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抗菌肽MetalnikowinⅡ对禽多杀性巴氏杆菌ptfa蛋白免疫效果的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第1章 绪论第9-23页
   ·抗菌肽的概述第9页
   ·抗菌肽的分类第9-10页
     ·抗菌肽根据来源分类第9页
     ·根据不同结构分类第9-10页
   ·抗菌肽的生物学活性第10-12页
     ·抗细菌活性第10-11页
     ·抗真菌活性第11页
     ·抗原虫活性第11页
     ·抗病毒活性第11页
     ·抗肿瘤活性第11-12页
     ·在先天性免疫及获得性免疫中的作用第12页
   ·抗菌肽的抗菌机制第12-14页
     ·抗菌肽胞外杀菌机制第12-13页
     ·抗菌肽胞内杀菌机制第13-14页
   ·免疫佐剂的概述第14-15页
   ·免疫佐剂的研究进展第15-21页
     ·铝盐佐剂第15-16页
     ·MF59 佐剂第16页
     ·细胞因子佐剂第16-18页
     ·CpG-ODN 佐剂第18页
     ·纳米粒子佐剂第18-19页
     ·天然免疫佐剂第19-20页
     ·抗菌肽免疫佐剂第20-21页
   ·本试验研究意义及试验内容第21-23页
第2章 ptfa 蛋白的原核表达及纯化第23-37页
   ·实验材料第23-25页
     ·试验用菌株及原核表达载体第23页
     ·主要试剂、酶及其试剂盒第23页
     ·试验仪器第23-24页
     ·主要溶液及培养基的配置第24-25页
   ·试验方法第25-31页
     ·从基因文库中提取质粒及分析第25页
     ·ptfa 基因的 PCR 扩增第25-26页
     ·PCR 产物电泳检测及胶回收第26-27页
     ·ptfa 基因扩增片段进行胶回收第27页
     ·碱裂解法 pET32a 质粒的提取第27-28页
     ·pET32a 载体与目的基因双酶切及胶回收第28页
     ·pET32a-ptfa 重组载体构建第28页
     ·大肠杆菌感受态制备及 pET32a-ptfa 重组子的转化及筛选第28-29页
     ·pET32a-ptfa 重组质粒的原核表达及纯化第29-31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·基因文库中的重组质粒提取及酶切鉴定结果第31-32页
     ·目的基因 PCR 扩增结果第32-33页
     ·pET32a-ptfa 重组质粒双酶切鉴定结果第33-34页
     ·SDS-PAGE 电泳结果第34页
     ·镍柱纯化后蛋白电泳图第34-35页
   ·讨论第35-37页
第3章 抗菌肽 Met 对 ptfa 蛋白的免疫效果检测第37-46页
   ·试验材料第37-38页
     ·试验动物第37页
     ·主要试剂第37页
     ·本试验所用主要仪器第37页
     ·主要溶液及试剂配制第37-38页
   ·试验方法第38-41页
     ·试验动物分组及免疫试验第38-39页
     ·琼脂扩散试验第39页
     ·静脉血采集及血清分离第39页
     ·外周血采集第39页
     ·抗原包被浓度的确定第39-40页
     ·鸡静脉血清特异抗体检测第40页
     ·外周血淋巴细胞增殖试验第40-41页
   ·结果与分析第41-44页
     ·抗原包被浓度及血清稀释浓度的确定第41-42页
     ·雏鸡静脉血特异抗体检测第42-43页
     ·淋巴细胞转化试验第43-44页
   ·讨论第44-46页
第4章 结论第46-47页
   ·pET32a-ptfa 重组载体的原核表达及蛋白纯化第46页
   ·抗菌肽 Met 对 ptfa 蛋白的免疫效果监测第46-47页
参考文献第47-53页
缩略语词汇表第53-54页
致谢第54-55页
攻读硕士学位期间研究成果第55页

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