| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| ·Ran蛋白网络 | 第15-16页 |
| ·Ran蛋白网络 | 第15页 |
| ·Ran蛋白活性的调控 | 第15-16页 |
| ·Ran蛋白网络基本功能 | 第16页 |
| ·Ran结合蛋白1 | 第16页 |
| ·Ran结合蛋白1的结构 | 第16-17页 |
| ·RanBP1的功能 | 第17-19页 |
| ·RanBP1参与调控核质转运 | 第17页 |
| ·RanBP1参与核膜重建 | 第17-18页 |
| ·RanBP1参与调控DNA复制 | 第18-19页 |
| ·RanBP1参与调控纺锤体组装 | 第19页 |
| ·RanBP1的研究现状 | 第19-21页 |
| ·RanBP1随细胞周期而变化 | 第19-20页 |
| ·RanBP1对有丝分裂的调节 | 第20页 |
| ·RanBP1对纺锤体组装的调节 | 第20-21页 |
| ·RanBP1在细胞凋亡中的作用 | 第21页 |
| ·四膜虫概述 | 第21-23页 |
| ·本课题的研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 嗜热四膜虫中RBP1基因的鉴定及其序列分析 | 第25-33页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·试剂与工具酶 | 第25页 |
| ·实验所用引物 | 第25-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂配制 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·嗜热四膜虫细胞的培养、饥饿与交配 | 第26页 |
| ·嗜热四膜虫RBP1基因的克隆 | 第26-28页 |
| ·RBP1基因的表达谱分析 | 第28-29页 |
| ·Rbp1p蛋白序列及聚类分析 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| ·RBP1基因序列的克隆 | 第29-30页 |
| ·RBP1基因的表达谱分析 | 第30页 |
| ·Rbp1p蛋白序列及进化分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 嗜热四膜虫中Rbp1p亚细胞定位分析 | 第33-51页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·试剂与工具酶 | 第33页 |
| ·实验所用引物 | 第33-34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂配制 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-46页 |
| ·嗜热四膜虫细胞的培养、饥饿和交配 | 第35页 |
| ·嗜热四膜虫pXS-RBP1过表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·嗜热四膜虫pNeo-HA-RBP1重组载体的构建 | 第37-43页 |
| ·嗜热四膜虫细胞转化 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第44页 |
| ·嗜热四膜虫基因组的快速提取与PCR鉴定 | 第44-45页 |
| ·免疫荧光定位 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·pNeo-HA-RBP1的构建及其重组鉴定 | 第46-47页 |
| ·Rbp1p在嗜热四膜虫营养生殖时期的定位 | 第47页 |
| ·Rbp1p在嗜热四膜虫接合时期的定位 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 嗜热四膜虫中Rbp1p异常表达导致细胞核分裂异常 | 第51-60页 |
| ·前言 | 第51页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·菌株和质粒 | 第51页 |
| ·试剂与工具酶 | 第51页 |
| ·实验所用引物 | 第51-52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂配制 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·嗜热四膜虫细胞的培养 | 第52页 |
| ·嗜热四膜虫pXS-RBP1过表达载体的构建 | 第52页 |
| ·嗜热四膜虫pNeo-RBP1敲除载体的构建 | 第52页 |
| ·嗜热四膜虫细胞转化 | 第52页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第52-53页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第53页 |
| ·DAPI染色 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-58页 |
| ·pXS-RBP1过表达载体的构建及其重组鉴定 | 第53-54页 |
| ·不同浓度Cd~(2+)诱导下RBP1基因转录水平的测定 | 第54-55页 |
| ·过表达Rbp1p导致异常细胞核分裂 | 第55-56页 |
| ·pNeo-RBP1载体的构建及其重组鉴定 | 第56-57页 |
| ·敲减株RBP1基因转录水平的测定 | 第57页 |
| ·RBP1敲减抑制大核无丝分裂 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 总结与展望 | 第67-69页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简况及联系方式 | 第71-73页 |
