| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1 植物连作障碍的产生因素 | 第13-14页 |
| ·土壤有害微生物增加,土传病害发生严重 | 第13页 |
| ·土壤物理和化学性状的恶化 | 第13-14页 |
| ·植物化感自毒作用 | 第14页 |
| 2 化感自毒作用中的根系分泌物研究 | 第14-15页 |
| ·根系分泌物的获取方法 | 第14-15页 |
| ·根系分泌物对植物的影响 | 第15页 |
| ·根系分泌物对根际土壤内微生物的影响 | 第15页 |
| 3 化感作用的分子生物学研究 | 第15-16页 |
| 4 化感作用对幼根显微结构的影响 | 第16-17页 |
| 5 化感作用的利用 | 第17-18页 |
| ·指导农业生产 | 第17页 |
| ·筛选和培育化感新品种 | 第17页 |
| ·植物源除草剂的开发 | 第17-18页 |
| 6 甜瓜化感作用研究 | 第18页 |
| 7 本研究的目的意义、内容及技术路线 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18页 |
| ·本研究的内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 根系分泌物介导甜瓜自毒作用差异表达基因的cDNA-AFLP分析 | 第20-38页 |
| 1 材料与方法 | 第20-24页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·材料处理方法 | 第20页 |
| ·总RNA的获得和质量检测 | 第20页 |
| ·cDNA-AFLP分析 | 第20-24页 |
| ·双链cDNA的合成及纯化 | 第20-21页 |
| ·接头和引物的合成 | 第21页 |
| ·cDNA的酶切和连接 | 第21页 |
| ·预扩增 | 第21页 |
| ·选择性扩增体系和引物对筛选 | 第21页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21-22页 |
| ·差异表达基因片段的获得 | 第22-23页 |
| ·差异表达基因片段的分析 | 第23页 |
| ·部分相关基因的半定量表达分析 | 第23-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-35页 |
| ·不同处理样品总RNA的提取 | 第24页 |
| ·预扩增结果 | 第24-25页 |
| ·选择性扩增及引物对筛选 | 第25-27页 |
| ·根系分泌物介导的甜瓜化感自毒作用差异基因表达的cDNA-AFLP分析 | 第27-30页 |
| ·差异条带的二次PCR及回收纯化 | 第30页 |
| ·TDFs序列的比对和功能分析 | 第30-34页 |
| ·基因差异表达模式的RT-PCR分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 甜瓜自毒作用相关基因的克隆 | 第38-58页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·逆转录主要试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·材料处理及总RNA的获得和质量检测 | 第38页 |
| ·cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·目的基因3’RACE、5’RACE、ORF的PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·目的片段的回收纯化、连接、转化及鉴定 | 第40页 |
| ·序列拼接及全长序列分析 | 第40页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第40-41页 |
| ·甜瓜CmTIP、CmSCL13基因Real time-PCR分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-56页 |
| ·甜瓜CmTIP基因的克隆 | 第41-45页 |
| ·甜瓜CmTIP基因序列分析 | 第41-42页 |
| ·甜瓜CmTIP基因生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·甜瓜CmTIP编码氨基酸序列比对分析及跨膜结构预测与分析 | 第43-44页 |
| ·甜瓜CmTIP同源性与系统进化分析 | 第44-45页 |
| ·甜瓜CmTIP基因在不同胁迫处理时间下的定量PCR分析 | 第45页 |
| ·甜瓜CmSCL13基因的克隆 | 第45-50页 |
| ·甜瓜CmSCL13基因序列分析 | 第45-47页 |
| ·甜瓜CmSCL13基因生物信息学分析 | 第47-49页 |
| ·甜瓜CmSCL13编码氨基酸序列比对分析及系统进化树构建 | 第49-50页 |
| ·甜瓜CmSCL13基因在不同胁迫处理时间下的定量PCR分析 | 第50页 |
| ·甜瓜锌指蛋白基因的克隆 | 第50-56页 |
| ·甜瓜锌指蛋白基因序列分析 | 第51-53页 |
| ·甜瓜CCCH型锌指蛋白基因生物信息学分析 | 第53-54页 |
| ·甜瓜CCCH型锌指蛋白基因编码氨基酸序列比对及系统进化树分析 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| ·甜瓜CmTIP基因的研究意义 | 第56页 |
| ·甜瓜CmSCL13基因的研究意义 | 第56-57页 |
| ·甜瓜CCCH型锌指蛋白基因的研究意义 | 第57-58页 |
| 第四章 甜瓜自毒作用相关基因的遗传转化 | 第58-66页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·根癌农杆菌菌株和质粒 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·目的基因全长的获得 | 第58页 |
| ·PBI121质粒DNA及克隆载体质粒DNA的双酶切 | 第58-59页 |
| ·目的片段与表达载体的连接、转化、检测 | 第59页 |
| ·农杆菌的制备及转化 | 第59页 |
| ·农杆菌的侵染 | 第59-60页 |
| ·载体构建流程图 | 第60-61页 |
| ·转基因植株愈伤组织的获得 | 第61页 |
| ·转基因愈伤组织的检测 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-65页 |
| ·甜瓜CmTIP基因及CCCH型锌指蛋白基因全长的扩增结果 | 第62页 |
| ·重组质粒DNA的双酶切鉴定 | 第62-63页 |
| ·植物表达载体pBI121的双酶切结果 | 第63页 |
| ·连接到表达载体pBI121的目的基因的双酶切结果 | 第63-64页 |
| ·转基因愈伤组织的PCR鉴定 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 第五章 化感自毒作用对甜瓜根尖各分区解剖结构的影响 | 第66-73页 |
| 1 材料与方法 | 第66-67页 |
| ·植物材料 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·甜瓜植株根系分泌物的收集 | 第66页 |
| ·甜瓜植株浸提液的制备 | 第66页 |
| ·甜瓜植株根系分泌物的化感效应研究 | 第66页 |
| ·甜瓜植株浸提液的化感效应研究 | 第66-67页 |
| ·石蜡切片的制作和观察 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-71页 |
| ·根系分泌物对甜瓜根尖形态影响 | 第67页 |
| ·根系分泌物对甜瓜根冠及分生区的的影响 | 第67-68页 |
| ·根系分泌物对甜瓜根尖伸长区的影响 | 第68-69页 |
| ·植株浸提液对甜瓜根尖形态影响 | 第69页 |
| ·植株浸提液对甜瓜根冠及分生区的的影响 | 第69-71页 |
| ·植株浸提液对甜瓜根尖伸长区的影响 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 硕士在读期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
