摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
常用英文缩略表 | 第7-12页 |
第一章 前言 | 第12-30页 |
·研究背景 | 第12-28页 |
·禽白血病病毒概述 | 第12-13页 |
·禽白血病病毒分子生物学研究 | 第13-18页 |
·禽白血病病毒复制 | 第18-19页 |
·禽白血病病毒流行病学 | 第19-20页 |
·禽白血病病毒的致病性研究 | 第20-24页 |
·抗原递呈和抗原递呈细胞 | 第24-26页 |
·MIRNA与树突状细胞 | 第26-27页 |
·MIRNA的检测 | 第27页 |
·鸡骨髓源树突细胞的建立和应用 | 第27-28页 |
·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
·研究路线 | 第29-30页 |
第二章 鸡骨髓源树突状细胞体外培养方法的建立 | 第30-37页 |
·引言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-33页 |
·实验动物 | 第31页 |
·细胞制作培养及鉴定所需试剂 | 第31页 |
·主要仪器和设备 | 第31-32页 |
·鸡骨髓源树突状细胞的制作 | 第32页 |
·鸡骨髓源分化细胞的流式检测 | 第32页 |
·扫描电子显微镜样品制备 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-35页 |
·鸡骨髓源树突状细胞培养 | 第33-34页 |
·鸡骨髓源树突状细胞的鉴定 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-37页 |
第三章 ALV-J NX0101株感染性克隆构建和病毒拯救 | 第37-51页 |
·引言 | 第37-38页 |
·材料和方法 | 第38-46页 |
·细胞,毒株与抗体 | 第38页 |
·细胞培养试剂及其配置 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第39-40页 |
·引物设计 | 第40-41页 |
·病毒复制及ALV全基因分段扩增 | 第41-42页 |
·PCR产物回收及单克隆测序 | 第42页 |
·ALV-J NX0101感染性克隆的构建 | 第42-43页 |
·病毒拯救 | 第43-44页 |
·病毒拯救及RT-PCR检测 | 第44-45页 |
·拯救病毒ELISA检测 | 第45页 |
·拯救病毒间接免疫荧光(IFA)检测 | 第45页 |
·拯救病毒TCID50测定 | 第45-46页 |
·结果和分析 | 第46-50页 |
·PCR扩增及重组质粒PMD18T-NX0101鉴定结果 | 第46-47页 |
·拯救病毒的RT-PCR鉴定结果 | 第47-48页 |
·拯救病毒的间接免疫荧光(IFA)鉴定结果 | 第48-49页 |
·拯救病毒的ELISA检测及TCID50测定 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
第四章 ALV-J感染对鸡骨髓源树突状细胞生长发育的影响 | 第51-66页 |
·引言 | 第51-52页 |
·材料与方法 | 第52-57页 |
·细胞与毒株 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52-53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·ALV-J NX0101株感染鸡DCS | 第53页 |
·鸡DCS感染ALV-J后细胞状态的观察 | 第53-54页 |
·病毒感染鸡DCS的PCR和ELISA检测 | 第54页 |
·HOECHEST染色法检测细胞凋亡 | 第54页 |
·TUNEL-DAPI染色法检测细胞凋亡 | 第54-55页 |
·ANNEXIN V-PI染色法检测细胞凋亡 | 第55页 |
·部分受体及细胞因子MRNA表达水平检测 | 第55-57页 |
·结果 | 第57-65页 |
·ALV-J NX0101株感染鸡DCS的结果 | 第57-58页 |
·ALV-J感染对鸡DCS生长发育状态的影响 | 第58-60页 |
·细胞凋亡HOECHEST染色法检测结果 | 第60-61页 |
·细胞凋亡TUNEL染色法检测结果 | 第61-62页 |
·细胞凋亡ANNEXIN V-PI染色法检测结果 | 第62-64页 |
·MRNA表达水平分析 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
第五章 ALV-J NX0101感染鸡骨髓源树突状细胞的MIRNA表达水平的分析 | 第66-79页 |
·引言 | 第66-67页 |
·材料与方法 | 第67-71页 |
·细胞与毒株 | 第67页 |
·主要试剂 | 第67页 |
·主要仪器 | 第67-68页 |
·MIRNA二代高通量测序样品准备 | 第68-69页 |
·参考数据库 | 第69-70页 |
·MIRNA提取 | 第70页 |
·MIRNA反转录第一链合成 | 第70-71页 |
·MIRNA RT-PCR | 第71页 |
·结果 | 第71-78页 |
·测序样品质量 | 第71-72页 |
·MIRNA表达差异分析 | 第72-74页 |
·差异表达MIRNA的靶基因功能分析 | 第74-75页 |
·差异表达MIRNA的靶基因功能KEGG通路分析 | 第75-78页 |
·小结 | 第78-79页 |
第六章 全文讨论与总结 | 第79-85页 |
·全文讨论 | 第79-84页 |
·鸡骨髓源树突状细胞培养方法的建立 | 第79-80页 |
·ALV-J对树突状细胞分化成熟的影响 | 第80-82页 |
·ALV-J对鸡树突状细胞MIRNA表达水平分析 | 第82-84页 |
·全文总结 | 第84页 |
·创新点 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |
文章发表 | 第98-99页 |
附录 | 第99-114页 |