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ALV-J对鸡骨髓源树突状细胞生物学功能影响的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
常用英文缩略表第7-12页
第一章 前言第12-30页
   ·研究背景第12-28页
     ·禽白血病病毒概述第12-13页
     ·禽白血病病毒分子生物学研究第13-18页
     ·禽白血病病毒复制第18-19页
     ·禽白血病病毒流行病学第19-20页
     ·禽白血病病毒的致病性研究第20-24页
     ·抗原递呈和抗原递呈细胞第24-26页
     ·MIRNA与树突状细胞第26-27页
     ·MIRNA的检测第27页
     ·鸡骨髓源树突细胞的建立和应用第27-28页
   ·本研究的目的和意义第28-29页
   ·研究路线第29-30页
第二章 鸡骨髓源树突状细胞体外培养方法的建立第30-37页
   ·引言第30-31页
   ·材料与方法第31-33页
     ·实验动物第31页
     ·细胞制作培养及鉴定所需试剂第31页
     ·主要仪器和设备第31-32页
     ·鸡骨髓源树突状细胞的制作第32页
     ·鸡骨髓源分化细胞的流式检测第32页
     ·扫描电子显微镜样品制备第32-33页
   ·结果与分析第33-35页
     ·鸡骨髓源树突状细胞培养第33-34页
     ·鸡骨髓源树突状细胞的鉴定第34-35页
   ·小结第35-37页
第三章 ALV-J NX0101株感染性克隆构建和病毒拯救第37-51页
   ·引言第37-38页
   ·材料和方法第38-46页
     ·细胞,毒株与抗体第38页
     ·细胞培养试剂及其配置第38页
     ·主要试剂第38-39页
     ·主要仪器第39-40页
     ·引物设计第40-41页
     ·病毒复制及ALV全基因分段扩增第41-42页
     ·PCR产物回收及单克隆测序第42页
     ·ALV-J NX0101感染性克隆的构建第42-43页
     ·病毒拯救第43-44页
     ·病毒拯救及RT-PCR检测第44-45页
     ·拯救病毒ELISA检测第45页
     ·拯救病毒间接免疫荧光(IFA)检测第45页
     ·拯救病毒TCID50测定第45-46页
   ·结果和分析第46-50页
     ·PCR扩增及重组质粒PMD18T-NX0101鉴定结果第46-47页
     ·拯救病毒的RT-PCR鉴定结果第47-48页
     ·拯救病毒的间接免疫荧光(IFA)鉴定结果第48-49页
     ·拯救病毒的ELISA检测及TCID50测定第49-50页
   ·小结第50-51页
第四章 ALV-J感染对鸡骨髓源树突状细胞生长发育的影响第51-66页
   ·引言第51-52页
   ·材料与方法第52-57页
     ·细胞与毒株第52页
     ·主要试剂第52-53页
     ·主要仪器第53页
     ·ALV-J NX0101株感染鸡DCS第53页
     ·鸡DCS感染ALV-J后细胞状态的观察第53-54页
     ·病毒感染鸡DCS的PCR和ELISA检测第54页
     ·HOECHEST染色法检测细胞凋亡第54页
     ·TUNEL-DAPI染色法检测细胞凋亡第54-55页
     ·ANNEXIN V-PI染色法检测细胞凋亡第55页
     ·部分受体及细胞因子MRNA表达水平检测第55-57页
   ·结果第57-65页
     ·ALV-J NX0101株感染鸡DCS的结果第57-58页
     ·ALV-J感染对鸡DCS生长发育状态的影响第58-60页
     ·细胞凋亡HOECHEST染色法检测结果第60-61页
     ·细胞凋亡TUNEL染色法检测结果第61-62页
     ·细胞凋亡ANNEXIN V-PI染色法检测结果第62-64页
     ·MRNA表达水平分析第64-65页
   ·小结第65-66页
第五章 ALV-J NX0101感染鸡骨髓源树突状细胞的MIRNA表达水平的分析第66-79页
   ·引言第66-67页
   ·材料与方法第67-71页
     ·细胞与毒株第67页
     ·主要试剂第67页
     ·主要仪器第67-68页
     ·MIRNA二代高通量测序样品准备第68-69页
     ·参考数据库第69-70页
     ·MIRNA提取第70页
     ·MIRNA反转录第一链合成第70-71页
     ·MIRNA RT-PCR第71页
   ·结果第71-78页
     ·测序样品质量第71-72页
     ·MIRNA表达差异分析第72-74页
     ·差异表达MIRNA的靶基因功能分析第74-75页
     ·差异表达MIRNA的靶基因功能KEGG通路分析第75-78页
   ·小结第78-79页
第六章 全文讨论与总结第79-85页
   ·全文讨论第79-84页
     ·鸡骨髓源树突状细胞培养方法的建立第79-80页
     ·ALV-J对树突状细胞分化成熟的影响第80-82页
     ·ALV-J对鸡树突状细胞MIRNA表达水平分析第82-84页
   ·全文总结第84页
   ·创新点第84-85页
致谢第85-86页
参考文献第86-98页
文章发表第98-99页
附录第99-114页

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