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原发性肝癌细胞Coronin-1C基因后干扰Rac1基因激活及损伤肿瘤形成潜能的研究

前言第1-6页
中文摘要第6-7页
ABSTRACT第7-14页
英文缩写词表第14-16页
第1章 文献综述第16-32页
   ·引言第16-17页
   ·Coronin 的发现和其主要结构第17-19页
     ·Coronin 1C 的发现第17页
     ·Coronin 1C的结构第17-19页
       ·WD40 重复结构域第17-18页
       ·末端延伸结构第18页
       ·Coiled-coil 结构域第18页
       ·Unique region第18-19页
   ·哺乳类 Coronin 家族的分类和成员第19-20页
   ·Coronins 的功能机制第20-24页
     ·结合 F‐肌动蛋白第20页
     ·与 Arp2/3 相互作用第20-22页
     ·Coronins 自身的寡聚化第22页
     ·与肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白(ADF/Cofilin)途径相互作用第22-23页
     ·自身磷酸化修饰第23-24页
   ·哺乳动物 Coronin 蛋白家族成员及它们的生物学功能第24-28页
     ·I 型 Coronin 蛋白第25-27页
       ·Coronin 1A第25-26页
       ·Coronin 1B第26页
       ·Coronin 1C第26-27页
       ·Coronin 6第27页
     ·II 型 Coronin 蛋白第27-28页
       ·Coronin 2A第27-28页
       ·Coronin 2B第28页
     ·III 型 Coronin 蛋白第28页
   ·Coronin 1C 的生物学功能和其在肿瘤中的研究进展第28-30页
     ·Coronin 1C 的生物学功能第28-29页
     ·在肿瘤中的研究进展第29-30页
       ·Coronin 1C 与弥漫性胶质细胞瘤第29页
       ·Coronin 1C 与肝癌第29-30页
       ·Coronin 1C 与胃癌第30页
   ·结语第30-32页
第2章 Coronin-1C 在 HCC 组织中的表达第32-47页
   ·材料与方法第32-42页
     ·实验对象第32页
     ·主要试剂及仪器第32-36页
       ·主要仪器设备第32-33页
       ·主要试剂第33-34页
       ·主要配制试剂第34-36页
     ·实验方法第36-42页
       ·qRT-PCR 检测 Coronin-1C mRNA 在 HCC 组织中表达第36-38页
       ·Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达第38-42页
         ·免疫组化法检测 Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达第38-40页
         ·Western blotting 检测 Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中表达第40-42页
       ·统计学处理第42页
   ·结果第42-45页
     ·Coronin-1C mRNA 在 HCC 组织中的表达增加第42-43页
     ·Coronin-1C 蛋白在 HCC 组织中的表达量增加第43-45页
       ·免疫组化检测 Coronin-1C 蛋白在组织中表达第43-44页
       ·western blot 检测 Coronin-1C 蛋白在组织中表达第44-45页
   ·讨论第45-47页
第3章 Coronin 1C 表达与肿瘤恶性程度的相关性研究第47-63页
   ·材料与方法第47-57页
     ·细胞株第47页
     ·主要试剂及仪器第47-51页
       ·主要仪器设备第47-48页
       ·主要试剂第48页
       ·主要配制试剂第48-51页
     ·实验方法第51-57页
       ·细胞系 BEL-7402 的培养第51页
       ·Coronin -1C 表达质粒的构建第51页
       ·Coronin -1C 基因敲除 BEL-7402 稳转细胞株的构建第51-55页
       ·细胞的瞬时转染第55页
       ·Westernblot 检测细胞中 Coronin 1C 蛋白的表达第55-56页
       ·细胞创伤愈合实验第56页
       ·细胞增殖能力分析第56页
       ·Western blotting 检测细胞中 Coronin-1C 蛋白的表达第56-57页
       ·统计学处理第57页
   ·结果第57-61页
     ·Coronin -1C 表达质粒转染 BEL-7402 细胞后 Coronin 1C 的表达增加第57页
     ·Coronin -1C 表达抑制的 BEL-7402 细胞稳定组株的鉴定第57-58页
     ·Coronin-1C 过表达以及 Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞增殖迁移的影响第58-59页
     ·Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞增殖能力的影响第59-60页
     ·Coronin-1C 过表达以及 Coronin-1C 抑制对 HCC 细胞侵袭能力的影响第60-61页
   ·讨论第61-63页
第4章 Coronin 1C 抑制减少细胞的极性化并导致细胞骨架解聚第63-69页
   ·材料与方法第63-66页
     ·细胞株第63页
     ·主要试剂及仪器第63-65页
       ·主要仪器设备第63页
       ·主要试剂及仪器第63-64页
       ·主要配制试剂第64-65页
     ·实验方法第65-66页
       ·高尔基器和 a-肌动蛋白的共染色第65页
       ·FITC-标记的鬼笔环肽染色第65-66页
   ·结果第66-68页
     ·Coronin 1C 抑制减少细胞的极化并导致细胞骨架瓦解第66-67页
       ·肌动蛋白与高尔基器共定位染色研究 Coronin 1C 对细胞极化和细胞骨架的影响第66-67页
     ·FITC-鬼笔环肽染色法研究 Coronin 1C 对细胞骨架的影响第67-68页
   ·讨论第68-69页
第5章 Coronin 1C 敲除引起 Rac1 激活抑制第69-74页
   ·材料与方法第69-72页
     ·细胞株第69页
     ·主要试剂及第69-70页
       ·主要仪器设备第69页
       ·主要试剂第69-70页
       ·主要配制试剂第70页
     ·实验方法第70-72页
       ·Rac1 GST-PAK pull-down 实验第70-72页
   ·结果第72-73页
     ·Coronin 1C 抑制引起 HCC 细胞中 Rac 活性降低第72-73页
   ·讨论第73-74页
第6章 Coronin 1C敲除引起HCC细胞体内致瘤能力下降第74-78页
   ·材料与方法第74-75页
     ·细胞株和实验动物第74页
       ·细胞株第74页
       ·实验动物第74页
     ·主要仪器设备第74页
     ·实验方法第74-75页
   ·结果第75-77页
     ·敲除 Coronin 1C 后 HCC 细胞小鼠体内致瘤能力下降第75-77页
       ·敲除 Coronin 1C 后 HCC 细胞小鼠体内成瘤的速度下降第75页
       ·敲除 Coronin 1C 后的 HCC 细胞在小鼠体内生成的肿瘤体积较小第75-77页
   ·讨论第77-78页
第7章 结论第78-79页
创新点自评第79-81页
参考文献第81-90页
作者简介第90页
发表论文第90-91页
致谢第91页

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