| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 防御素简介与分类 | 第11-13页 |
| ·防御素简介 | 第11页 |
| ·防御素分类 | 第11-13页 |
| 2 防御素的生物学活性 | 第13-15页 |
| ·抗细菌活性 | 第13-14页 |
| ·抗病毒活性 | 第14页 |
| ·抗真菌活性 | 第14页 |
| ·免疫调节作用 | 第14-15页 |
| ·细胞毒性作用 | 第15页 |
| 3 防御素作用机理 | 第15-16页 |
| 4 防御素应用前景展望 | 第16-17页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 第二章 实验内容 | 第18-64页 |
| 实验一 山羊防御素GBD-1基因的cDNA克隆 | 第18-32页 |
| 1 引言 | 第18页 |
| 2 试验材料 | 第18-19页 |
| ·试验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| 3 试验方法 | 第19-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第19-20页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第20-21页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| ·RT-PCR方法扩增cDNA | 第21-26页 |
| 4 结果与分析 | 第26-30页 |
| ·总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·GBD-1基因的序列的克隆、测序 | 第27-28页 |
| ·GBD-1基因蛋白质理化性质分析 | 第28-29页 |
| ·GBD-1基因同源性分析 | 第29-30页 |
| 5 讨论 | 第30-32页 |
| 实验二 GBD-1在雌性乌骨山羊不同组织中转录水平研究 | 第32-39页 |
| 1 引言 | 第32页 |
| 2 试验材料 | 第32页 |
| ·试验动物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| 3 试验方法 | 第32-35页 |
| ·引物设计与合成 | 第32-33页 |
| ·山羊组织总RNA的提取与cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| ·半定量RT-PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·荧光定量PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 4 结果与分析 | 第35-37页 |
| ·半定量RT-PCR检测结果 | 第35-36页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测结果 | 第36-37页 |
| 5 讨论 | 第37-39页 |
| ·关于荧光定量PCR技术 | 第37页 |
| ·关于不同组织表达差异 | 第37-39页 |
| 实验三 山羊GBD-1表达载体的构建和鉴定 | 第39-64页 |
| 1 引言 | 第39页 |
| 2 试验材料 | 第39-43页 |
| ·质粒、菌株 | 第39-40页 |
| ·主要药品及试剂 | 第40-41页 |
| ·常用试剂的配制 | 第41-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| 3 试验方法 | 第43-55页 |
| ·GBD-1基因的合成 | 第43-45页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第45-49页 |
| ·GBD-1在毕赤酵母中的表达 | 第49-52页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE鉴定 | 第52-53页 |
| ·Western Blot鉴定 | 第53-54页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| ·抑菌实验 | 第55页 |
| 4 结果与分析 | 第55-61页 |
| ·GBD-1的PCR扩增和序列分析 | 第55-56页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第56-58页 |
| ·重组表达质粒线性化检测 | 第58-59页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测结果 | 第59-60页 |
| ·蛋白浓度检测结果 | 第60页 |
| ·抑菌结果检测 | 第60-61页 |
| 5 讨论 | 第61-64页 |
| ·酵母表达系统的选择 | 第61-62页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE | 第62-63页 |
| ·Western Blot | 第63-64页 |
| 第三章 全文结论 | 第64-65页 |
| 1 主要研究结果 | 第64页 |
| 2 值得进一步研究的相关问题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第75页 |