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ZmCIPK8互作蛋白CBLs的筛洗

致谢第1-9页
摘要第9-10页
第一章 文献综述第10-17页
   ·植物应对逆境胁迫的调控模式第10页
   ·植物体内特异钙信号的产生第10-11页
   ·高等植物中钙离子的靶蛋白第11-13页
     ·CDPK 家族第11页
     ·钙调素类超蛋白第11-12页
     ·CBL 家族第12-13页
   ·CBL/CIPK 信号系统第13-16页
     ·CIPK 家族第13页
     ·CBL/CIPK 的特异性互作第13-14页
     ·CBLs 与 CIPKs 的亚细胞定位和特异性表达第14-15页
     ·CBL/CIPK 系统与植物的抗逆性第15-16页
   ·研究目的及意义第16-17页
第二章 ZmCIPK8 及 CBLs 序列分析第17-23页
   ·引言第17页
   ·方法第17页
     ·ZmCIPK8 及 CBLs 基因序列的获取第17页
     ·蛋白序列分析方法第17页
       ·蛋白序列比对第17页
       ·进化树分析第17页
       ·蛋白功能位点分析第17页
   ·结果第17-22页
     ·玉米中的 CIPK8 及 CBLs 基因序列第17页
     ·ZmCIPK8 及 10 个 CBL 的蛋白序列分析第17-22页
       ·ZmCIPK8 的蛋白序列分析第17-18页
       ·10 个 CBL 蛋白序列分析第18-22页
   ·结论与讨论第22-23页
第三章 酵母双杂交筛选与 ZmCIPK8 互作的 CBLs第23-44页
   ·引言第23页
   ·材料第23-26页
     ·玉米材料与载体第23-24页
     ·实验试剂及仪器第24页
     ·常用试剂及缓冲液配置方法第24-25页
     ·培养基第25-26页
   ·方法第26-36页
     ·载体构建第26-33页
       ·ZmCIPK8 及 CBLs 目的基因的克隆第26-30页
       ·PCR 产物的回收第30页
       ·回收 DNA 片段连接 PMD19-T 载体第30页
       ·连接产物转化大肠杆菌 DH5a第30-31页
       ·质粒 DNA 的提取第31-32页
       ·质粒鉴定第32-33页
       ·测序比对第33页
       ·诱饵载体及猎物载体的构建第33页
     ·诱饵的自激活验证第33-34页
     ·共转化法进行酵母双杂交筛选第34-36页
       ·酵母感受态的制备第34页
       ·共转化第34-35页
       ·酵母克隆的阳性鉴定第35页
       ·X-gal 染色活性测定第35-36页
   ·实验结果第36-43页
     ·载体构建第36-39页
       ·ZmCIPK8 及 CBLs 基因的克隆第36-37页
       ·ZmCIPK8 及 CBLs 基因 PCR 扩增结果第37-38页
       ·载体构建第38-39页
     ·自激活检测结果第39-40页
     ·酵母双杂交筛选结果第40-41页
     ·酵母质粒的 PCR 检测第41-42页
     ·X-gal 染色活性结果第42-43页
   ·讨论第43-44页
第四章 酵母双杂交筛选出的 CBLs 基因的表达分析和亚细胞定位第44-53页
   ·引言第44页
   ·材料第44-45页
     ·玉米材料第44页
     ·洋葱材料第44页
     ·实验试剂及仪器第44页
     ·常用溶液及缓冲液第44页
     ·培养基第44-45页
   ·方法第45-48页
     ·半定量 RT-PCR第45-46页
       ·TRIzol 法提取总 RNA第45页
       ·RNA 纯化第45页
       ·RNA 反转录成 cDNA第45页
       ·RT-PCR第45-46页
       ·引物第46页
     ·亚细胞定位第46-48页
       ·CBL1、CBL4、CBL9 三个目的基因的扩增第46-47页
       ·PS1300-CBL1,PS1300-CBL4,PS1300-CBL9 载体构建第47页
       ·质粒转化农杆菌 EH105第47-48页
       ·瞬时表达第48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·RT-PCR第48-49页
     ·亚细胞定位第49-51页
       ·基因克隆第49-50页
       ·融合表达载体的构建第50-51页
     ·亚细胞定位结果第51-52页
   ·讨论第52-53页
参考文献第53-60页
英文摘要第60-61页

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