前言 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
英文缩写词表 | 第14-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-32页 |
·引言 | 第16-17页 |
·Coronin 的发现和其主要结构 | 第17-19页 |
·Coronin 1C 的发现 | 第17页 |
·Coronin 1C的结构 | 第17-19页 |
·WD40 重复结构域 | 第17-18页 |
·末端延伸结构 | 第18页 |
·Coiled-coil 结构域 | 第18页 |
·Unique region | 第18-19页 |
·哺乳类 Coronin 家族的分类和成员 | 第19-20页 |
·Coronins 的功能机制 | 第20-24页 |
·结合 F‐肌动蛋白 | 第20页 |
·与 Arp2/3 相互作用 | 第20-22页 |
·Coronins 自身的寡聚化 | 第22页 |
·与肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白(ADF/Cofilin)途径相互作用 | 第22-23页 |
·自身磷酸化修饰 | 第23-24页 |
·哺乳动物 Coronin 蛋白家族成员及它们的生物学功能 | 第24-28页 |
·I 型 Coronin 蛋白 | 第25-27页 |
·Coronin 1A | 第25-26页 |
·Coronin 1B | 第26页 |
·Coronin 1C | 第26-27页 |
·Coronin 6 | 第27页 |
·II 型 Coronin 蛋白 | 第27-28页 |
·Coronin 2A | 第27-28页 |
·Coronin 2B | 第28页 |
·III 型 Coronin 蛋白 | 第28页 |
·Coronin 1C 的生物学功能和其在肿瘤中的研究进展 | 第28-30页 |
·Coronin 1C 的生物学功能 | 第28-29页 |
·在肿瘤中的研究进展 | 第29-30页 |
·Coronin 1C 与弥漫性胶质细胞瘤 | 第29页 |
·Coronin 1C 与肝癌 | 第29-30页 |
·Coronin 1C 与胃癌 | 第30页 |
·结语 | 第30-32页 |
第2章 Coronin-1C 在 HCC 组织中的表达 | 第32-47页 |
·材料与方法 | 第32-42页 |
·实验对象 | 第32页 |
·主要试剂及仪器 | 第32-36页 |
·主要仪器设备 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要配制试剂 | 第34-36页 |
·实验方法 | 第36-42页 |
·qRT-PCR 检测 Coronin-1C mRNA 在 HCC 组织中表达 | 第36-38页 |
·Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达 | 第38-42页 |
·免疫组化法检测 Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达 | 第38-40页 |
·Western blotting 检测 Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达 | 第40-42页 |
·统计学处理 | 第42页 |
·结果 | 第42-45页 |
·Coronin-1C mRNA 在 HCC 组织中的表达增加 | 第42-43页 |
·Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中的表达量增加 | 第43-45页 |
·免疫组化检测 Coronin-1C 蛋白在组织中表达 | 第43-44页 |
·western blot 检测 Coronin-1C 蛋白在组织中表达 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第3章 Coronin 1C 表达与肿瘤恶性程度的相关性研究 | 第47-63页 |
·材料与方法 | 第47-57页 |
·细胞株 | 第47页 |
·主要试剂及仪器 | 第47-51页 |
·主要仪器设备 | 第47-48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要配制试剂 | 第48-51页 |
·实验方法 | 第51-57页 |
·细胞系 BEL-7402 的培养 | 第51页 |
·Coronin -1C 表达质粒的构建 | 第51页 |
·Coronin -1C 基因敲除 BEL-7402 稳转细胞株的构建 | 第51-55页 |
·细胞的瞬时转染 | 第55页 |
·Westernblot 检测细胞中 Coronin 1C 蛋白的表达 | 第55-56页 |
·细胞创伤愈合实验 | 第56页 |
·细胞增殖能力分析 | 第56页 |
·Western blotting 检测细胞中 Coronin-1C 蛋白的表达 | 第56-57页 |
·统计学处理 | 第57页 |
·结果 | 第57-61页 |
·Coronin -1C 表达质粒转染 BEL-7402 细胞后 Coronin 1C 的表达增加 | 第57页 |
·Coronin -1C 表达抑制的 BEL-7402 细胞稳定组株的鉴定 | 第57-58页 |
·Coronin-1C 过表达以及 Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞增殖迁移的影响 | 第58-59页 |
·Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞增殖能力的影响 | 第59-60页 |
·Coronin-1C 过表达以及 Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞侵袭能力的影响 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第4章 Coronin 1C 抑制减少细胞的极性化并导致细胞骨架解聚 | 第63-69页 |
·材料与方法 | 第63-66页 |
·细胞株 | 第63页 |
·主要试剂及仪器 | 第63-65页 |
·主要仪器设备 | 第63页 |
·主要试剂及仪器 | 第63-64页 |
·主要配制试剂 | 第64-65页 |
·实验方法 | 第65-66页 |
·高尔基器和 a-肌动蛋白的共染色 | 第65页 |
·FITC-标记的鬼笔环肽染色 | 第65-66页 |
·结果 | 第66-68页 |
·Coronin 1C 抑制减少细胞的极化并导致细胞骨架瓦解 | 第66-67页 |
·肌动蛋白与高尔基器共定位染色研究 Coronin 1C 对细胞极化和细胞骨架的影响 | 第66-67页 |
·FITC-鬼笔环肽染色法研究 Coronin 1C 对细胞骨架的影响 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
第5章 Coronin 1C 敲除引起 Rac1 激活抑制 | 第69-74页 |
·材料与方法 | 第69-72页 |
·细胞株 | 第69页 |
·主要试剂及 | 第69-70页 |
·主要仪器设备 | 第69页 |
·主要试剂 | 第69-70页 |
·主要配制试剂 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-72页 |
·Rac1 GST-PAK pull-down 实验 | 第70-72页 |
·结果 | 第72-73页 |
·Coronin 1C 抑制引起 HCC 细胞中 Rac 活性降低 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-74页 |
第6章 Coronin 1C敲除引起HCC细胞体内致瘤能力下降 | 第74-78页 |
·材料与方法 | 第74-75页 |
·细胞株和实验动物 | 第74页 |
·细胞株 | 第74页 |
·实验动物 | 第74页 |
·主要仪器设备 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-75页 |
·结果 | 第75-77页 |
·敲除 Coronin 1C 后 HCC 细胞小鼠体内致瘤能力下降 | 第75-77页 |
·敲除 Coronin 1C 后 HCC 细胞小鼠体内成瘤的速度下降 | 第75页 |
·敲除 Coronin 1C 后的 HCC 细胞在小鼠体内生成的肿瘤体积较小 | 第75-77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
第7章 结论 | 第78-79页 |
创新点自评 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-90页 |
作者简介 | 第90页 |
发表论文 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |