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木薯块根淀粉代谢相关基因克隆和表达分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 引言第11-24页
   ·木薯的生物学特性第11-12页
   ·木薯的生长发育特点第12页
   ·木薯的广泛利用第12-14页
     ·食用价值第13页
     ·动物饲料第13页
     ·工业应用第13-14页
   ·淀粉的生物合成第14-20页
     ·淀粉和淀粉颗粒的结构第14-16页
     ·淀粉的生物合成第16-20页
       ·ADP焦磷酸化酶第16-18页
       ·淀粉合酶第18-19页
       ·淀粉分支酶第19-20页
   ·荧光定量PCR的发展和应用第20-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
   ·技术路线第23-24页
第二章 华南8号木薯不同时期块根各个基因的表达分析第24-34页
   ·材料和方法第24-28页
     ·实验材料和仪器试剂第24-25页
       ·材料的种植和采集第24页
       ·主要试剂第24-25页
       ·主要仪器第25页
     ·实验方法第25-28页
       ·木薯块根RNA的提取第25-26页
       ·cDNA的合成第26页
       ·半定量PCR分析第26-27页
       ·荧光定量PCR分析第27-28页
   ·结果与分析第28-32页
     ·RNA提取、第一链合成及检测第28页
     ·木薯块根差异蛋白点的挑选第28-29页
     ·不同时期木薯块根中各个基因的表达分析第29-32页
   ·讨论第32-34页
第三章 华南8号木薯淀粉代谢相关基因的克隆和功能分析第34-60页
   ·实验方法第34-44页
     ·基因保守区扩增第34-35页
     ·基因3'RACE扩增第35页
     ·基因5'RACE扩增第35-36页
     ·拟南芥14-3-3蛋白超量表达实验第36-38页
       ·构建超量表达载体第36-37页
       ·拟南芥转化第37-38页
     ·大肠杆菌感受态的制备和转化第38-39页
     ·农杆菌感受态的制备和转化第39-40页
     ·构建原核表达载体第40-41页
     ·原核表达蛋白的纯化第41-42页
     ·多克隆兔血清抗体的制备第42-43页
     ·Western杂交实验第43-44页
   ·实验材料第44页
   ·结果与分析第44-58页
     ·保守区片段第44-45页
     ·3'RACE扩增第45-46页
     ·5'RACE扩增第46-47页
     ·序列分析第47-51页
       ·苹果酸脱氢酶序列分析第47-49页
       ·UDP-木糖合酶序列分析第49-51页
     ·14-3-3超表达载体构建第51-54页
       ·构建超表达载体第51-52页
       ·拟南芥转化第52-54页
     ·原核表达载体的构建及蛋白纯化第54-58页
       ·构建原核表达载体第54-56页
       ·原核表达蛋白的纯化第56-57页
       ·western杂交检测第57-58页
   ·讨论第58-60页
第四章 不同品种木薯块根的可溶性糖及淀粉含量比较及相关基因表达分析第60-68页
   ·实验方法第60-63页
     ·木薯块根可溶性糖含量测定第60-61页
     ·木薯块根淀粉含量测定第61-62页
     ·淀粉代谢相关基因的荧光定量分析第62-63页
   ·实验材料第63页
   ·结果与分析第63-67页
     ·不同品种木薯块根可溶性糖含量测定第63-64页
     ·不同品种木薯块根淀粉含量测定第64-65页
     ·淀粉代谢相关基因在不同品种木薯中的荧光定量分析第65-67页
   ·讨论第67-68页
第五章 结论第68-69页
参考文献第69-74页

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