| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-44页 |
| ·鸭甲肝病毒的研究概述 | 第11-26页 |
| ·DHAV-1病原学研究 | 第11-16页 |
| ·流行病学研究 | 第16-18页 |
| ·DHAV分子生物学的研究 | 第18-21页 |
| ·临床症状和病理剖检 | 第21页 |
| ·DHAV的诊断方法 | 第21-25页 |
| ·DHAV的预防与治疗 | 第25-26页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统 | 第26-37页 |
| ·杆状病毒基因组的结构及功能的研究 | 第26-28页 |
| ·杆状病毒表达系统的特点 | 第28-29页 |
| ·杆状病毒载体的重组与筛选 | 第29-31页 |
| ·影响外源基因表达的因素 | 第31-32页 |
| ·杆状病毒载体及其表达系统进展 | 第32-34页 |
| ·昆虫细胞系及培养基 | 第34-35页 |
| ·杆状病毒表达的最新应用及展望 | 第35-37页 |
| ·原核表达系统 | 第37页 |
| ·抗原表位的研究 | 第37-43页 |
| ·T细胞表位的研究方法 | 第38-40页 |
| ·B细胞表位的研究方法 | 第40-42页 |
| ·抗原表位的应用及展望 | 第42-43页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第43-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-67页 |
| ·材料 | 第44-47页 |
| ·菌(毒)株 | 第44页 |
| ·实验动物和细胞株 | 第44页 |
| ·酶和相关试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·实验所用的溶液及其配制 | 第45-47页 |
| ·方法 | 第47-67页 |
| ·试验一 单克隆抗体的制备 | 第47-49页 |
| ·试验二 杆状病毒表达系统对单克隆抗体的抗原表位进行初步分析 | 第49-58页 |
| ·试验三 用原核表达系统采用设计引物交叉重叠法分段表达VP1蛋白确定出抗原表位 | 第58-65页 |
| ·试验四 杆状病毒表达系统IFA分析验证抗原表位 | 第65-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-79页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第67页 |
| ·细胞株分泌抗体稳定性检测 | 第67页 |
| ·腹水效价的测定 | 第67页 |
| ·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达BVP1蛋白同5株单抗的抗原表位初步分析结果 | 第67-70页 |
| ·pFastBac~(TM) HTB-VP1重组质粒的双酶切鉴定 | 第67-68页 |
| ·重组转移载体的克隆测序 | 第68页 |
| ·重组杆粒的鉴定 | 第68页 |
| ·重组病毒感染sf9细胞后的细胞病变 | 第68-69页 |
| ·重组蛋白在sf9中的表达及IFA分析 | 第69-70页 |
| ·Weatern blot分析结果 | 第70页 |
| ·第一次VP1蛋白分7段交叉表达 | 第70-74页 |
| ·PCR扩增结果 | 第70-71页 |
| ·DHAV-VP1分7段基因重组质粒双酶切鉴定 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE凝胶分析 | 第72-73页 |
| ·Western blot分析结果 | 第73-74页 |
| ·第二次VP1蛋白分6段交叉重叠表达 | 第74-78页 |
| ·PCR扩增图 | 第74-75页 |
| ·DHAV-1VP1分6段基因重组质粒双酶切鉴定 | 第75-76页 |
| ·重组质粒的克隆测序 | 第76页 |
| ·重组蛋白诱导表达SDS-PAGE鉴定 | 第76-77页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第77页 |
| ·单克隆抗体4F8抗原表位的Wertern blot鉴定 | 第77-78页 |
| ·单克隆抗体4F8识别抗原表位的IFA验证 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-83页 |
| ·DHAV-1抗原表位的研究现状 | 第79-80页 |
| ·DHAV-1蛋白的真核表达及5株单抗识别抗原的初步定位 | 第80-81页 |
| ·单抗4F8识别抗原表位的精确定位 | 第81-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 6 参考文献 | 第84-95页 |
| 7 致谢 | 第95-96页 |
| 8 攻读硕士期间发表论文情况 | 第96页 |
