摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第1章 Smo基因的研究进展 | 第10-15页 |
·毛囊中的主要信号通路 | 第10页 |
·Hh信号通路及其功能 | 第10-13页 |
·Hh信号通路的基本概况 | 第10-11页 |
·Shh信号通路在毛囊中的功能 | 第11-12页 |
·Shh信号通路的调控机制 | 第12-13页 |
·Smo基因及其功能 | 第13-15页 |
·Smo基因的概述 | 第13页 |
·Smo基因的功能 | 第13-15页 |
第2章 藏系绵羊Smo基因的克隆和超表达载体的构建 | 第15-26页 |
·材料与方法 | 第15-21页 |
·试验样品 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·引物设计 | 第16-17页 |
·藏系绵羊皮肤总RNA提取 | 第17页 |
·藏系绵羊Smo基因的克隆及序列分析 | 第17-18页 |
·Smo基因的双酶切引物设计 | 第18-19页 |
·含酶切位点Smo基因的扩增和pCDsRed2-KI载体的获得 | 第19页 |
·皮肤特异表达载体pCDsRed2-KS的构建 | 第19-20页 |
·pCDsRed2-KS载体的鉴定 | 第20-21页 |
·结果 | 第21-24页 |
·Smo基因的PCR扩增和克隆 | 第21-22页 |
·Smo基因扩增和真核载体的扩大提取 | 第22-23页 |
·pCDsRed2-KS真核载体的鉴定 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
第3章 藏系绵羊Smo miRNA干扰载体的构建 | 第26-35页 |
·材料与方法 | 第26-30页 |
·质粒 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·干扰片段设计 | 第27-28页 |
·核苷酸双链制备 | 第28页 |
·干扰载体的构建 | 第28-29页 |
·干扰载体菌液PCR鉴定及测序 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-33页 |
·靶向Smo基因干扰序列的设计结果 | 第30-31页 |
·干扰载体菌液PCR结果 | 第31-32页 |
·干扰载体的测序 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第4章 细胞转染及检测 | 第35-47页 |
·材料与方法 | 第35-40页 |
·质粒和细胞 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·人内根鞘细胞培养 | 第36-37页 |
·人内根鞘细胞转染 | 第37-38页 |
·人内根鞘细胞转染后的检测 | 第38页 |
·Smo及通路下游基因荧光定量PCR分析 | 第38-40页 |
·数据分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-45页 |
·细胞转染 | 第40-41页 |
·细胞转染后的基因表达检测 | 第41-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附件一:藏系绵羊Smo基因的cDNA序列及其氨基酸序列 | 第55-59页 |
附件二:攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |