| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| ·甘草酸及其衍生物的研究现状 | 第12-14页 |
| ·甘草酸的性质及应用 | 第13页 |
| ·单葡萄糖醛酸基甘草次酸的性质及应用 | 第13-14页 |
| ·单葡萄糖醛酸基甘草次酸的制备方法 | 第14-16页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的研究现状 | 第16-20页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的来源与晶体结构 | 第16-19页 |
| ·糖苷酶的活性中心及催化机制 | 第19-20页 |
| ·酶的人工改造 | 第20-25页 |
| ·理性设计 | 第21-22页 |
| ·非理性设计 | 第22-24页 |
| ·半理性设计 | 第24-25页 |
| ·课题研究的目的和内容 | 第25-27页 |
| ·研究目的 | 第25页 |
| ·研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·菌种与质粒 | 第27页 |
| ·药品和试剂 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·主要设备 | 第28-29页 |
| ·常用溶液配制 | 第29页 |
| ·常用储备液 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-37页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的纯化和回收 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备与转化 | 第31-32页 |
| ·定点饱和突变文库的构建 | 第32-33页 |
| ·定点饱和突变文库的初筛 | 第33-34页 |
| ·HPLC 定量分析 PGUS-E 突变酶的键选择性复筛 | 第34页 |
| ·PGUS-E 突变酶的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·PGUS-E 突变酶的分离纯化 | 第35页 |
| ·蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35页 |
| ·酶学动力学参数测定 | 第35-36页 |
| ·PGUS-E 突变酶的活性分析 | 第36页 |
| ·PGUS-E 酶和突变酶的空间结构模拟 | 第36-37页 |
| 第三章 PGUS-E 的突变库的构建与筛选 | 第37-52页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| ·PGUS-E 键选择性位点的选择 | 第38-39页 |
| ·PGUS-E 定点饱和突变 PCR 扩增结果 | 第39-40页 |
| ·PGUS-E 饱和突变文库的筛选 | 第40-41页 |
| ·PGUS-E 突变酶的蛋白结构模拟与分析 | 第41-43页 |
| ·M42（V447Q）的叠加分析 | 第43-51页 |
| ·M42-1（R447K/T369V）的构建 | 第43页 |
| ·M42-1（R447Q/T369V）的键选择性分析 | 第43-44页 |
| ·M42-2(V447Q 与 R563K)空间结构模拟与分析 | 第44-49页 |
| ·M42-2(V447Q 与 R563K)的构建 | 第49-50页 |
| ·M42-2(V447Q 与 R563K)的键选择性分析 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第四章 pET-M42-2 突变酶的催化特性研究 | 第52-62页 |
| 引言 | 第52页 |
| ·pET- M42-2 突变酶的构建 | 第52-53页 |
| ·pET-M42-2 突变酶的纯化 | 第53-54页 |
| ·pET-M42-2 突变酶活性分析 | 第54页 |
| ·pET-M42-2 突变酶催化 GL 反应进程曲线 | 第54-56页 |
| ·温度对 pET-M42-2 突变酶的影响 | 第56-58页 |
| ·最适温度测定 | 第56-57页 |
| ·稳定性测定 | 第57-58页 |
| ·pH 对 pET-M42-2 突变酶的影响 | 第58-59页 |
| ·pET-M42-2 突变酶动力学常数 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 作者简介及在学成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
