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巴西橡胶树HSP70基因的克隆与表达分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1. 引言第10-16页
   ·天然橡胶的研究现状第10页
   ·热休克蛋白70的研究进展第10-13页
     ·热休克蛋白的发现第10-11页
     ·HSP70的分类第11页
     ·HSP70基因与蛋白质的结构特点第11页
     ·HSP70家族基因水平的作用机制第11-12页
     ·HSP70的功能第12-13页
   ·HSP70在植物中的研究进展第13-15页
     ·植物HSP70与非生物胁迫第14页
     ·HSP70与植物抗病性的研究第14页
     ·HSP70与植物生长发育过程的关系第14-15页
   ·本研究的目的意义第15-16页
2. 材料与方法第16-33页
   ·材料与试剂第16-17页
     ·植物材料第16页
     ·材料处理第16-17页
     ·质粒及菌种第17页
     ·工具酶和试剂第17页
   ·实验方法与步骤第17-33页
     ·橡胶树不同组织RNA的提取方法第17页
     ·RNA完整性电泳检测第17-18页
     ·RNA浓度测定第18页
     ·总RNA中少量DNA的消化第18页
     ·逆转录合成cDNA第一链第18-19页
     ·橡胶树HbHSP70基因的克隆第19-25页
     ·HbHSP70基因组的克隆第25-26页
     ·HbHSP70基因启动子的克隆第26-27页
     ·橡胶树HbHSP70基因的表达模式分析第27-29页
     ·HbHSP70基因的原核表达第29-31页
     ·Western blot检测HbHSP70基因原核表达的目的蛋白第31-32页
     ·HbHSP70基因的重组菌株对非生物胁迫的响应第32-33页
3. 结果与分析第33-58页
   ·橡胶树不同组织RNA提取及检测第33页
   ·橡胶树叶片DNA的提取及检测第33-34页
   ·HbHSP70基因全长cDNA的克隆及序列分析第34-39页
     ·HbHSP70-1基因保守区获取第34页
     ·HbHSP70-1基因3’和5’末端序列扩增第34-35页
     ·HbHSP70基因全长cDNA的扩增第35-36页
     ·HbHSP70基因的生物信息学分析第36-38页
     ·HbHSP70基因的系统进化分析第38-39页
   ·HbHSP70基因组序列的扩增与结构分析第39-41页
     ·HbHSP70-1和HbHSP70-2基因组扩增结果第39-40页
     ·HbHSP70基因组结构分析第40-41页
   ·HbHSP70基因启动子的扩增与序列分析第41-43页
     ·HbHSP70基因启动子的扩增第41-42页
     ·HbHSP70基因启动子序列分析第42-43页
   ·HbHSP70基因的实时定量表达分析第43-51页
     ·HbHSP70基因叶片不同发育时期的表达模式分析第44-45页
     ·HbHSP70基因在不同组织中的表达模式分析第45页
     ·乙烯利刺激对HbHSP70基因表达的影响第45-46页
     ·伤害处理(Wounding)对HbHSP70基因表达的影响第46页
     ·割胶(Tapping)处理对HbHSP70基因表达的影响第46-47页
     ·健康树和不同死皮(TPD)程度的橡胶树胶乳中HbHSP70基因表达的差异第47页
     ·非生物胁迫对HbHSP70基因表达的影响第47-51页
   ·HbHSP70基因的原核表达及条件优化第51-56页
     ·原核表达载体的构建与鉴定第51页
     ·pEASY-E1载体环化第51-52页
     ·HbHSP70基因原核表达条件的筛选第52-56页
   ·HbHSP70基因原核表达目的蛋白Western blot检测结果第56页
   ·HbHSP70基因重组菌株对高温胁迫的响应第56-58页
4. 讨论第58-60页
   ·HbHSP70-1和HbHSP70-2基因的表达特性分析第58页
   ·HbHSP70-1和HbHSP70-2生理功能的探讨第58-59页
   ·HbHSP70-1和HbHSP70-2的后续研究第59-60页
5. 结论第60-61页
参考文献第61-65页
附录第65-70页
 附录一:有关试剂的配置第65-66页
 附录二:橡胶树叶片DNA和不同组织RNA提取方法第66-68页
 附录三:大肠杆菌DH5 α感受态细胞的制备第68-69页
 附录四:缩略词第69-70页
作者在读期间科研成果简介第70页
科研工作第70-71页
致谢第71页

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