| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言与文献综述 | 第12-39页 |
| 1 甘蔗概况 | 第12-17页 |
| ·甘蔗害虫种类及其危害 | 第12-15页 |
| ·甘蔗害虫的综合防治 | 第15-17页 |
| 2 植物抗虫基因的研究进展 | 第17-25页 |
| ·抗虫基因及其作用原理 | 第17-23页 |
| ·抗虫基因工程潜在的问题及解决途径 | 第23-25页 |
| 3 甘蔗转基因的研究进展 | 第25-29页 |
| ·甘蔗的遗传背景 | 第25-26页 |
| ·甘蔗转化系统建立和优化 | 第26页 |
| ·甘蔗的抗虫转基因研究现状 | 第26-27页 |
| ·甘蔗抗病转基因研究 | 第27页 |
| ·甘蔗抗除草剂转基因研究 | 第27-28页 |
| ·提高甘蔗抗逆性的转基因研究 | 第28页 |
| ·提高甘蔗蔗糖含量和改良蔗糖色泽的转基因研究 | 第28-29页 |
| ·甘蔗生物反应器研究进展 | 第29页 |
| 4 融合基因研究进展 | 第29-36页 |
| ·传统获得多价转基因植物的策略 | 第30-31页 |
| ·利用融合基因获得多价转基因植物的策略 | 第31-36页 |
| 5 本研究的目的意义、内容及技术路线 | 第36-39页 |
| ·研究目的意义 | 第36-37页 |
| ·研究内容 | 第37页 |
| ·技术路线 | 第37-39页 |
| 第二章 海南蔗区害虫调查 | 第39-46页 |
| 1 材料与方法 | 第39页 |
| ·调查时间与地点 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·调查方法及数据处理 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·海南甘蔗害虫种类 | 第39-40页 |
| ·甘蔗害虫危害情况 | 第40-45页 |
| 3 讨论 | 第45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 植物表达载体PNUB2AG、PUBTC和PUBTB的构建 | 第46-71页 |
| 1 材料与方法 | 第46-57页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·质粒及菌种 | 第46页 |
| ·酶与生化试剂 | 第46页 |
| ·研究方法 | 第46-57页 |
| ·CryIA(c)和gna融合基因植物表达载体的构建 | 第46-55页 |
| ·CryIA(c)和CryIA(b)单价基因植物表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·中间载体pUBI的构建 | 第55-56页 |
| ·植物表达载体pUBTC的构建 | 第56页 |
| ·植物表达载体pUBTB的构建 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-68页 |
| ·CryIA(c)和gna融合基因植物表达载体的构建 | 第57-63页 |
| ·CryIA(c)和gna基因的融合 | 第57-60页 |
| ·中间表达载体pNUBI的鉴定 | 第60页 |
| ·植物表达载体pNUBG的鉴定 | 第60-61页 |
| ·pMDB2AG冻融法转化根癌农杆菌 | 第61-63页 |
| ·CryIA(c)和CryIA(b)单价基因植物表达载体的构建 | 第63-68页 |
| ·中间载体pUBI的鉴定 | 第63页 |
| ·植物表达载体pUBTC的鉴定 | 第63-64页 |
| ·植物表达载体pUBTC的转化农杆菌 | 第64-66页 |
| ·植物表达载体pUBTB的鉴定 | 第66-68页 |
| ·植物表达载体pUBTB的转化农杆菌 | 第68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| ·关于连接多肽FMDV2A序列 | 第68-69页 |
| ·关于重叠延伸PCR技术 | 第69-70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 第四章 CRYIA(C)-2A-GNA、CRYIA(C)和CRYIA(B)基因遗传转化甘蔗 | 第71-77页 |
| 1. 材料与方法 | 第71页 |
| ·植物材料 | 第71页 |
| ·试剂 | 第71页 |
| ·主要的甘蔗培养基 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-73页 |
| ·甘蔗转化材料及其农杆菌菌液的准备 | 第71-72页 |
| ·农杆菌菌液浸染愈伤组织及共培养 | 第72页 |
| ·农杆菌浸染后的愈伤组织分化成苗 | 第72页 |
| ·甘蔗小植株的筛选培养 | 第72-73页 |
| ·甘蔗抗性苗的炼苗 | 第73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-77页 |
| ·甘蔗胚性愈伤组织的诱导及分化成苗 | 第73页 |
| ·农杆菌浸染后的愈伤组织分化成苗及其PPT筛选 | 第73-75页 |
| ·甘蔗抗性苗的炼苗 | 第75-77页 |
| 第五章 转基因植株的分子检测及蛋白表达分析 | 第77-92页 |
| 1 材料与方法 | 第77-84页 |
| ·植物材料:PPT抗性筛选后阳性转化甘蔗植株 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-84页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第77-79页 |
| ·融合CryIA(c)-2A-gna基因转化植株Southern Blot检测 | 第79-82页 |
| ·融合CryIA(c)-2A-gna基因转化植株的RT-PCR检测 | 第82-84页 |
| ·CryIA(c)-2A-gna转基因植株叶片蛋白提取液凝血活性测定 | 第84页 |
| ·CryIA(c)-2A-gna转基因植株Bt-Cry1Ab/Ac免疫检测试纸条检测 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-90页 |
| ·甘蔗总DNA的微量提取 | 第84-85页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第85-87页 |
| ·Southern Blot检测 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测结果 | 第88-89页 |
| ·凝血活性测定实验数据及SAS分析结果 | 第89页 |
| ·转基因植株的Bt-Cry1Ab/Ac免疫检测试纸条的检测 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-91页 |
| ·关于PPT筛选 | 第90页 |
| ·关于甘蔗DNA微量提取 | 第90-91页 |
| 4 小结 | 第91页 |
| 5 本实验研究的后续工作 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-95页 |
| 1 培养基及常用抗生素的配制 | 第92页 |
| ·培养基配制 | 第92页 |
| ·抗生素及激素的配制 | 第92页 |
| 2 实验仪器 | 第92-93页 |
| 3 英文缩写符号及中英文对照表 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 攻读博士期间发表论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
