| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1. 前言 | 第11-17页 |
| ·植物免疫系统 | 第11-13页 |
| ·植物先天免疫系统 | 第11-12页 |
| ·植物与病原物的相互作用 | 第12-13页 |
| ·病原相关分子模式引发的先天免疫 | 第13页 |
| ·非寄主抗性 | 第13-15页 |
| ·NHO1的研究进展 | 第15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| ·本研究的技术路线 | 第16-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-27页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·酶和生化试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·培养基配方 | 第17-18页 |
| ·引物序列 | 第18页 |
| ·OsNHO1基因的全长cDNA及启动子分离与分析 | 第18-19页 |
| ·OsNHO1基因全长cDNA的分离 | 第18-19页 |
| ·OsNHO1启动子的分离 | 第19页 |
| ·OsNHO1基因的表达分析 | 第19-20页 |
| ·OsNHO1基因的表达分析 | 第19页 |
| ·OsNHO1基因生物信息学分析 | 第19-20页 |
| ·OsNHO1基因启动子序列分析 | 第20页 |
| ·OsNHO1基因互补拟南芥NHO1突变体的功能 | 第20页 |
| ·OsNHO1超量表达载体和RNA1表达载体的构建 | 第20-22页 |
| ·OsNHO1超量表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·RNAi表达载体的构建 | 第21页 |
| ·OsNHO1启动子全长基因表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第22页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导和农杆菌的转化 | 第22页 |
| ·愈伤组织与农杆菌的共培养和抗性愈伤的筛选与植株再生 | 第22页 |
| ·OsNHO1水稻转基因植株的DNA检测 | 第22-23页 |
| ·DNA提取 | 第22-23页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第23页 |
| ·转基因水稻纯合子的筛选 | 第23页 |
| ·转基因植株RNA水平鉴定 | 第23-25页 |
| ·RNA提取 | 第23-24页 |
| ·RNA的反转录和半定量RT-PCR检测 | 第24页 |
| ·转基因水稻的Real Time PCR检测 | 第24-25页 |
| ·OsNHO1过表达、RNAI和NHO1突变体水稻接种病原菌与调查 | 第25-26页 |
| ·活体接种白叶枯病原菌与调查 | 第25页 |
| ·离体接种稻瘟病菌及其调查 | 第25-26页 |
| ·转基因水稻的相关基因的表达 | 第26页 |
| ·纯合转基因植株的生化检查 | 第26-27页 |
| ·水稻叶片角质层蜡质含量的测定 | 第26页 |
| ·NO含量的测定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-46页 |
| ·OsNHO1基因的全长cDNA分离与分析 | 第27-29页 |
| ·OsNHO1基因的全长cDNA分离 | 第27页 |
| ·序列测序及分析 | 第27-29页 |
| ·OsNHO1基因的表达分析 | 第29-31页 |
| ·OsNHO1基因互补拟南芥NHO1突变体的功能 | 第31-32页 |
| ·OsNHO1超量表达载体和RNAI表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·带启动子全长基因表达载体的构建和分析 | 第33-36页 |
| ·OsNHO1启动子的分离和载体构建 | 第33页 |
| ·OsNHO1启动子序列分析 | 第33-36页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第36页 |
| ·OsNHO1水稻转基因植株的DNA检测 | 第36-37页 |
| ·转基因水稻纯合子的获得 | 第37页 |
| ·转基因植株RNA水平鉴定 | 第37-40页 |
| ·RNA提取 | 第37-38页 |
| ·RNA的反转录和半定量RT-PCR检测 | 第38-39页 |
| ·转基因水稻的Real Time PCR鉴定 | 第39-40页 |
| ·OsNHO1过表达、RNAI和突变体水稻接种病原菌与调查 | 第40-42页 |
| ·活体接种白叶枯病原菌与调查 | 第40-42页 |
| ·离体接种稻瘟病菌及其调查 | 第42页 |
| ·不同转基因水稻的相关基因的表达 | 第42-44页 |
| ·对OsNHO1过表达、RNAI和NHO1突变体水稻的生化指标检测 | 第44-46页 |
| ·水稻叶片角质层蜡质含量的测定 | 第44-45页 |
| ·NO含量的测定 | 第45-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-48页 |
| 5. 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-56页 |
| 附录一 水稻转化培养基组分 | 第53-54页 |
| 附录二 质粒的小量提取方法 | 第54页 |
| 附录三 酶切 | 第54页 |
| 附录四 目的片段的回收 | 第54-55页 |
| 附录五 GRIESS法检测NO含量 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
