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芳氧苯氧丙酸类和氯乙酰胺类除草剂降解菌的分离鉴定、降解基因克隆表达及其代谢途径研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
符号与缩略语说明第14-15页
前言第15-16页
第一章 文献综述第16-48页
 1 芳氧苯氧丙酸类除草剂污染及微生物降解研究第16-23页
   ·芳氧苯氧丙酸类除草剂第16页
   ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的除草机理第16-18页
   ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的生态毒性第18-19页
   ·芳氧苯氧丙酸类除草剂在环境中的代谢转化第19-20页
   ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的微生物降解研究第20-23页
 2 氯乙酰胺类除草剂污染及微生物降解研究第23-31页
   ·氯乙酰胺类除草剂第23页
   ·氯乙酰胺类除草剂的除草机理第23-25页
   ·氯乙酰胺类除草剂的生态毒性第25-27页
   ·氯乙酰胺类除草剂在环境中的代谢转化第27-28页
   ·氯乙酰胺类除草剂的微生物降解研究第28-31页
 3 微生物降解除草剂基因及其在转基因作物中的应用第31-36页
   ·抗除草剂转基因作物的发展第32页
   ·微生物来源的抗除草剂基因第32-36页
 4 Rhodococcus、Sphingobium和Delftia属微生物在有机污染物降解中的研究进展第36-39页
   ·Rhodococcus属微生物第36-37页
   ·Sphingobium属微生物第37页
   ·Delftia属微生物第37-39页
 参考文献第39-48页
第二章 精噁唑禾草灵降解菌的分离鉴定、降解特性研究及精噁唑禾草灵水解酶基因feh的克隆表达第48-104页
 第一节 精噁唑禾草灵降解菌的分离鉴定第48-62页
  1 材料与方法第48-52页
   ·培养基与试剂第49页
   ·仪器第49页
   ·精噁唑禾草灵降解菌的富集与分离第49页
   ·精噁唑禾草灵的检测第49-50页
   ·降解菌株的初步鉴定第50页
   ·降解菌株16S rRNA序列分析第50-52页
   ·降解菌株系统发育地位的确定第52页
  2 结果与分析第52-59页
   ·精噁唑禾草灵降解菌的富集与分离第52-53页
   ·菌株T1的初步鉴定第53-55页
   ·菌株T1系统发育地位的确定第55页
   ·环境条件对菌株T1生长的影响第55-59页
   ·菌株T1对抗生素的抗性试验第59页
  3 讨论第59-60页
  本节小结第60页
  参考文献第60-62页
 第二节 菌株T1对精噁唑禾草灵的降解特性研究及其代谢途径分析第62-71页
  1 材料与方法第62-64页
   ·菌株、培养基与试剂第62页
   ·菌株T1种子液的制备第62页
   ·菌株T1对精噁唑禾草灵降解特性研究第62-64页
   ·精噁唑禾草灵及其他芳氧苯氧丙酸类除草剂浓度测定第64页
  2 结果与分析第64-69页
   ·菌株T1以精噁唑禾草灵为唯一碳源的降解曲线及降解产物的鉴定第64-65页
   ·温度对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响第65-66页
   ·pH值对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响第66-67页
   ·精噁唑禾草灵初始浓度对菌株T1降解能力的影响第67页
   ·接种量对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响第67-68页
   ·金属离子对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响第68页
   ·菌株T1对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂的降解第68-69页
  3 讨论第69页
  本节小结第69-70页
  参考文献第70-71页
 第三节 精噁唑禾草灵水解酶基因feh的克隆与表达第71-93页
  1 材料与方法第71-80页
   ·菌株、培养基与试剂第71页
   ·菌株T1粗酶液酯酶酶谱分析及基因组文库筛选标记的确定第71-72页
   ·菌株T1基因组文库的构建第72-73页
   ·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的PCR扩增及TA克隆第73-76页
   ·表达载体pET29a-feh的构建第76-78页
   ·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的表达与纯化第78-80页
  2 结果与分析第80-90页
   ·菌株T1粗酶液酯酶酶谱分析及基因组文库筛选标记的确定第80-81页
   ·菌株T1基因组文库的构建第81-86页
   ·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的PCR扩增及TA克隆第86-87页
   ·表达载体pET29a-feh的构建第87-88页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh的重组表达第88-89页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh的纯化第89-90页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh活力测定第90页
  3 讨论第90-91页
  本节小结第91页
  参考文献第91-93页
 第四节 精噁唑禾草灵水解酶Feh的酶学性质研究第93-104页
  1 材料与方法第93-95页
   ·试剂第93页
   ·温度和pH值对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响第93页
   ·金属离子对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性的影响第93-94页
   ·精噁唑禾草灵水解酶对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂及含酯键农药的酶活性测定第94页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh的底物特异性第94页
   ·有机溶剂、表面活性剂及螯合剂对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响第94-95页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))的测定第95页
  2 结果与分析第95-101页
   ·温度和pH值对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响第95-97页
   ·金属离子对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性的影响第97页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂及含酯键农药的酶活测定第97页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh的底物特异性第97-99页
   ·有机溶剂、螯合剂及表面活性剂对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响第99-100页
   ·精噁唑禾草灵水解酶Feh的米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))第100-101页
  3 讨论第101页
  本节小结第101-102页
  参考文献第102-104页
第三章 乙草胺降解菌的分离鉴定及乙草胺代谢途径分析第104-156页
 第一节 乙草胺降解菌的富集及其细菌多样性分析第105-118页
  1 材料与方法第105-109页
   ·培养基与试剂第105页
   ·乙草胺降解菌的富集第105页
   ·乙草胺的检测方法第105-106页
   ·乙草胺降解富集液的细菌多样性分析第106-109页
  2 结果与分析第109-115页
   ·乙草胺降解富集液的获得第109页
   ·富集液对乙草胺的降解曲线第109-110页
   ·富集液的降解谱试验第110-111页
   ·乙草胺降解富集液中细菌多样性分析第111-115页
  3 讨论第115-116页
  本节小结第116页
  参考文献第116-118页
 第二节 乙草胺降解菌的分离鉴定及乙草胺代谢途径分析第118-132页
  1 材料与方法第118-119页
   ·培养基与试剂第118页
   ·乙草胺降解菌的分离第118页
   ·乙草胺及其代谢产物的检测与鉴定第118页
   ·降解菌株的初步鉴定第118页
   ·降解菌株16S rRNA序列分析及系统发育地位的确定第118-119页
   ·环境条件对降解菌株生长的影响第119页
   ·乙草胺及其降解产物生物活性测定试验第119页
  2 结果与分析第119-130页
   ·乙草胺降解菌的分离及代谢途径分析第119-121页
   ·乙草胺代谢中间产物CMEPA降解菌株的分离及代谢途径分析第121-123页
   ·乙草胺代谢中间产物MEA降解菌的分离第123-124页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1复合菌液对乙草胺的降解第124页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1的初步鉴定第124-126页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1的分类学地位第126-127页
   ·第127-129页
   ·乙草胺及其降解产物生物学活性测定试验第129-130页
  3 讨论第130-131页
  本节小结第131页
  参考文献第131-132页
 第三节 乙草胺降解菌的降解特性及复合菌液对乙草胺的降解研究第132-156页
  1 材料与方法第132-137页
   ·菌株与培养基第132页
   ·菌体生长量的测定第132页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺及其代谢中间产物降解特性研究第132-137页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺的联合降解第137页
  2 结果与分析第137-152页
   ·乙草胺、CMEPA和MEA标准曲线绘制第137-139页
   ·菌株T3-1对乙草胺的降解特性研究第139-143页
   ·菌株T3-6对CMEPA的降解特性研究第143-147页
   ·菌株MEA3-1对MEA的降解特性研究第147-151页
   ·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺的联合降解第151-152页
  3 讨论第152-153页
  本节小结第153页
  参考文献第153-156页
全文总结第156-158页
主要创新点第158-160页
下一步工作设想第160-162页
附录第162-174页
攻读博士学位期间发表的论文目录第174-176页
致谢第176页

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