| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-34页 |
| 第一章 植物与病原菌互作机制的研究进展 | 第13-28页 |
| 1 植物与病原菌之间的互作 | 第13-14页 |
| 2 植物PRR蛋白对病原菌PAMP的识别作用 | 第14-19页 |
| ·FLS2与flg22的识别及互作 | 第15-17页 |
| ·ERF与EF-Tu的识别及互作 | 第17-18页 |
| ·PRR蛋白与其它PAMP的识别及互作 | 第18-19页 |
| 3 植物NB-LRR蛋白对Effectors的识别作用 | 第19-23页 |
| ·NB-LRR蛋白与Effectors之间的互作模式 | 第19-21页 |
| ·R基因与Effectors的协同进化 | 第21-23页 |
| 4 病原菌效应分子毒性靶标的研究 | 第23-26页 |
| ·细菌效应分子与靶标蛋白的互作 | 第23-24页 |
| ·真菌效应分子与靶标蛋白的互作 | 第24-25页 |
| ·卵菌效应分子与靶标蛋白的互作 | 第25-26页 |
| 5 效应分子靶标筛选的主要方法-酵母双杂交 | 第26-27页 |
| 6 总结与展望 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 下篇 研究内容 | 第34-81页 |
| 第二章 大豆疫霉效应分子Avh238寄主靶标的筛选及功能分析 | 第35-77页 |
| 摘要 | 第35-36页 |
| ABSTRACT | 第36-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-52页 |
| ·试剂及培养基 | 第38-39页 |
| ·Gateway技术构建酵母表达载体 | 第39页 |
| ·蛋白表达载体构建 | 第39页 |
| ·酵母菌株与培养条件 | 第39-40页 |
| ·诱饵蛋白自激活活性的检测 | 第40页 |
| ·大豆茎cDNA文库构建 | 第40页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法 | 第40-41页 |
| ·沉默载体构建及沉默烟草 | 第41-42页 |
| ·相对毒力检测 | 第42-43页 |
| ·台盼蓝染色 | 第43页 |
| ·酵母双杂交 | 第43-44页 |
| ·酵母转化子验证 | 第44-45页 |
| ·蛋白的原核表达 | 第45页 |
| ·Pull-Down体外互作验证 | 第45-46页 |
| ·蛋白电泳及Western Blot | 第46-49页 |
| ·双分子荧光互补 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导的基因沉默 | 第50-51页 |
| ·烟草总RNA的提取及定量PCR检测基因的沉默效率 | 第51页 |
| ·同源重组方法构建酵母表达载体 | 第51页 |
| ·Overlap方法构建缺失195-202位氨基酸的PAL删除突变体 | 第51-52页 |
| ·烟草叶片细胞死亡程度的测定 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-73页 |
| ·诱饵蛋白pDEST32：：Avh238酵母表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·诱饵蛋白无自激活活性 | 第53-54页 |
| ·酵母双杂交筛库结果 | 第54-58页 |
| ·一对一互作验证筛库结果 | 第58-61页 |
| ·酵母双杂交验证Avh238~(P7076)与PAL互作 | 第61-62页 |
| ·原核表达蛋白 | 第62-64页 |
| ·GST-Pull Down体外互作验证 | 第64-65页 |
| ·双分子荧光 | 第65-66页 |
| ·沉默PAL致使辣椒疫霉侵染力增强 | 第66-68页 |
| ·Avh238第82-122位氨基酸是互作关键区域 | 第68-69页 |
| ·PAL磷酸化位点为互作的关键区域 | 第69-70页 |
| ·PAL介导的信号通路不影响Avh238触发ETI | 第70页 |
| ·Avh238引起细胞死亡信号通路与MEK2和Ga相关 | 第70-73页 |
| 3 讨论 | 第73-77页 |
| ·RXLR效应分子Avh238在寄主重的毒性靶标PAL | 第73-74页 |
| ·PAL介导的信号通路不影响Avh238触发ETI | 第74-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 附录 | 第81-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
