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泌盐植物中华补血草SOS1基因的克隆及其功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-11页
文献综述第11-25页
 1 高盐胁迫与植物的耐盐性第11-14页
   ·高盐胁迫对植物的伤害第11-12页
   ·植物的耐盐性第12-14页
     ·Na~+的外排和 Na~+的区隔化第13页
     ·渗透调节第13-14页
 2 植物 Na~+/H~+逆向转运蛋白家族与植物的耐盐性第14-22页
   ·SOS 蛋白家族的功能研究第14-21页
     ·SOS1 基因与植物的耐盐性第14-16页
     ·SOS2 基因与植物的耐盐性第16-17页
     ·SOS3 基因与植物的耐盐性第17页
     ·SOS4 基因与植物的耐盐性第17-18页
     ·SOS5 基因与植物的耐盐性第18-19页
     ·SOS 信号通路与植物的耐盐性第19-21页
   ·植物液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白的功能研究第21-22页
     ·NHX 型阳离子/H~+逆向转运蛋白发展史第21页
     ·NHX 与植物的耐盐性第21-22页
 3 本实验的研究背景和研究意义第22-25页
实验部分第25-106页
 第一部分:中华补血草幼苗对 NaCl 胁迫的响应及 LsSOS1 基因的表达谱分析第25-33页
   ·实验材料第25-27页
   ·实验方法第27-29页
     ·中华补血草幼苗弯根实验第27页
     ·LsSOS1 基因的表达分析第27-29页
       ·Biozol 试剂提取中华补血草总 RNA第27-28页
       ·反转录 PCR第28页
       ·实时荧光定量 PCR第28-29页
   ·实验结果第29-32页
     ·不同盐浓度处理下中华补血草幼苗的弯根情况第29-30页
     ·不同盐浓度处理下中华补血草 RNA 的提取第30-31页
     ·不同盐浓度处理下中华补血草小苗 SOS1 基因的表达分析第31-32页
   ·讨论第32-33页
 第二部分:泌盐盐生植物中华补血草对 NaCl 胁迫的生理响应第33-49页
   ·实验材料第33-34页
   ·生理指标的测定方法第34-39页
     ·干重、鲜重第34页
     ·MDA 含量的测定第34-35页
     ·质膜透性的测定第35页
     ·APX 活性的测定第35-36页
     ·CAT、SOD、POD 活性的测定第36-37页
     ·可溶性蛋白含量的测定第37-38页
     ·叶绿素含量的测定第38-39页
   ·数据及实验结果分析第39-48页
     ·盐胁迫对中华补血草干重、鲜重的影响第39-40页
     ·盐胁迫对中华补血草细胞膜系统的影响第40-42页
     ·盐胁迫对中华补血草抗氧化酶类的影响第42-46页
     ·盐胁迫对中华补血草可溶性蛋白的影响第46-47页
     ·盐胁迫对中华补血草叶绿素含量的影响第47-48页
   ·讨论第48-49页
 第三部分 泌盐盐生植物中华补血草 SOS1 基因的克隆、表达分析及功能鉴定第49-106页
   ·实验材料第49-52页
   ·实验方法第52-68页
     ·LsSOS1 基因异源过量表达研究第52-63页
       ·LsSOS1 基因的克隆第52-56页
       ·植物表达载体的构建及农杆菌的转化第56-59页
       ·渗透法转化拟南芥花序第59-60页
       ·转基因拟南芥的筛选第60页
       ·转基因植株的鉴定第60-61页
       ·过量表达 LsSOS1 基因对转基因拟南芥耐盐性的影响第61-63页
     ·中华补血草 SOS1 基因表达产物的亚细胞定位分析第63-64页
       ·LsSOS1 基因的克隆第63页
       ·融合基因表达载体的构建及农杆菌的转化第63页
       ·渗透法转化拟南芥花序第63-64页
       ·转基因拟南芥的筛选第64页
       ·转基因植株的鉴定第64页
       ·中华补血草 SOS1 表达产物的亚细胞定位分析第64页
     ·LsSOS1 基因沉默转基因中华补血草的耐盐性研究第64-68页
       ·LsSOS1 基因 RNAi 沉默干扰载体的构建第64-65页
       ·沉默干扰载体农杆菌的转化及鉴定第65页
       ·中华补血草优化的遗传转化第65-66页
       ·转基因中华补血草的分子鉴定第66-67页
       ·LsSOS1RNAi 沉默转基因中华补血草的耐逆性分析第67-68页
   ·实验结果第68-101页
     ·中华补血草 SOS1 基因的克隆第68-76页
       ·中华补血草 RNA 的提取第68-69页
       ·LsSOS1 基因的克隆第69-76页
     ·植物过量表达载体的构建第76-78页
     ·融合基因表达载体的构建第78-80页
     ·LsSOS1RNAi 沉默表达载体的构建第80-82页
     ·过量表达 LsSOS1 转基因拟南芥的研究第82-91页
       ·转基因拟南芥纯合株系的筛选第82-83页
       ·过量表达 LsSOS1 转基因拟南芥的分子鉴定第83页
       ·转基因拟南芥外源 SOS1 基因表达的实时定量分析第83-84页
       ·转基因拟南芥的耐盐性分析第84-91页
     ·LsSOS1 基因异源表达产物的亚细胞定位分析第91-94页
       ·转基因拟南芥纯合株系的筛选第91-92页
       ·转基因拟南芥的分子鉴定第92-93页
       ·LsSOS1 基因异源表达产物的亚细胞定位分析第93-94页
     ·LsSOS1 基因沉默转基因中华补血草的耐盐性研究第94-101页
       ·中华补血草的遗传转化第94-95页
       ·转基因中华补血草的分子鉴定第95-101页
   ·讨论第101-106页
     ·LsSOS1 基因的克隆第101页
     ·LsSOS1 基因异源过量表达研究第101-103页
     ·LsSOS1 表达产物亚细胞定位分析第103页
     ·LsSOS1 沉默转基因中华补血草的耐逆性研究第103-106页
参考文献第106-113页
致谢第113-114页
附录一 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第114-115页

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