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藻胆体的冷冻电镜三维重构及应用--以海洋红藻Griffithsia pacifica和嗜热蓝薄Thermosynechococcus vulcanus藻胆体为例

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-16页
1 引言第16-39页
   ·立题依据第16-23页
   ·藻胆蛋白结构第23-28页
   ·人工光合作用,藻胆蛋白在染料敏化太阳能电池中的应用第28-29页
     ·人工光合作用第28页
     ·藻胆蛋白染料敏化太阳能电池第28-29页
   ·藻胆蛋白的体内合成第29-37页
     ·藻胆蛋白亚基的自催化组合生物合成和三类裂合酶第29-32页
     ·裂合酶异构活性第32-33页
     ·藻胆蛋白体外合成成功的案例第33-37页
   ·展望第37-39页
     ·基于光合色素的太阳能电池第37页
     ·藻胆蛋白直接分子设计、三聚体和更高级的组装第37-39页
2 完整天然藻胆体的提取及冷冻电镜三维重构第39-48页
   ·仪器与材料第39页
   ·培养条件第39-40页
   ·培养基配方第40页
   ·Porphyridium purpureum UTEX 2757完整的藻胆体提取方法第40-44页
     ·配置试剂第40-41页
     ·P. purpureum UTEX 2757完整的藻胆体提取方法第41-43页
     ·实验结果第43-44页
   ·Griffithsia pacifica LB 2317完整的藻胆体提取方法:第44-46页
     ·试剂第44页
     ·G. pacifica LB 2317完整藻胆体提取方法第44-45页
     ·实验结果第45-46页
   ·蛋白样品质量评估第46-48页
3 负染和冷冻透射电镜制样、观察和计算结果第48-65页
   ·三维重构的技术原理第48页
   ·近来冷冻电镜的技术突破第48页
   ·研究方法第48-52页
     ·藻胆体负染制样和负染观察方法第48-49页
     ·藻胆体冷冻制样和冷冻观察方法第49-50页
     ·冷冻透射电镜观察第50-51页
     ·照片数据计算处理第51-52页
   ·负染计算P. purpureum藻胆体结构第52-54页
     ·负染P. purpureum二维平均结果第52页
     ·负染P. purpureum藻胆体三维重构结果第52-53页
     ·负染P. purpureum藻胆体改进算法之后的三维重构结果第53-54页
   ·负染计算G. pacifica藻胆体结构第54-59页
     ·负染G. pacifica天然藻胆体二维平均结果第54-55页
     ·负染G. pacifica天然藻胆体三维重构结果第55-56页
     ·Gra Fix最佳条件交联后的G. pacifica藻胆体及二维平均第56-58页
     ·负染G. pacifica藻胆体改进算法之后的三维重构结果第58-59页
   ·冷冻电镜衬度改进的方法第59-63页
     ·衬度改进的方法第59-61页
     ·G. pacifica冷冻电镜二维平均和三维重构的结果第61-63页
   ·解决G. pacifica冷冻电镜优势取向的尝试,及二维平均结果第63-65页
4 嗜热蓝藻藻胆体的生化和功能验证第65-84页
   ·负染二维平均的侧面结构第65-66页
   ·紫外可见吸收光谱结果第66页
   ·77K荧光发射光谱研究藻胆体能量传递第66-71页
     ·仪器材料第66-67页
     ·实验步骤第67-68页
     ·实验结果和讨论第68-71页
   ·单独提取藻胆体的核第71页
   ·时间分辨荧光发射光谱验证功能第71-75页
     ·藻胆体时间分辨荧光发射光谱研究进展第71-73页
     ·实验仪器和方法第73页
     ·实验结果和讨论第73-75页
   ·切胶质谱辨认新蛋白的证据第75-76页
   ·藻体的弱光生长实验第76-78页
     ·实验过程第76页
     ·实验结果第76-78页
   ·嗜热蓝藻藻胆体的热稳定性实验第78-80页
     ·实验方法第78-79页
     ·实验结果第79-80页
   ·强光下藻胆体的解聚实验第80-84页
     ·实验过程第80-81页
     ·强光对藻胆体解聚的影响第81-84页
5 光电转化中的应用第84-104页
   ·技术背景第84-87页
   ·蓝藻来源及培养条件第87页
   ·材料与仪器第87-89页
   ·实验方法第89-97页
     ·热稳定敏化材料的制备第89-90页
     ·电极组装的简要流程第90-92页
     ·敏化材料嗜热蓝藻藻胆体的获得第92-94页
     ·光电转换器件的组装与测试第94-95页
     ·组装之后的电池热稳定性测试第95-96页
     ·其他3个实验方法第96-97页
   ·实验结果第97-101页
   ·讨论第101-104页
6 蓝藻核杆连接蛋白突变株的构建第104-109页
   ·实验步骤第104-106页
     ·蓝藻基因组DNA提取第104页
     ·Kana基因克隆第104-106页
     ·载体转化第106页
   ·文献基础和实验方案第106-108页
   ·实验结果第108-109页
7 主要结论第109-111页
8 参考文献第111-123页
作者简历第123-124页
攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第124页

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