的表达特征 | 第28-30页 |
| ·WRKY54、WRKY64、WRKY82启动子的克隆 | 第30-31页 |
| ·启动子序列分析 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-38页 |
| ·三个GhWRKY基因定量表达特征分析 | 第34页 |
| ·三个WRKY基因在逆境诱导处理下的定量表达特征分析 | 第34-35页 |
| ·三个WRKY基因启动子特征分析 | 第35-38页 |
| 第三部分 WRKY64启动子的功能分析 | 第38-58页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·种植材料 | 第38页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·植物抗生素 | 第39页 |
| ·酶和试剂 | 第39页 |
| ·试剂盒 | 第39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-47页 |
| ·启动子缺失片段克隆 | 第39-40页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·质粒DNA的抽提 | 第41-42页 |
| ·质粒DNA的双酶切 | 第42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·质粒转化LBA4404细胞 | 第43页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第43-44页 |
| ·转基因烟草DNA提取 | 第44页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·转基因烟草RNA提取 | 第45页 |
| ·RNA的消化 | 第45页 |
| ·RNA反转录 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR检测 | 第46页 |
| ·转基因烟草T1代种子筛选 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学分析 | 第47页 |
| ·荧光定量PCR | 第47页 |
| ·结果 | 第47-56页 |
| ·启动子缺失片段的获得 | 第47-49页 |
| ·植物表达载体的构建及鉴定 | 第49-50页 |
| ·转化农杆菌及PCR鉴定 | 第50页 |
| ·烟草再生植株的获得 | 第50-51页 |
| ·T0代转基因烟草的的分子鉴定 | 第51-52页 |
| ·GUS表达的组织化学定位 | 第52-53页 |
| ·烟草根和叶RNA提取及鉴定 | 第53页 |
| ·GUS基因的定量分析 | 第53-54页 |
| ·黄萎病菌处理后缺失突变体的GUS染色 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四部分 全文结论 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
