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华癸中慢生根瘤菌7653R效应蛋白NopP的共生功能及蛋白互作研究

目录第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-9页
1 前言第9-20页
   ·根瘤的两种基本类型第10页
   ·根瘤菌与豆科植物共生结瘤的过程第10-18页
     ·结瘤因子(nod factor)第11-13页
     ·根瘤菌的分泌系统(Secretion System)第13-15页
     ·根瘤菌分泌的效应蛋白(Secreted Proteins)第15-18页
   ·NIP43蛋白简介第18-19页
   ·研究目的与意义第19-20页
2 材料与方法第20-31页
   ·实验材料第20-27页
     ·供试菌株和质粒第20-21页
     ·培养基第21-24页
     ·酶、试剂和试剂盒第24页
     ·抗生素第24-25页
     ·常用缓冲液与试剂第25-27页
     ·PCR引物第27页
   ·方法第27-31页
     ·分子生物学基本操作第27-28页
     ·酵母感受态制备第28页
     ·质粒的酵母转化第28-29页
     ·酵母小范围mating第29页
     ·PK19mob(Pknockout vector)单交换诱变方法第29-30页
     ·三亲本杂交技术第30页
     ·植物盆栽第30页
     ·固氮酶活的测定第30-31页
3 结果与分析第31-46页
   ·不同供试菌株接种宿主植物紫云英及百脉根的共生表型与分析第31-34页
     ·MAFF303099-nopP的构建与筛选第31-32页
     ·M.huakuii 7653R、M.loti MAFF303099接种紫云英的共生表型第32-33页
     ·M.loti MAFF303099和MAFF303099-nopP接种百脉根的共生表型第33-34页
   ·NopP-NIP43蛋白相互作用研究第34-41页
     ·NopP及同源蛋白的序列分析第35-37页
     ·pGBKT7-nopP载体的构建及自激活和毒性的检测第37-38页
     ·载体pGADT7-nopP和pGBKT7-nip43-c-pan的构建及自激活和毒性的检测第38-40页
     ·同源的NopP蛋白与NIP43蛋白的相互作用第40-41页
   ·根瘤菌7653R基因nopP突变株的构建第41-43页
     ·同源交换重组质粒Pk19-nopP的构建第41页
     ·nopP基因突变菌株的筛选第41-43页
     ·nopP突变株功能互补菌株的构建第43页
   ·华癸根瘤菌7653R nopP突变株的共生表型第43-45页
   ·华癸根瘤菌7653R基因nopP的表达检测第45-46页
4 小结与讨论第46-49页
   ·小结第46页
   ·讨论第46-49页
参考文献第49-56页
致谢第56页

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