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JAK/STAT信号通路在DON和T-2毒素对RAW264.7细胞毒性作用中的机制研究

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
缩略语表第15-17页
1. 前言第17-22页
   ·研究背景第17-19页
   ·JAK/STAT信号通路研究进展第19-20页
   ·本课题研究思路第20-21页
   ·研究内容和目标第21-22页
2. 材料和方法第22-40页
   ·细胞株第22页
   ·药品和试剂第22-24页
   ·主要仪器和设备第24-25页
   ·溶液配制第25-27页
   ·细胞的复苏、传代和冻存第27-28页
   ·MTT法检测DON和T-2毒素对RAW264.7细胞的活力影响第28页
   ·实时荧光定量PCR检测通路相关基因mRNA的表达第28-33页
     ·细胞处理及分组第28-29页
     ·总RNA的提取第29-30页
     ·总RNA纯度及完整性的检测第30页
     ·逆转录反应第30页
     ·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平第30-33页
   ·Western blot方法测定STAT1和STAT3的磷酸化水平第33-37页
     ·细胞处理及分组第33页
     ·细胞蛋白提取第33-34页
     ·蛋白浓度测定第34页
     ·SDS-PAGE电泳第34-35页
     ·Westerm印迹杂交第35-37页
   ·Annexin-Ⅴ FITC/PI双染法检测细胞凋亡第37-38页
   ·细胞线粒体膜电位的检测第38页
   ·细胞周期的检测第38-39页
   ·统计学分析第39-40页
3. 结果与分析第40-63页
   ·DON和T-2毒素致RAW264.7细胞剂量及时间依赖性毒性作用第40-41页
   ·细胞RNA质量的鉴定第41页
   ·DON和T-2毒素对RAW264.7细胞炎性细胞因子mRNA水平的影响第41-42页
   ·DON和T-2毒素对负反馈调节蛋白SOCS mRNA水平的影响第42-43页
   ·DON和T-2毒素对JAK/STAT信号通路关键分子mRNA水平的影响第43-45页
   ·在通路抑制剂的干预下DON和T-2毒素对JAK/STAT信号通路中关键分子mRNA水平的影响第45-47页
   ·DON和T-2毒素对转录因子STAT1和STAT3蛋白表达的研究第47-49页
   ·JAK/STAT通路对DON和T-2毒素诱导炎性细胞因子表达的研究第49-50页
   ·DON和T-2毒素诱导STAT1和STAT3基因表达时效关系的研究第50-53页
   ·MAPK与JAK/STAT通路交互作用的研究第53-54页
   ·DON和T-2毒素对细胞凋亡的影响第54-56页
   ·DON和T-2毒素对细胞膜电位的影响第56-57页
   ·JAK/STAT通路对DON和T-2毒素诱导细胞凋亡的机理研究第57-59页
   ·DON和T-2毒素对细胞周期的影响第59-62页
   ·DON和T-2毒素对细胞周期相关基因p21和CyclinD1表达的影响第62-63页
4. 讨论第63-76页
   ·在单端孢毒素诱导下的炎性细胞因子调控方式第63-66页
   ·JAK/STAT信号通路激活的毒理学意义及其与MAPK潜在的交互作用第66-68页
   ·JAK/STAT信号通路对细胞凋亡的影响第68-70页
   ·JAK/STAT信号通路对细胞周期阻滞效应的影响第70-72页
   ·SOCS对单端孢类毒素潜在的毒理学意义第72-76页
5. 全文总结第76-77页
文献综述第77-94页
参考文献第94-109页
致谢第109-110页
附录第110-116页

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