| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| ·瑞氏木霉概述 | 第13-14页 |
| ·丝状真菌转化系统 | 第14-16页 |
| ·丝状真菌转化方法 | 第14-15页 |
| ·丝状真菌遗传转化系统的选择标记 | 第15页 |
| ·丝状真菌遗传转化载体 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导转化(AMT)丝状真菌研究进展 | 第16-18页 |
| ·农杆菌介导的转化技术概述 | 第17页 |
| ·农杆菌介导转化的双元载体 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导真菌转化的优点 | 第18页 |
| ·基因打靶技术及在丝状真菌基因功能研究中的应用 | 第18-20页 |
| ·基因打靶技术 | 第18-19页 |
| ·丝状真菌高效基因打靶技术研究现状与进展 | 第19-20页 |
| ·丝状真菌蛋白分泌调控机制 | 第20-23页 |
| ·蛋白分泌一般途径 | 第20-21页 |
| ·液泡蛋白分选受体VPS10基因功能研究 | 第21-23页 |
| ·瑞氏木霉的纤维素酶系 | 第23-24页 |
| ·本文主要研究内容 | 第24-27页 |
| 第二章 瑞氏木霉T-DNA插入筛选纤维素降解突变株 | 第27-45页 |
| ·材料和方法 | 第27-35页 |
| ·质粒和菌株 | 第27-28页 |
| ·培养基和培养条件 | 第28页 |
| ·菌种保藏技术 | 第28-29页 |
| ·主要分子实验试剂 | 第29页 |
| ·重组DNA技术 | 第29页 |
| ·引物设计及PCR扩增条件 | 第29页 |
| ·双元载体pCTA的构建 | 第29-31页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第31页 |
| ·农杆菌介导的瑞氏木霉转化 | 第31-32页 |
| ·瑞氏木霉染色体提取 | 第32-34页 |
| ·纤维素平板初步筛选纤维素降解能力突变株 | 第34页 |
| ·纤维素降解突变株酶活力测定 | 第34-35页 |
| ·实验结果和讨论 | 第35-42页 |
| ·双元载体pCTA的构建结果 | 第35-37页 |
| ·双元载体pCTA转化农杆菌EIIA105 | 第37页 |
| ·农杆菌介导的瑞氏木霉转化 | 第37-39页 |
| ·瑞氏木霉AMT转化子的分子验证 | 第39-40页 |
| ·纤维素平板初步筛选纤维素降解突变株 | 第40-41页 |
| ·纤维素降解突变株纤维素酶活力测定 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-45页 |
| 第三章 液泡蛋白分选受体VPS10基因功能研究 | 第45-61页 |
| ·材料与方法 | 第46-51页 |
| ·菌株及质粒 | 第46页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第46页 |
| ·本章所用引物 | 第46-47页 |
| ·瑞氏木霉vps10基因鉴定 | 第47页 |
| ·vps10基因敲除载体的构建过程 | 第47-48页 |
| ·瑞氏木霉的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·瑞氏木霉转化子的筛选 | 第49页 |
| ·瑞氏木霉转化子染色体DNA的提取 | 第49页 |
| ·瑞氏木霉转化子的分子验证 | 第49-50页 |
| ·瑞氏木霉生长量的测定 | 第50-51页 |
| ·瑞氏木霉转化子的纤维素酶活力及胞外总蛋白含量测定 | 第51页 |
| ·实验结果与讨论 | 第51-59页 |
| ·vps10基因敲除载体构建结果 | 第51-52页 |
| ·瑞氏木霉的转化和vps10基因敲除转化子的筛选 | 第52-56页 |
| ·T.reesei转化菌株QM-△VPS10性质测定 | 第56-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第四章 瑞氏木霉纤维素酶系改造之木聚糖酶Ⅰ的敲除研究 | 第61-70页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·菌株及质粒 | 第61页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第61页 |
| ·本章所用引物 | 第61页 |
| ·瑞氏木霉xyn1基因鉴定 | 第61-62页 |
| ·瑞氏木霉xyn1基因敲除载体构建 | 第62页 |
| ·瑞氏木霉的遗传转化及转化子筛选 | 第62页 |
| ·瑞氏木霉转化了分了验证 | 第62-63页 |
| ·瑞氏木霉转化子的纤维素酶活力测定及胞外总蛋白含量测定 | 第63-64页 |
| ·实验结果与讨论 | 第64-69页 |
| ·xyn1基因敲除载体构建结果 | 第64页 |
| ·瑞氏木霉的转化和xyn1基因敲除转化子的筛选 | 第64-67页 |
| ·AXYN1菌株酶活力及胞外蛋白量测定 | 第67-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 全文总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间已(待)发表的学术论文目录 | 第77-78页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第78页 |
