摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
一、文献综述 | 第12-28页 |
1 植物中多倍化的研究 | 第12-15页 |
·多倍化的背景介绍 | 第12-13页 |
·同源多倍体的研究进展 | 第13页 |
·多倍化的基因表达调控机制 | 第13页 |
·倍性效应与表达的关系 | 第13-14页 |
·多倍化在不同植物中的研究 | 第14-15页 |
·拟南芥中多倍化的研究 | 第14页 |
·水稻多倍体的研究 | 第14-15页 |
2 DNA甲基化与基因表达之间的关系 | 第15-18页 |
·DNA甲基化的背景介绍 | 第15-16页 |
·DNA甲基化的功能 | 第16页 |
·DNA甲基化和转录抑制 | 第16-18页 |
·DNA甲基化在进化中的作用 | 第18页 |
3 实验室已做的一些相关研究 | 第18-20页 |
·SNF2基因家族 | 第19页 |
·乙烯合成相关位点的基因家族 | 第19-20页 |
·DNA重组修复相关位点的基因家族 | 第20页 |
5 基因表达的研究方法 | 第20-24页 |
·基因芯片 | 第20-21页 |
·Nothern blot | 第21页 |
·基因表达连续分析(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第21-22页 |
·荧光定量PCR | 第22-24页 |
·荧光定量PCR的技术方法 | 第22-23页 |
·定量方法 | 第23页 |
·实时荧光定量PCR的应用 | 第23-24页 |
·实时定量PCR的特点 | 第24页 |
6 研究DNA甲基化的技术 | 第24-26页 |
·甲基化敏感性限制性内切酶-PCR/Southern法 | 第24页 |
·Mehtylight(荧光法) | 第24-25页 |
·亚硫酸盐测序法 | 第25-26页 |
7 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
二、材料和方法 | 第28-42页 |
1 实验材料 | 第28-29页 |
·水稻品种 | 第28页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·试剂 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-42页 |
·根尖染色体压片 | 第29-30页 |
·SSR鉴定双胚苗倍性材料的同源性 | 第30-33页 |
·叶片总DNA的提取 | 第30页 |
·SSR分子标记分析 | 第30-33页 |
·总RNA的提取及定量PCR | 第33-36页 |
·叶片、茎、根和穗的总RNA的提取及纯化步骤 | 第33-34页 |
·RNA反转录成cDNA | 第34-35页 |
·Q-PCR | 第35-36页 |
·亚硫酸盐测序(BSP) | 第36-42页 |
·提取叶枕距为零时期的叶片DNA | 第36页 |
·DNA的核酸共沉淀 | 第36页 |
·DNA的纯化 | 第36-37页 |
·亚硫酸盐测序法的原理 | 第37页 |
·亚硫酸盐DNA转化 | 第37-39页 |
·引物设计 | 第39-40页 |
·经亚硫酸盐处理后的DNA的克隆 | 第40-41页 |
·测序 | 第41-42页 |
三、结果与分析 | 第42-62页 |
·双胚苗N、2N和3N同源材料的外部形态 | 第42页 |
·双胚苗材料的倍性鉴定 | 第42-43页 |
·双胚苗材料的基因组同源性分析 | 第43页 |
·实验样本RNA和DNA的提取 | 第43-44页 |
·定量-PCR反应条件优化 | 第44-46页 |
·目标基因定量PCR检测结果 | 第46-60页 |
·不同发育时期叶片中基因的表达结果 | 第47-51页 |
·幼苗期叶片中的定量PCR结果 | 第47-48页 |
·叶枕距为零时期叶片中定量PCR结果 | 第48页 |
·孕穗期叶片中定量PCR结果 | 第48-49页 |
·抽穗期叶片中定量PCR结果 | 第49-50页 |
·不同基因在叶片发育中的表达与倍性调控分析 | 第50-51页 |
·不同发育时期茎部的基因表达 | 第51-55页 |
·幼苗期茎部定量PCR结果 | 第51-52页 |
·孕穗期茎中的定量PCR结果 | 第52-53页 |
·基因在抽穗期茎部的表达 | 第53-54页 |
·不同基因在茎发育中的表达与倍性调控分析 | 第54-55页 |
·不同发育时期穗部的表达结果 | 第55-58页 |
·孕穗期穗部的定量PCR结果 | 第55-56页 |
·基因在抽穗期穗部的表达 | 第56-57页 |
·不同基因在穗发育中的表达与倍性调控分析 | 第57-58页 |
·幼苗期根中定量PCR结果 | 第58-59页 |
·倍性调控下基因表达的器官特异性 | 第59-60页 |
·基因LOC_Os07g31450.1的甲基化实验结果 | 第60-62页 |
四、结论和讨论 | 第62-66页 |
·基因定量PCR表达的小结 | 第62页 |
·芯片结果与定量PCR结果的差异 | 第62-63页 |
·基因表达与基因剂量、发育时期和不同器官的调控关系 | 第63-64页 |
·基因表达中DNA甲基化的调控作用 | 第64-65页 |
·下一步的研究计划 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
附录 | 第75-79页 |
致谢 | 第79页 |