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真菌诱导子促进白桦悬浮细胞中三萜合成机理的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 绪论第12-21页
   ·白桦的生物学特性及经济价值第12页
   ·三萜类化合物第12-14页
     ·三萜类化合物概述第12-13页
     ·三萜类化合物的生物活性及药用价值第13页
     ·萜类化合物的生物合成途径第13-14页
   ·桦木组织培养研究进展第14-15页
     ·愈伤组织和器官培养第14-15页
     ·原生质体培养第15页
   ·植物组织培养生产次生代谢产物的研究进展第15-16页
   ·真菌诱导子能有效促进植物次生代谢产物的积累第16页
   ·桦树次生代谢研究第16-17页
   ·实时荧光定量PCR研究进展第17-18页
     ·实时荧光定量PCR基本原理与应用第17页
     ·应用FQ-PCR检测三萜合成关键酶编码基因的表达第17-18页
   ·植物中一氧化氮的研究进展第18-19页
     ·NO的理化性质第18页
     ·NO在植物生长和代谢中的重要作用第18页
     ·植物中NO的来源途径第18-19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
2 真菌诱导子与白桦悬浮细胞共培养体系的建立与优化第21-32页
   ·材料与方法第21-22页
     ·植物材料来源第21页
     ·白桦细胞培养第21页
     ·白桦内生真菌的分离第21页
     ·真菌诱导子的制备和添加第21页
     ·真菌诱导子的菌种鉴定第21-22页
     ·样品中三萜类化合物的提取和测定第22页
     ·统计分析第22页
   ·结果与分析第22-29页
     ·白桦愈伤组织中三帖提取条件的初步优化第22-24页
     ·促进白桦悬浮细胞中三萜积累的真菌诱导子的筛选第24-27页
     ·真菌诱导子与白桦悬浮细胞共培养体系的优化第27-29页
   ·讨论第29-30页
   ·本章小结第30-32页
3 真菌诱导子促进悬浮细胞中三萜合成的防御机理及关键酶基因的表达第32-43页
   ·材料与方法第32-35页
     ·白桦细胞培养第32页
     ·真菌诱导子的制备和添加第32页
     ·样品中三萜类化合物的提取和测定第32页
     ·培养液pH值和电导率的测定第32页
     ·苯丙氨酸解氨酶和过氧化物酶活性的测定第32-33页
     ·实时荧光定量PCR检测三萜合成关键酶基因的表达第33-35页
     ·统计分析第35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·白桦悬浮细胞在真菌诱导子作用下的早期防御反应第35-37页
     ·实时定量PCR检测三萜合成的关键酶基因表达水平的变化第37-40页
   ·讨论第40-42页
   ·本章小结第42-43页
4 一氧化氮在真菌促进白桦三萜合成中的作用研究第43-56页
   ·材料与方法第43-46页
     ·白桦细胞培养第43页
     ·真菌诱导子的制备和添加第43页
     ·SNP、cPITO、L-NAME和NaN3的添加第43页
     ·样品中三萜类化合物的提取和测定第43页
     ·NO的测定方法第43-44页
     ·一氧化氮合酶活性的测定方法第44页
     ·硝酸还原酶活性的测定方法第44页
     ·半定量RT-PCR检测BPW和NR基因的表达量第44-45页
     ·统计分析第45-46页
   ·结果与分析第46-52页
     ·真菌诱导后白桦悬浮细胞中NO分子含量的变化第46页
     ·真菌诱导后白桦悬浮细胞中一氧化氮合酶活性的变化第46-47页
     ·真菌诱导后白桦悬浮细胞中硝酸还原酶活性的变化第47-48页
     ·各种处理对真菌诱导后白桦细胞中NO含量的影响第48-49页
     ·各种处理对真菌诱导后白桦细胞中一氧化氮合酶和硝酸还原酶活性的影响第49-50页
     ·各种处理对真菌诱导后白桦细胞中三萜积累的影响第50-51页
     ·半定量RT-PCR方法检测各种处理后白桦细胞中的BPW基因的表达水平第51-52页
   ·讨论第52-54页
   ·本章小结第54-56页
结论第56-58页
参考文献第58-70页
附录第70-73页
攻读学位期间发表的学术论文第73-74页
致谢第74-75页

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