| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| ·MAPK 级联信号途径 | 第14-20页 |
| ·植物中 MAPK 级联途径的发现 | 第14页 |
| ·植物 MAPK 级联途径的结构 | 第14-15页 |
| ·植物 MAPK 级联途径的分类 | 第15-20页 |
| ·植物中 MAPKKs 的生物学功能 | 第20-22页 |
| ·MAPKKs 与高盐、干旱信号传递 | 第20页 |
| ·MAPKKs 与植物病原信号传递 | 第20-21页 |
| ·MAPKKs 与活性氧 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-47页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·植物材料的培养与处理 | 第23-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第24-25页 |
| ·PCR 引物 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-47页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·利用 Trizol 试剂提取总 RNA | 第26页 |
| ·利用 CTAB 法提取总 RNA | 第26-27页 |
| ·RNA 的纯化 | 第27-28页 |
| ·RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第27页 |
| ·琼脂糖变性凝胶电泳检测 RNA 质量 | 第27-28页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第28页 |
| ·cDNA 的纯化和末端加尾反应（用于 5'RACE） | 第28-29页 |
| ·cDNA 的纯化 | 第28页 |
| ·cDNA 5'末端加尾反应 | 第28-29页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·CTAB 法提取基因组 DNA | 第29页 |
| ·小量法提取基因组 DNA | 第29-30页 |
| ·目的片段的回收 | 第30页 |
| ·目的片段与克隆载体连接 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第31页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取 | 第31-33页 |
| ·大量法提取质粒 DNA | 第31-32页 |
| ·试剂盒微量提取质粒 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第33页 |
| ·DNA 序列测定 | 第33页 |
| ·GhMKK1 全长 cDNA 序列的获得 | 第33-37页 |
| ·利用简并性引物进行 PCR 扩增以获取中间片段 | 第33-34页 |
| ·5'RACE 获取 5'末端序列 | 第34-35页 |
| ·3'RACE 获取 3'末端序列 | 第35-37页 |
| ·cDNA 全长序列的获取 | 第37页 |
| ·GhMKK1 全长基因组序列的获取 | 第37-38页 |
| ·基因瞬时表达 | 第38-40页 |
| ·制备洋葱表皮瞬时表达载体 | 第38-39页 |
| ·基因枪微弹的制备 | 第39页 |
| ·基因枪转化 | 第39-40页 |
| ·植物表达载体的构建与转化 | 第40-42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第41-42页 |
| ·农杆菌培养 | 第42页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第42页 |
| ·转基因烟草鉴定 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草生理活性分析 | 第43-44页 |
| ·氧自由基含量测定 | 第43-44页 |
| ·酶活性含量测定 | 第44页 |
| ·转基因本生烟抗病性分析 | 第44-45页 |
| ·病原菌培养基的配制 | 第44页 |
| ·病原菌的活化 | 第44-45页 |
| ·病原真菌离体接种 | 第45页 |
| ·病原细菌离体接种 | 第45页 |
| ·转基因植株抗病性数据统计 | 第45页 |
| ·半定量 RT-PCR 分析 | 第45-46页 |
| ·组织化学染色分析 | 第46-47页 |
| ·数据库及网络资源 | 第47页 |
| ·生物学软件 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-68页 |
| ·棉花 GhMKK1 基因的分离 | 第47-49页 |
| ·棉花 RNA 的提取及反转录 | 第47页 |
| ·GhMKK1 中间片段的分离 | 第47-48页 |
| ·GhMKK15'片段的分离 | 第48页 |
| ·GhMKK13'片段的分离 | 第48页 |
| ·GhMKK1 全长 cDNA 的分离 | 第48-49页 |
| ·GhMKK1 的序列分析 | 第49-53页 |
| ·GhMKK1 的全长 cDNA 序列分析 | 第49-51页 |
| ·GhMKK1 蛋白序列分析 | 第51-53页 |
| ·GhMKK1 基因组序列分析 | 第53页 |
| ·GhMKK1 的亚细胞定位分析 | 第53-54页 |
| ·GhMKK1 基因的表达特性分析 | 第54-56页 |
| ·GhMKK1 超表达本生烟的获得及鉴定 | 第56-57页 |
| ·GhMKK1 超表达载体的构建及获得 | 第56-57页 |
| ·GhMKK1 超表达本生烟的鉴定 | 第57页 |
| ·GhMKK1 超表达植株对非生物胁迫的抗性分析 | 第57-62页 |
| ·GhMKK1 超表达植株对高盐的抗性分析 | 第58-59页 |
| ·GhMKK1 超表达植株对干旱的抗性分析 | 第59-62页 |
| ·GhMKK1 超表达植株的抗氧化分析 | 第62-65页 |
| ·GhMKK1 介导的转基因本生烟中活性氧的积累 | 第62-63页 |
| ·GhMKK1 超表达植株对活性氧的抗性分析 | 第63-65页 |
| ·GhMKK1 超表达植株对生物胁迫的抗性分析 | 第65-68页 |
| ·GhMKK1 超表达植株提高了植株对病原菌的敏感性 | 第65-66页 |
| ·GhMKK1 超表达对转基因植株中抗性相关基因的影响 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表主要论文情况 | 第77页 |
