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马铃薯纺锤块茎类病毒的qRT-PCR检测及其遗传进化分析

摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
1 文献综述第15-36页
   ·马铃薯与马铃薯生产概况第15-19页
     ·世界马铃薯生产第15页
     ·中国马铃薯生产第15-19页
   ·马铃薯种薯生产及质量控制第19-22页
     ·马铃薯种薯发展历程第19-20页
     ·马铃薯种薯生产的基本模式第20页
     ·影响马铃薯种薯质量的主要病害第20-21页
     ·脱毒马铃薯种薯的质量控制第21-22页
   ·类病毒第22-27页
     ·类病毒的历史、分类第22-25页
     ·类病毒的生物学特性第25-26页
     ·类病毒的结构第26-27页
   ·马铃薯纺锤块茎类病毒第27-30页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的寄主范围第27-28页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的传播途径第28页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的危害第28-29页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒对马铃薯育种工作的影响第29-30页
   ·马铃薯纺锤块茎类病毒的防控第30-34页
     ·建立完善的PSTVd检测技术体系,生产健康马铃薯种薯第30-33页
     ·培育抗性品种第33页
     ·利用基因工程方法第33页
     ·卫生防疫第33页
     ·加强马铃薯育种过程中PSTVd的监控,避免PSTVd在育种过程中传播第33-34页
   ·研究的目的意义第34-36页
2 马铃薯纺锤块茎类病毒q RT-PCR检测技术体系的建立及应用第36-45页
   ·材料与方法第36-37页
     ·供试材料第36页
     ·试剂第36-37页
     ·仪器设备第37页
   ·试验方法第37-39页
     ·RNA提取及反转录第37页
     ·引物及探针的设计及合成第37页
     ·标准品制备第37-38页
     ·qPCR标准曲线的建立及引物的筛选第38-39页
     ·检测灵敏度分析第39页
     ·qRT-PCR检测稳定性分析第39页
     ·qRT-PCR检测马铃薯样品第39页
   ·结果第39-44页
     ·阳性菌落及其PCR鉴定第39-40页
     ·引物的比较和筛选结果第40-42页
     ·检测灵敏度第42-43页
     ·qRT-PCR检测稳定性第43页
     ·qRT-PCR检测技术体系的应用第43-44页
   ·讨论与结论第44-45页
3 马铃薯纺锤块茎类病毒发生情况调查及其分子多态性和系统进化分析第45-60页
   ·材料与方法第45-48页
     ·PSTVd发生情况调查第45页
     ·样品保存第45-46页
     ·克隆和测序第46-47页
     ·Taq DNA聚合酶的保真性验证第47页
     ·序列比对、系统发育分析第47-48页
     ·二级结构预测第48页
   ·结果与分析第48-58页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的发生率第48-49页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的PCR产物测序第49页
     ·基因克隆获得的PSTVd序列第49-50页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的分子多态性第50-54页
     ·Taq酶保真度测试第54页
     ·突变对二级结构的影响第54-55页
     ·中国流行的马铃薯纺锤块茎类病毒变体第55页
     ·马铃薯纺锤块茎类病毒的系统发育分析第55-58页
   ·讨论与结论第58-60页
     ·讨论第58页
     ·结论第58-60页
4 PSTVd中国分离物的致病性验证及不同马铃薯品种感染PSTVd的症状表现第60-75页
   ·材料与方法第60-62页
     ·材料第60-61页
     ·方法第61-62页
   ·结果与分析第62-73页
     ·PSTVd序列测定结果第62页
     ·株高第62-64页
     ·单株产量第64-65页
     ·叶片症状第65-66页
     ·块茎症状第66-67页
     ·PSTVd经保存和与寄主互作后的序列变化第67-70页
     ·PSTVd经试管保存和与寄主互作后的序列变化及其对二级结构的影响第70-73页
   ·讨论与结论第73-75页
     ·讨论第73-74页
     ·结论第74-75页
5 全文结论第75-77页
   ·建立了PSTVd q RT-PCR检测体系第75页
   ·通过调查掌握了PSTVd在中国的发生情况第75页
   ·了解了PSTVd中国分离物的多态性及遗传进化情况第75-76页
   ·PSTVd中国分离物对马铃薯影响显著且不同品种表现不同第76-77页
致谢第77-79页
参考文献第79-92页
附录第92-97页
攻读博士学位期间发表的学术论文第97页

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