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猪精子介导基因转移技术优化研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 文献综述第8-20页
 1 转基因动物的研究进展第8页
 2 转基因的主要技术第8-17页
   ·显微原核注射法第8-9页
   ·逆转录病毒感染法第9页
   ·胚胎干细胞介导法第9-10页
   ·人工酵母染色体(YAC)法第10页
   ·体细胞核移植转基因法第10-11页
   ·精子载体法第11-17页
     ·精子为载体的基因转移方法第12-13页
     ·外源DNA捕获精子的分子机制研究第13-15页
     ·精子结合外源DNA的核内化过程第15页
     ·影响精子与外源DNA结合的因素第15-16页
     ·外源DNA在宿主动物中的存在形式第16-17页
 3 转基因猪的研究概况第17-18页
 4 存在问题及展望第18-20页
第二章 试验研究第20-49页
 前言第20页
 1 材料和方法第20-25页
   ·试验材料、试剂、仪器第20-21页
     ·试验材料第20页
     ·试验试剂第20页
     ·试验仪器第20-21页
   ·SFM稀释液配制第21页
   ·DNA线性化第21页
   ·DNA标记第21页
   ·孵育前精子处理第21-22页
   ·不同形态DNA转染效果比较第22页
   ·不同转染剂转染效果的比较第22页
   ·不同转染时间的转染效果比较第22-23页
   ·不同转染温度的转染效果比较第23页
   ·吸附外源DNA和内化外源DNA分离第23页
   ·DNA提取第23-24页
   ·荧光定量PCR检测第24-25页
 2 结果与分析第25-46页
   ·不同形态DNA转染效果的比较第25-29页
     ·不同形态DNA转染后精子的活力、活率以及转染率比较第26-27页
     ·不同形态DNA精子吸附外源DNA量和内化外源DNA量比较第27-29页
   ·不同转染剂精子转染效果的比较第29-34页
     ·不同转染剂转染后精子的活力、活率以及转染率比较第30-31页
     ·不同转染剂精子吸附外源DNA量和内化外源DNA量比较第31-34页
   ·不同转染时间精子转染效果的比较第34-38页
     ·不同转染时间精子的活力、活率以及转染率比较第35-36页
     ·不同转染时间精子吸附外源DNA量和内化外源DNA量比较第36-38页
   ·不同转染温度转染精子效果的比较第38-44页
     ·不同转染温度精子的活力、活率以及转染率比较第40-41页
     ·不同转染温度精子吸附外源DNA量和内化外源DNA量比较第41-44页
   ·精子转染荧光典型第44-46页
     ·猪精子形态第44-45页
     ·猪精子荧光典型第45-46页
     ·结果分析第46页
 3 讨论第46-48页
 4 结论第48-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间发表学术论文目录第54-55页

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