| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 上篇 文献综述 | 第15-62页 |
| 第一章 疫霉菌发育及致病性的分子机制 | 第16-34页 |
| 1 疫霉菌概述 | 第16-18页 |
| ·疫霉菌的分类地位 | 第16-17页 |
| ·疫霉菌的危害及影响 | 第17-18页 |
| 2 疫霉菌发育及致病性的分子机理 | 第18-25页 |
| ·疫霉菌生活史简介 | 第18-19页 |
| ·疫霉菌发育及致病性的分子调控机制 | 第19-25页 |
| 参考文献 | 第25-34页 |
| 第二章 促有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)的研究进展 | 第34-62页 |
| 1 MAPK概述 | 第34页 |
| 2 MAPK家族的重要成员 | 第34-36页 |
| 3 MAPK的级联反应 | 第36-40页 |
| ·MAPK的双重磷酸化激活 | 第38页 |
| ·MAPK信号通路的特异性 | 第38-40页 |
| 4 MAPK信号通路在真菌中的研究进展 | 第40-50页 |
| ·酵母FUS3/KSS1的功能研究 | 第41页 |
| ·其它真菌中的FUS3/KSS1同源基因的功能研究 | 第41-44页 |
| ·真菌细胞壁完整性信号通路的研究进展 | 第44-46页 |
| ·真菌渗透压调节/胁迫应答信号通路的研究进展 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-62页 |
| 下篇 研究内容 | 第62-148页 |
| 第一章 大豆疫霉MAPK基因的预测和分析 | 第64-80页 |
| 摘要 | 第64页 |
| ABSTRACT | 第64-66页 |
| 1 材料与方法 | 第66页 |
| ·数据库信息和同源检索 | 第66页 |
| ·多重序列比对和系统发育分析 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-74页 |
| ·大豆疫霉MAPK编码基因的确定 | 第67-68页 |
| ·已知重要生物全基因组的MAPK基因数目比较 | 第68-69页 |
| ·大豆疫霉全基因组中含有14个MAPK | 第69-71页 |
| ·四类新的MAPK基因类型 | 第71-74页 |
| ·大豆疫霉MAPK的系统发育分析 | 第74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 第二章 大豆疫霉MAPK编码基因的转录分析 | 第80-96页 |
| 摘要 | 第80页 |
| ABSTRACT | 第80-82页 |
| 1 材料和方法 | 第82-84页 |
| ·供试菌株 | 第82页 |
| ·培养基制备 | 第82页 |
| ·大豆疫霉实时定量RT-PCR分析样品的准备 | 第82-83页 |
| ·RNA的提取 | 第83-84页 |
| ·SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-90页 |
| ·大豆疫霉MAPK编码基因的转录情况 | 第84-87页 |
| ·在产孢菌丝阶段显著上调表达的MAPK编码基因 | 第87页 |
| ·在游动孢子阶段显著上调表达的MAPK编码基因 | 第87页 |
| ·在休止孢萌发阶段显著上调表达的MAPK编码基因 | 第87-88页 |
| ·在侵染阶段上调表达的MAPK基因 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-96页 |
| 第三章 PsSAK1参与调控大豆疫霉游动孢子发育和致病过程 | 第96-126页 |
| 摘要 | 第96页 |
| ABSTRACT | 第96-98页 |
| 1 材料与方法 | 第98-104页 |
| ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第98-99页 |
| ·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-12h)侵染菌丝的获得 | 第99页 |
| ·氧胁迫及渗透压胁迫处理的菌丝的获得 | 第99页 |
| ·半定量RT-PCR | 第99页 |
| ·质粒构建和大豆疫霉转化 | 第99-101页 |
| ·PsSAK1沉默突变体的表型分析 | 第101页 |
| ·附着胞形成能力测定 | 第101页 |
| ·渗透胁迫下菌丝生物量的测定 | 第101页 |
| ·Southern杂交 | 第101-102页 |
| ·SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第102-103页 |
| ·致病性测定 | 第103页 |
| ·侵染的显微观察 | 第103-104页 |
| 2 结果与分析 | 第104-117页 |
| ·PsSAK1编码一个具有PH结构域的压力胁迫诱导的MAPK | 第104-107页 |
| ·PsSAK1的转录分析 | 第107-108页 |
| ·大豆疫霉沉默转化子的获得 | 第108-109页 |
| ·PsSAK1沉默转化子表型分析 | 第109-112页 |
| ·PsSAK1的沉默转化子在0.2 M的NaCl的胁迫下生长减缓 | 第112-115页 |
| ·PsSAK1对于大豆疫霉侵染植物是必需的 | 第115页 |
| ·PsSAK1沉默突变体致病性的丧失是因为不能穿透寄主表皮组织 | 第115-117页 |
| 3 讨论 | 第117-121页 |
| ·PsSAK1是一类新的MAPK | 第119页 |
| ·PsSAK1的沉默导致突变体对高渗透压(盐)胁迫更为敏感 | 第119-120页 |
| ·PsSAK1在游动孢子发育过程中的作用 | 第120页 |
| ·PsSAK1能否是PsGPA1的下游靶标? | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-126页 |
| 第四章 PsMPK1参与大豆疫霉形态建成和致病性 | 第126-148页 |
| 摘要 | 第126页 |
| ABSTRACT | 第126-129页 |
| 1 材料与方法 | 第129-131页 |
| ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第129页 |
| ·SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第129页 |
| ·质粒构建和大豆疫霉转化 | 第129页 |
| ·基因沉默转化子的筛选 | 第129页 |
| ·PsMPK1沉默突变体的表型分析 | 第129-130页 |
| ·致病性测验 | 第130-131页 |
| 2 结果和分析 | 第131-143页 |
| ·PsMPK1编码一个典型、保守的促有丝分裂原蛋白激酶 | 第131-133页 |
| ·PsMPK1在产孢菌丝、休止孢萌发及侵染早期阶段显著上调表达 | 第133-135页 |
| ·大豆疫霉PsMPK1沉默转化子的获得 | 第135-136页 |
| ·PsMPK1沉默转化子表型分析 | 第136页 |
| ·PsMPK1的沉默影响了大豆疫霉的菌丝形态 | 第136-140页 |
| ·PsMPK1的沉默突变体对细胞壁降解酶更为敏感 | 第140-141页 |
| ·PsMPK1沉默突变体的致病性测定 | 第141-143页 |
| 3 讨论 | 第143-144页 |
| ·PsMPK1的沉默突变体菌丝畸形结构增多,对细胞壁降解酶葡聚糖酶(glucanase)和纤维素酶(cellulase)变得更为敏感 | 第143-144页 |
| ·PsMPK1是否是SLT2-type的MAPK? | 第144页 |
| 参考文献 | 第144-148页 |
| 攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
