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稳定表达猪CD163蛋白的HEK-293细胞系的建立和鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-12页
第1章 文献综述第12-21页
   ·猪繁殖与呼吸综合征简介第12-16页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学与免疫学研究进展第12-13页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展第13-16页
   ·CD163分子第16-21页
     ·CD163的结构、功能和表达分布第16-18页
     ·构建表达CD163蛋白的细胞系研究进展第18-19页
     ·CD163与猪繁殖与呼吸综合征病毒相互作用的结构域研究进展第19-21页
第2章 研究目的和意义第21-22页
第3章 材料和方法第22-39页
   ·试验材料第22-27页
     ·细胞、毒株与菌株第22页
     ·质粒与载体第22-23页
     ·工具酶及主要试剂第23-24页
     ·培养基与抗生素及其配制第24-25页
     ·抗体第25页
     ·主要缓冲液与相关试剂及其配制第25-27页
   ·试验方法第27-39页
     ·猪CD163基因的克隆第27-33页
     ·稳定表达猪CD163蛋白的HEK-293细胞系的构建第33-38页
     ·PRRSV感染稳定表达猪CD163蛋白HEK-293细胞系的验证实验第38-39页
第4章 结果与分析第39-50页
   ·猪CD163基因的克隆和序列分析第39-42页
     ·猪CD163基因的克隆第39-40页
     ·猪CD163基因的序列分析第40-41页
     ·真核表达质粒pCDNA3.1/V5-pCD163的构建第41-42页
   ·稳定表达猪CD163蛋白的HEK-293细胞系的建立和鉴定第42-44页
     ·RT-PCR检测HEK-293-pCD163细胞系猪CD163基因的转录第42-43页
     ·免疫荧光检测HEK-293-pCD163细胞系猪CD163蛋白的表达第43页
     ·HEK-293-pCD163细胞系表达猪CD163蛋白的Western Blot分析第43-44页
   ·PRRSV成功感染HEK-293-pCD163细胞系的验证实验第44-47页
     ·RT-PCR检测证实PRRSV能感染HEK-293-pCD163细胞系第44-45页
     ·免疫荧光检测PRRSV在HEK-293-pCD163细胞系中的增殖第45-46页
     ·PRRSV感染HEK-293-pCD163细胞系的Western Blot分析第46-47页
   ·HEK-293-pCD163细胞系感染PRRSV后的细胞病变分析第47-48页
   ·HEK-293-pCD163细胞系中PRRSV增殖曲线的测定第48-50页
第5章 讨论与结论第50-53页
   ·讨论第50-52页
   ·结论第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57页

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