| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·脂肪酸的研究进展 | 第15-19页 |
| ·肌内脂肪生物学特性 | 第15-16页 |
| ·脂肪酸的分类和功能 | 第16-17页 |
| ·脂肪酸代谢机制 | 第17-18页 |
| ·肌内脂肪的测定技术 | 第18-19页 |
| ·肌内脂肪含量相关基因的研究 | 第19页 |
| ·固醇调节元件结合蛋白 1（SREBP1） | 第19-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 SREBP1 基因相关性研究 | 第23-35页 |
| ·实验材料和方法 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·样品采集 | 第23页 |
| ·表型性状 | 第23-25页 |
| ·主要仪器设备、试剂及配制方法 | 第25-26页 |
| ·主要试剂及来源 | 第25页 |
| ·主要实验设备及来源 | 第25页 |
| ·试验过程中所需试剂配制 | 第25-26页 |
| ·试验方法与步骤 | 第26-30页 |
| ·牛血样基因组 DNA 提取 | 第26页 |
| ·牛肌肉组织样 DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·基因组 DNA 的检测 | 第27页 |
| ·目的基因的扩增与分型 | 第27-28页 |
| ·统计分析方法 | 第28-29页 |
| ·统计分析方法 | 第29-30页 |
| ·结果分析 | 第30-33页 |
| ·DNA 提取结果 | 第30页 |
| ·SREBP1 基因 SNP 基因型检测 | 第30-31页 |
| ·等位基因和基因型频率分布 | 第31页 |
| ·SREBP1 基因多态性与肉质性状关联分析 | 第31-32页 |
| ·SREBP1 基因多态性与西门塔尔牛肌内脂肪含量关联分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 牛 SREBP1 基因真核表达载体的构建 | 第35-47页 |
| ·材料和方法 | 第35-36页 |
| ·细菌和载体质粒 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备、试剂及配制方法 | 第36-37页 |
| ·试验过程中所需试剂配制 | 第36-37页 |
| ·主要实验仪器设备及来源 | 第37页 |
| ·试验方法与步骤 | 第37-42页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·肌肉组织总 RNA 提取 | 第38-39页 |
| ·克隆目的基因 | 第39-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·牛 SREBP1 基因的 RT-PCR 扩增及 TA 克隆与序列分析 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·载体构建和优化 | 第44-45页 |
| ·菌体培养及质粒纯化要注意的问题 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第四章 SREBP1 基因功能验证 | 第47-59页 |
| ·材料和方法 | 第47页 |
| ·细胞和质粒 | 第47页 |
| ·主要仪器设备、试剂及配制方法 | 第47-49页 |
| ·主要试验仪器设备及来源 | 第47-48页 |
| ·主要试剂及来源 | 第48页 |
| ·试验过程中所需试剂配制 | 第48-49页 |
| ·试验方法和步骤 | 第49-52页 |
| ·细胞计数方法 | 第49页 |
| ·牛胎儿骨骼肌成纤维细胞的培养 | 第49页 |
| ·脂质体介导重组质粒转染牛胎儿骨骼肌成纤维细胞 | 第49-50页 |
| ·转染后细胞产物分析 | 第50页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第50页 |
| ·实时荧光定量试验 | 第50-51页 |
| ·细胞总蛋白提取及 Western blotting 检测 | 第51页 |
| ·油红 O 染色 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·牛胎儿骨骼肌成纤维细胞的培养 | 第52页 |
| ·重组质粒转染牛胎儿骨骼肌成纤维细胞后绿色荧光观察 | 第52-53页 |
| ·重组质粒转染牛胎儿骨骼肌成纤维细胞后实时荧光定量检测结果 | 第53-54页 |
| ·重组质粒转染牛胎儿骨骼肌成纤维细胞后 Western blotting 检测 | 第54页 |
| ·重组质粒转染牛胎儿骨骼肌成纤维细胞后油红 O 染色结果 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·SREBP1 基因研究进展 | 第55-56页 |
| ·SREBP1 基因研究结果与讨论 | 第56-57页 |
| ·细胞培养及转染试验过程中要注意的问题 | 第57页 |
| ·过表达产物检测试验过程中要注意的问题 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第五章 全文结论 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第59页 |
| ·创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
