| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·Hedgehog信号与干细胞的概述 | 第13-18页 |
| ·Hedgehog信号通路发现、组成及调控 | 第13-14页 |
| ·Hedgehog通路在干细胞中的研究 | 第14页 |
| ·Hedgehog通路在肠道中的功能研究 | 第14-15页 |
| ·Hedgehog信号通路与人类疾病的关系 | 第15-16页 |
| ·基因Hedgehog的基本信息 | 第16-18页 |
| ·昆虫中肠的概述 | 第18-23页 |
| ·昆虫中肠的结构 | 第18-19页 |
| ·果蝇中肠细胞类型与增殖 | 第19-21页 |
| ·家蚕肠道的结构 | 第21-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第23-24页 |
| ·主要研究内容 | 第24页 |
| ·研究技术路线 | 第24-25页 |
| 第三章 家蚕BmHh基因信息初步分析 | 第25-42页 |
| ·实验材料与试剂 | 第25-28页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配方 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·信息分析 | 第28页 |
| ·家蚕Hh表达谱分析 | 第28-29页 |
| ·目的片段的获取 | 第29-31页 |
| ·克隆 | 第31页 |
| ·转化 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的筛选及验证 | 第32页 |
| ·质粒的测序 | 第32页 |
| ·qRT-PCR反应体系 | 第32页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·BmHh基因的cDNA鉴定克隆 | 第33-34页 |
| ·BmHh基因的cDNA序列分析 | 第34-35页 |
| ·BmHh蛋白的序列分析 | 第35-37页 |
| ·家蚕BmHh组织表达谱 | 第37页 |
| ·家蚕BmHh时期表达谱 | 第37-38页 |
| ·家蚕BmHh基因的亚细胞定位分析 | 第38-39页 |
| ·讨论与分析 | 第39-42页 |
| 第四章 家蚕BmHh多克隆抗体制备及检测 | 第42-56页 |
| ·实验材料及方法 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要溶液配方 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-51页 |
| ·BmHh原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·BmHh的蛋白原核诱导表达及其表达检测 | 第46页 |
| ·原核表达重组蛋白纯化 | 第46-48页 |
| ·免疫小鼠制备抗体 | 第48页 |
| ·免疫血清特异性检测 | 第48-49页 |
| ·免疫荧光检测BmHh抗体特异性 | 第49页 |
| ·western blot检测 | 第49-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·家蚕BmHh原核表达重组质粒的鉴定 | 第51-52页 |
| ·家蚕BmHh原核诱导及蛋白纯化 | 第52-53页 |
| ·家蚕BmHh多克隆抗体制备及特异性检测 | 第53-55页 |
| ·讨论与分析 | 第55-56页 |
| 第五章 家蚕BmHh在家蚕中肠中的功能初探 | 第56-70页 |
| ·实验材料与试剂 | 第56-58页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56-57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要溶液配方 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-64页 |
| ·引物设计 | 第58页 |
| ·RNA提取及cDNA合成 | 第58页 |
| ·BmHh基因的dsRNA合成 | 第58-59页 |
| ·细胞培养与传代 | 第59-60页 |
| ·BrdU标记细胞荧光染色 | 第60-61页 |
| ·qRT-PCR | 第61页 |
| ·Western-blot | 第61页 |
| ·HH通路抑制剂环耙明处理家蚕中肠 | 第61页 |
| ·病原体细菌和药物处理家蚕中肠 | 第61-62页 |
| ·石蜡切片组织处理 | 第62页 |
| ·石蜡切片制备 | 第62-63页 |
| ·盖玻片的清洗 | 第63页 |
| ·中肠组织BrdU免疫荧光 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-69页 |
| ·BmHh基因dsRNA的合成 | 第64-65页 |
| ·细胞水平下调BmHh对HH通路主要基因表达变化及对细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
| ·家蚕注射抑制剂环耙明后HH通路主要基因表达变化及对中肠增殖的影响 | 第66-67页 |
| ·E.Coli、Bt和Bleomycin刺激肠道后HH通路主要基因表达变化及对中肠及对及对中肠增殖的影响 | 第67-69页 |
| ·讨论与分析 | 第69-70页 |
| 第六章 全文总结 | 第70-72页 |
| ·家蚕BmHh基因序列信息分析 | 第70页 |
| ·家蚕BmHh表达特征分析及其亚细胞定位 | 第70页 |
| ·家蚕BmHh抗体制备及特异性检测 | 第70页 |
| ·家蚕BmHh在家蚕卵巢细胞系和中肠中的功能初探 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 硕士期间发表文章及课题参研情况 | 第78-80页 |
| 发表的论文 | 第78页 |
| 参研课题 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
