摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
缩略语表 | 第15-17页 |
1. 前言 | 第17-22页 |
·研究背景 | 第17-19页 |
·JAK/STAT信号通路研究进展 | 第19-20页 |
·本课题研究思路 | 第20-21页 |
·研究内容和目标 | 第21-22页 |
2. 材料和方法 | 第22-40页 |
·细胞株 | 第22页 |
·药品和试剂 | 第22-24页 |
·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
·溶液配制 | 第25-27页 |
·细胞的复苏、传代和冻存 | 第27-28页 |
·MTT法检测DON和T-2毒素对RAW264.7细胞的活力影响 | 第28页 |
·实时荧光定量PCR检测通路相关基因mRNA的表达 | 第28-33页 |
·细胞处理及分组 | 第28-29页 |
·总RNA的提取 | 第29-30页 |
·总RNA纯度及完整性的检测 | 第30页 |
·逆转录反应 | 第30页 |
·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第30-33页 |
·Western blot方法测定STAT1和STAT3的磷酸化水平 | 第33-37页 |
·细胞处理及分组 | 第33页 |
·细胞蛋白提取 | 第33-34页 |
·蛋白浓度测定 | 第34页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
·Westerm印迹杂交 | 第35-37页 |
·Annexin-Ⅴ FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
·细胞线粒体膜电位的检测 | 第38页 |
·细胞周期的检测 | 第38-39页 |
·统计学分析 | 第39-40页 |
3. 结果与分析 | 第40-63页 |
·DON和T-2毒素致RAW264.7细胞剂量及时间依赖性毒性作用 | 第40-41页 |
·细胞RNA质量的鉴定 | 第41页 |
·DON和T-2毒素对RAW264.7细胞炎性细胞因子mRNA水平的影响 | 第41-42页 |
·DON和T-2毒素对负反馈调节蛋白SOCS mRNA水平的影响 | 第42-43页 |
·DON和T-2毒素对JAK/STAT信号通路关键分子mRNA水平的影响 | 第43-45页 |
·在通路抑制剂的干预下DON和T-2毒素对JAK/STAT信号通路中关键分子mRNA水平的影响 | 第45-47页 |
·DON和T-2毒素对转录因子STAT1和STAT3蛋白表达的研究 | 第47-49页 |
·JAK/STAT通路对DON和T-2毒素诱导炎性细胞因子表达的研究 | 第49-50页 |
·DON和T-2毒素诱导STAT1和STAT3基因表达时效关系的研究 | 第50-53页 |
·MAPK与JAK/STAT通路交互作用的研究 | 第53-54页 |
·DON和T-2毒素对细胞凋亡的影响 | 第54-56页 |
·DON和T-2毒素对细胞膜电位的影响 | 第56-57页 |
·JAK/STAT通路对DON和T-2毒素诱导细胞凋亡的机理研究 | 第57-59页 |
·DON和T-2毒素对细胞周期的影响 | 第59-62页 |
·DON和T-2毒素对细胞周期相关基因p21和CyclinD1表达的影响 | 第62-63页 |
4. 讨论 | 第63-76页 |
·在单端孢毒素诱导下的炎性细胞因子调控方式 | 第63-66页 |
·JAK/STAT信号通路激活的毒理学意义及其与MAPK潜在的交互作用 | 第66-68页 |
·JAK/STAT信号通路对细胞凋亡的影响 | 第68-70页 |
·JAK/STAT信号通路对细胞周期阻滞效应的影响 | 第70-72页 |
·SOCS对单端孢类毒素潜在的毒理学意义 | 第72-76页 |
5. 全文总结 | 第76-77页 |
文献综述 | 第77-94页 |
参考文献 | 第94-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
附录 | 第110-116页 |