| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 图表目录 | 第14-17页 |
| 英文缩略表 | 第17-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-29页 |
| ·几丁质 | 第18-19页 |
| ·几丁质 | 第18页 |
| ·几丁质的来源 | 第18页 |
| ·几丁质的结构 | 第18-19页 |
| ·几丁质的应用 | 第19页 |
| ·几丁质降解酶 | 第19-21页 |
| ·几丁质酶 | 第19页 |
| ·几丁质酶的来源及分类 | 第19页 |
| ·几丁质结合蛋白 | 第19-20页 |
| ·细菌来源几丁质结合蛋白的研究进展 | 第20-21页 |
| ·几丁质结合蛋白的催化机制 | 第21页 |
| ·细菌几丁质降解酶的研究进展 | 第21-27页 |
| ·产几丁质降解酶的细菌 | 第21页 |
| ·细菌几丁质降解酶的分类 | 第21-23页 |
| ·细菌来源外切几丁质酶的酶学性质 | 第23-25页 |
| ·细菌来源几丁质降解酶系的性质研究 | 第25-27页 |
| ·细菌来源几丁质降解酶系的协同作用研究 | 第27页 |
| ·课题背景及本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
| ·课题背景 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章 三种几丁质酶基因的克隆、表达及酶学性质的初步研究 | 第29-66页 |
| ·本章引言 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·菌株、质粒 | 第29页 |
| ·仪器，试剂 | 第29页 |
| ·主要试剂配制 | 第29-30页 |
| ·引物合成、测序、质谱 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-39页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 几丁质降解酶基因分析 | 第30页 |
| ·维氏气单胞菌基因组 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第31页 |
| ·几丁质酶基因表达载体（pPIC9-ChiC、pPIC9-ChiA、pPIC9-Chi92 和pPIC9-ChiP）的构建 | 第31-32页 |
| ·连接产物的转化及鉴定 | 第32页 |
| ·重组基因在毕赤酵母(P. pastoris) GS115 中的表达 | 第32-34页 |
| ·三个几丁质酶的性质分析 | 第34-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-64页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 几丁质降解酶基因分析 | 第39页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第39-47页 |
| ·几丁质酶基因表达载体的构建 | 第47页 |
| ·具有高几丁质酶活性转化子的筛选 | 第47页 |
| ·几丁质降解酶在毕赤酵母中摇瓶水平的表达及纯化 | 第47-49页 |
| ·几丁质酶酶学性质的分析 | 第49-60页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 几丁质酶基本酶学性质比较分析 | 第60页 |
| ·重组几丁质酶 Chi92 应用研究 | 第60-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·本章小结与后续工作 | 第65-66页 |
| ·基因突变 | 第65页 |
| ·密码子改造 | 第65页 |
| ·协同作用 | 第65-66页 |
| 第三章 几丁质结合蛋白基因的克隆、表达与性质研究 | 第66-73页 |
| ·本章引言 | 第66页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·菌株、质粒 | 第66页 |
| ·仪器、试剂 | 第66页 |
| ·主要试剂配制 | 第66页 |
| ·引物合成、测序、质谱 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-68页 |
| ·几丁质降解酶基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·几丁质结合蛋白基因表达载体 pPIC9-CBP 的构建 | 第67页 |
| ·几丁质结合蛋白表达载体的转化及鉴定 | 第67页 |
| ·几丁质结合蛋白 CBP 在毕赤酵母(P. pastoris) GS115 中的表达 ... | 第67页 |
| ·几丁质结合蛋白 CBP 的纯化与鉴定 | 第67页 |
| ·粘质沙雷氏菌几丁质结合蛋白 CBP21 蛋白的获得 | 第67页 |
| ·几丁质结合蛋白的结合活性分析 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-72页 |
| ·几丁质结合蛋白基因的克隆 | 第68-69页 |
| ·几丁质结合蛋白基因表达载体的构建 | 第69页 |
| ·具有高表达量几丁质结合蛋白转化子的筛选 | 第69-70页 |
| ·几丁质结合蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第70页 |
| ·几丁质结合蛋白结合活性的测定 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72页 |
| ·本章小结与后续工作 | 第72-73页 |
| 第四章 转录水平几丁质降解酶基因的表达水平的分析 | 第73-84页 |
| ·本章引言 | 第73页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·菌株 | 第73页 |
| ·仪器、试剂 | 第73页 |
| ·主要试剂配制 | 第73页 |
| ·引物合成、测序 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 稀释倍数曲线的绘制 | 第74页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 生长曲线的绘制 | 第74页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 实时荧光定量 PCR 分析 | 第74-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-82页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 稀释倍数曲线的绘制 | 第76-77页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 生长曲线的绘制 | 第77页 |
| ·维氏气单胞菌 B565 实时荧光定量 PCR 分析 | 第77-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 第五章 维氏气单胞菌几丁质降解酶协同作用的初步研究 | 第84-87页 |
| ·本章引言 | 第84页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·菌株、质粒 | 第84页 |
| ·仪器，试剂 | 第84页 |
| ·主要试剂配制 | 第84页 |
| ·引物合成、测序、质谱 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-85页 |
| ·维氏气单胞菌几丁质降解酶蛋白的获得 | 第84页 |
| ·几丁质结合蛋白促进几丁质酶活性分析 | 第84-85页 |
| ·结果与分析 | 第85-86页 |
| ·几丁质结合蛋白协同几丁质酶的作用研究 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86页 |
| ·本章小结与后续工作 | 第86-87页 |
| ·调整反应条件 | 第86页 |
| ·检测不同寡糖的产量 | 第86-87页 |
| 第六章 全文结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简历 | 第96页 |
