摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
符号与缩略语说明 | 第14-15页 |
前言 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-48页 |
1 芳氧苯氧丙酸类除草剂污染及微生物降解研究 | 第16-23页 |
·芳氧苯氧丙酸类除草剂 | 第16页 |
·芳氧苯氧丙酸类除草剂的除草机理 | 第16-18页 |
·芳氧苯氧丙酸类除草剂的生态毒性 | 第18-19页 |
·芳氧苯氧丙酸类除草剂在环境中的代谢转化 | 第19-20页 |
·芳氧苯氧丙酸类除草剂的微生物降解研究 | 第20-23页 |
2 氯乙酰胺类除草剂污染及微生物降解研究 | 第23-31页 |
·氯乙酰胺类除草剂 | 第23页 |
·氯乙酰胺类除草剂的除草机理 | 第23-25页 |
·氯乙酰胺类除草剂的生态毒性 | 第25-27页 |
·氯乙酰胺类除草剂在环境中的代谢转化 | 第27-28页 |
·氯乙酰胺类除草剂的微生物降解研究 | 第28-31页 |
3 微生物降解除草剂基因及其在转基因作物中的应用 | 第31-36页 |
·抗除草剂转基因作物的发展 | 第32页 |
·微生物来源的抗除草剂基因 | 第32-36页 |
4 Rhodococcus、Sphingobium和Delftia属微生物在有机污染物降解中的研究进展 | 第36-39页 |
·Rhodococcus属微生物 | 第36-37页 |
·Sphingobium属微生物 | 第37页 |
·Delftia属微生物 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-48页 |
第二章 精噁唑禾草灵降解菌的分离鉴定、降解特性研究及精噁唑禾草灵水解酶基因feh的克隆表达 | 第48-104页 |
第一节 精噁唑禾草灵降解菌的分离鉴定 | 第48-62页 |
1 材料与方法 | 第48-52页 |
·培养基与试剂 | 第49页 |
·仪器 | 第49页 |
·精噁唑禾草灵降解菌的富集与分离 | 第49页 |
·精噁唑禾草灵的检测 | 第49-50页 |
·降解菌株的初步鉴定 | 第50页 |
·降解菌株16S rRNA序列分析 | 第50-52页 |
·降解菌株系统发育地位的确定 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-59页 |
·精噁唑禾草灵降解菌的富集与分离 | 第52-53页 |
·菌株T1的初步鉴定 | 第53-55页 |
·菌株T1系统发育地位的确定 | 第55页 |
·环境条件对菌株T1生长的影响 | 第55-59页 |
·菌株T1对抗生素的抗性试验 | 第59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
本节小结 | 第60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第二节 菌株T1对精噁唑禾草灵的降解特性研究及其代谢途径分析 | 第62-71页 |
1 材料与方法 | 第62-64页 |
·菌株、培养基与试剂 | 第62页 |
·菌株T1种子液的制备 | 第62页 |
·菌株T1对精噁唑禾草灵降解特性研究 | 第62-64页 |
·精噁唑禾草灵及其他芳氧苯氧丙酸类除草剂浓度测定 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-69页 |
·菌株T1以精噁唑禾草灵为唯一碳源的降解曲线及降解产物的鉴定 | 第64-65页 |
·温度对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响 | 第65-66页 |
·pH值对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响 | 第66-67页 |
·精噁唑禾草灵初始浓度对菌株T1降解能力的影响 | 第67页 |
·接种量对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响 | 第67-68页 |
·金属离子对菌株T1降解精噁唑禾草灵的影响 | 第68页 |
·菌株T1对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂的降解 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69页 |
本节小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-71页 |
第三节 精噁唑禾草灵水解酶基因feh的克隆与表达 | 第71-93页 |
1 材料与方法 | 第71-80页 |
·菌株、培养基与试剂 | 第71页 |
·菌株T1粗酶液酯酶酶谱分析及基因组文库筛选标记的确定 | 第71-72页 |
·菌株T1基因组文库的构建 | 第72-73页 |
·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的PCR扩增及TA克隆 | 第73-76页 |
·表达载体pET29a-feh的构建 | 第76-78页 |
·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的表达与纯化 | 第78-80页 |
2 结果与分析 | 第80-90页 |
·菌株T1粗酶液酯酶酶谱分析及基因组文库筛选标记的确定 | 第80-81页 |
·菌株T1基因组文库的构建 | 第81-86页 |
·精噁唑禾草灵水解酶基因feh的PCR扩增及TA克隆 | 第86-87页 |
·表达载体pET29a-feh的构建 | 第87-88页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh的重组表达 | 第88-89页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh的纯化 | 第89-90页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh活力测定 | 第90页 |
3 讨论 | 第90-91页 |
本节小结 | 第91页 |
参考文献 | 第91-93页 |
第四节 精噁唑禾草灵水解酶Feh的酶学性质研究 | 第93-104页 |
1 材料与方法 | 第93-95页 |
·试剂 | 第93页 |
·温度和pH值对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响 | 第93页 |
·金属离子对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性的影响 | 第93-94页 |
·精噁唑禾草灵水解酶对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂及含酯键农药的酶活性测定 | 第94页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh的底物特异性 | 第94页 |
·有机溶剂、表面活性剂及螯合剂对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响 | 第94-95页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))的测定 | 第95页 |
2 结果与分析 | 第95-101页 |
·温度和pH值对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响 | 第95-97页 |
·金属离子对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性的影响 | 第97页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh对其他芳氧苯氧丙酸类除草剂及含酯键农药的酶活测定 | 第97页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh的底物特异性 | 第97-99页 |
·有机溶剂、螯合剂及表面活性剂对精噁唑禾草灵水解酶Feh活性和稳定性的影响 | 第99-100页 |
·精噁唑禾草灵水解酶Feh的米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max)) | 第100-101页 |
3 讨论 | 第101页 |
本节小结 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-104页 |
第三章 乙草胺降解菌的分离鉴定及乙草胺代谢途径分析 | 第104-156页 |
第一节 乙草胺降解菌的富集及其细菌多样性分析 | 第105-118页 |
1 材料与方法 | 第105-109页 |
·培养基与试剂 | 第105页 |
·乙草胺降解菌的富集 | 第105页 |
·乙草胺的检测方法 | 第105-106页 |
·乙草胺降解富集液的细菌多样性分析 | 第106-109页 |
2 结果与分析 | 第109-115页 |
·乙草胺降解富集液的获得 | 第109页 |
·富集液对乙草胺的降解曲线 | 第109-110页 |
·富集液的降解谱试验 | 第110-111页 |
·乙草胺降解富集液中细菌多样性分析 | 第111-115页 |
3 讨论 | 第115-116页 |
本节小结 | 第116页 |
参考文献 | 第116-118页 |
第二节 乙草胺降解菌的分离鉴定及乙草胺代谢途径分析 | 第118-132页 |
1 材料与方法 | 第118-119页 |
·培养基与试剂 | 第118页 |
·乙草胺降解菌的分离 | 第118页 |
·乙草胺及其代谢产物的检测与鉴定 | 第118页 |
·降解菌株的初步鉴定 | 第118页 |
·降解菌株16S rRNA序列分析及系统发育地位的确定 | 第118-119页 |
·环境条件对降解菌株生长的影响 | 第119页 |
·乙草胺及其降解产物生物活性测定试验 | 第119页 |
2 结果与分析 | 第119-130页 |
·乙草胺降解菌的分离及代谢途径分析 | 第119-121页 |
·乙草胺代谢中间产物CMEPA降解菌株的分离及代谢途径分析 | 第121-123页 |
·乙草胺代谢中间产物MEA降解菌的分离 | 第123-124页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1复合菌液对乙草胺的降解 | 第124页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1的初步鉴定 | 第124-126页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1的分类学地位 | 第126-127页 |
· | 第127-129页 |
·乙草胺及其降解产物生物学活性测定试验 | 第129-130页 |
3 讨论 | 第130-131页 |
本节小结 | 第131页 |
参考文献 | 第131-132页 |
第三节 乙草胺降解菌的降解特性及复合菌液对乙草胺的降解研究 | 第132-156页 |
1 材料与方法 | 第132-137页 |
·菌株与培养基 | 第132页 |
·菌体生长量的测定 | 第132页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺及其代谢中间产物降解特性研究 | 第132-137页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺的联合降解 | 第137页 |
2 结果与分析 | 第137-152页 |
·乙草胺、CMEPA和MEA标准曲线绘制 | 第137-139页 |
·菌株T3-1对乙草胺的降解特性研究 | 第139-143页 |
·菌株T3-6对CMEPA的降解特性研究 | 第143-147页 |
·菌株MEA3-1对MEA的降解特性研究 | 第147-151页 |
·菌株T3-1、T3-6和MEA3-1对乙草胺的联合降解 | 第151-152页 |
3 讨论 | 第152-153页 |
本节小结 | 第153页 |
参考文献 | 第153-156页 |
全文总结 | 第156-158页 |
主要创新点 | 第158-160页 |
下一步工作设想 | 第160-162页 |
附录 | 第162-174页 |
攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第174-176页 |
致谢 | 第176页 |