| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| ·选题意义 | 第14-15页 |
| ·国内外研究现状 | 第15-20页 |
| ·纤维素酶的研究现状 | 第15-18页 |
| ·纤维素酶分类 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶的结构及功能 | 第16-17页 |
| ·纤维素酶基因的研究 | 第17-18页 |
| ·半纤维素酶的研究现状 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶及半纤维素酶的应用 | 第19-20页 |
| ·基因获取方法的研究 | 第20页 |
| ·研究目的及内容 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 匍枝根霉cDNA文库的构建 | 第22-32页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株、载体和培养基 | 第22-23页 |
| ·试剂与仪器 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·菌丝体培养及预处理 | 第24页 |
| ·匍枝根霉总RNA的制备 | 第24页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第24-25页 |
| ·cDNA单链的合成 | 第25页 |
| ·cDNA双链的合成及修饰 | 第25-26页 |
| ·cDNA初级文库的建立 | 第26页 |
| ·cDNA文库的质量鉴定 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-31页 |
| ·匍枝根霉总RNA的提取 | 第28页 |
| ·匍枝根霉mRNA的分离纯化 | 第28-29页 |
| ·cDNA的合成、修饰 | 第29页 |
| ·匍枝根霉cDNA文库的构建 | 第29-30页 |
| ·匍枝根霉cDNA文库的质量鉴定 | 第30-31页 |
| ·结论 | 第31-32页 |
| 第3章 匍枝根霉木质纤维素降解酶基因的筛选及生物信息学分析 | 第32-49页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·菌种及载体 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·匍枝根霉cDNA文库的构建 | 第34页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第34页 |
| ·基因的生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-48页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第35-37页 |
| ·测序结果 | 第37页 |
| ·生物信息学分析 | 第37-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第4章 纤维素酶重组菌发酵性能研究 | 第49-66页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和载体 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·宿主菌培养 | 第50页 |
| ·质粒提取 | 第50-51页 |
| ·目的基因的扩增 | 第51-52页 |
| ·质粒及目的基因的双酶切 | 第52页 |
| ·重组质粒构建 | 第52页 |
| ·大肠杆菌BL21感受态制备 | 第52-53页 |
| ·转化 | 第53页 |
| ·纤维素及半纤维素酶活的测定及定义 | 第53-54页 |
| ·外切葡聚糖苷酶酶活测定及定义 | 第53页 |
| ·外切葡聚糖苷酶酶活测定及定义 | 第53页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶活测定及定义 | 第53页 |
| ·木聚糖酶酶活测定及定义 | 第53-54页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第54-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-65页 |
| ·纤维素酶及半纤维素酶基因的扩增 | 第55-58页 |
| ·pET22b质粒及其双酶切 | 第58页 |
| ·纤维素酶重组菌诱导发酵产酶曲线 | 第58-60页 |
| ·部分重组菌酶学性质研究 | 第60-62页 |
| ·纤维素酶重组菌蛋白质电泳 | 第62-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第5章 半纤维素酶重组菌发酵性能研究 | 第66-74页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·菌株和载体 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67页 |
| ·重组菌发酵条件优化 | 第67页 |
| ·重组菌发酵培养基优化 | 第67页 |
| ·测定方法及定义 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-73页 |
| ·菌体生长曲线及发酵产酶曲线 | 第67-68页 |
| ·重组菌诱导条件的优化 | 第68-69页 |
| ·重组菌发酵培养基的优化 | 第69-73页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| 第6章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |