| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-12页 |
| 目次 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| ·真核生物可变剪接与互斥剪接研究进展 | 第14-23页 |
| ·可变剪接 | 第14-15页 |
| ·可变剪接的类型 | 第15-16页 |
| ·RNA二级结构与可变剪接 | 第16-17页 |
| ·互斥剪接 | 第17-19页 |
| ·多药耐药性蛋白(MRP)基因的研究进展 | 第19-23页 |
| ·Ⅰ型糖尿病及其治疗的研究 | 第23-31页 |
| ·Ⅰ型糖尿病的发生 | 第23-24页 |
| ·Ⅰ型糖尿病的口服耐受 | 第24-27页 |
| ·霍乱毒素B亚基(CTB)粘膜佐剂 | 第27-28页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统 | 第28-31页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第31-36页 |
| ·研究目的及意义 | 第31-33页 |
| ·研究内容 | 第33-34页 |
| ·果蝇MRP1互斥剪接机制的初步研究 | 第33页 |
| ·家蚕表达的CTB与人GAD65融合蛋白抗Ⅰ型糖尿病的研究 | 第33-34页 |
| ·技术路线 | 第34-36页 |
| ·黑腹果蝇MRP1基因互斥剪接机制的研究 | 第34-35页 |
| ·家蚕表达霍乱毒素B亚基与人谷氨酸脱羧酶融合蛋白抗Ⅰ型糖尿病的研究 | 第35-36页 |
| 第三章 果蝇MRP1互斥剪接机制的初步研究 | 第36-57页 |
| ·材料与试剂 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-47页 |
| ·黑腹果蝇及其他果蝇物种MRP1基因序列分析 | 第37-38页 |
| ·果蝇物种MRP1基因可变外显子之间内含子序列二级结构预测 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·黑腹果蝇成虫基因组提取 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR产物的割胶回收(BioFlux的Biospin Gel Extraction Kit) | 第41页 |
| ·PCR产物与T载体连接反应 | 第41-42页 |
| ·E.coli TG1感受态细胞的制备(CPG法) | 第42页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第42页 |
| ·挑斑及菌液培养 | 第42-43页 |
| ·质粒DNA提取(Axygen Plasmid Miniprep Kit) | 第43页 |
| ·质粒酶切鉴定 | 第43页 |
| ·目的基因片段测序 | 第43-44页 |
| ·野生型表达载体构建(WT-MRP1) | 第44页 |
| ·minigen(WT-MRP1)转染果蝇S2细胞 | 第44-45页 |
| ·转染细胞总RNA提取 | 第45页 |
| ·RNA逆转录(SuperScriptⅢ First-Strand Synthesis System) | 第45-46页 |
| ·RT-PCR反应 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR产物酶切表达检测 | 第47页 |
| ·MRP1基因发育阶段特异性表达检测 | 第47页 |
| ·突变体构建及表达检测 | 第47页 |
| ·实验结果与分析 | 第47-54页 |
| ·果蝇物种MRP1基因互斥外显子分析 | 第47-49页 |
| ·黑腹果蝇MRP1基因发育阶段表达分析 | 第49-50页 |
| ·黑腹果蝇MRP1基因互斥剪接调控的研究 | 第50-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 家蚕表达的CTB与人GAD65融合蛋白抗Ⅰ型糖尿病研究 | 第57-78页 |
| ·材料与试剂 | 第57-60页 |
| ·实验方法 | 第60-69页 |
| ·CTB与hGAD65融合基因的构建 | 第60-63页 |
| ·重组质粒Bacmid构建 | 第63-65页 |
| ·重组杆状病毒的筛选 | 第65-66页 |
| ·重组蛋白在家蚕细胞与蚕蛹中的Western Blot检测 | 第66-68页 |
| ·重组蛋白在家蚕细胞与蚕蛹中与GM1结合力检测 | 第68-69页 |
| ·实验结果与分析 | 第69-76页 |
| ·构建CTB-hGAD65融合基因的Bacmid载体 | 第69-72页 |
| ·重组杆状病毒获得 | 第72-73页 |
| ·重组融合蛋白在家蚕中的Western blot检测 | 第73-75页 |
| ·重组融合蛋白的GM1受体结合能力分析 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 研究的创新点及展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 个人简历 | 第86页 |
