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两种节肢动物过敏原的分离纯化及结构与功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 昆虫叮咬引起的速发型过敏反应及昆虫毒素第13-41页
 第一节 昆虫叮咬引起的速发型过敏反应现状第13-21页
  1 昆虫叮咬及其引发的过敏反应发生率第13-14页
  2 导致昆虫叮咬引起速发型过敏反应的因素第14-15页
  3 昆虫叮咬引起速发型过敏反应的免疫机制第15-19页
   ·树突状细胞(Dendritic cell DC)第16-17页
   ·Th_2细胞(T helper type 2 cell,Th_2 cell)和B细胞第17-19页
   ·肥大细胞(mast cell)和嗜碱性细胞(basophil)第19页
  4 昆虫叮咬引起速发型过敏反应的治疗第19-21页
 第二节 常见的叮咬能引起过敏反应的昆虫过敏原研究进展第21-29页
  1 蜜蜂胡蜂毒素过敏原研究进展第22-26页
   ·抗原-5蛋白(antigen-5 protein Ag5)第22-23页
   ·磷脂酶(Phospholipase PLA)第23-24页
   ·透明质酸酶(Hyaluronidase Hya)第24-25页
   ·蛋白酶类(protease)第25-26页
  2 蚊子和蚂蚁的过敏原研究进展第26-29页
 参考文献第29-41页
第二章 姚虻唾液腺过敏原的分离纯化、结构与功能研究第41-63页
 第一节 前言第41-43页
 第二节 材料和方法第43-48页
  1 实验材料第43页
  2 实验方法第43-48页
   ·过敏原的分离纯化第43-44页
   ·过敏原Tab y 1的一级结构分析第44页
   ·过敏原Tab y 1 cDNA序列的克隆第44-46页
   ·Tab y 1腺苷三磷酸双磷酸酶活性的检测第46页
   ·Tab y 1抑制ADP诱导的血小板聚集第46页
   ·Tab y 1抗角叉菜胶诱导鼠尾血栓的形成第46-47页
   ·Tab y 1的过敏原性检测第47-48页
 第三节 结果和讨论第48-61页
  1 分离纯化第48-50页
  2 Tab y 1的氨基酸质谱测序结果第50页
  3 Tab y 1的编码序列克隆及其全长氨基酸序列的推导第50-54页
  4 血小板聚集抑制活性检测第54页
  5 Tab y 1抗角叉菜胶引发的鼠尾血栓形成第54-55页
  6 Tab y 1的免疫印迹实验(Western blot)第55-56页
  7 Tab y 1的酶联免疫吸附实验(Elisa)第56-57页
  8 竞争抑制性酶联免疫吸附实验(Competitive Elisa inhibition)第57-58页
  9 Tab y 1对姚虻过敏病人的皮肤针刺实验(Skin prick test)第58-59页
  10 Tab y 1对嗜碱性细胞的活化作用第59-61页
 本章小结第61-63页
第三章 大胡蜂毒素过敏原的分离纯化、结构与功能研究第63-73页
 第一节 前言第63-64页
 第二节 材料和方法第64-66页
  1 实验材料第64页
  2 分离纯化第64页
  3 过敏原蛋白一级结构的测定第64-65页
  4 过敏原活性检测第65-66页
 第三节 结果和讨论第66-71页
 第四节 本章小结第71-73页
第四章 大胡蜂毒素过敏原的编码基因克隆及序列分析第73-87页
 第一节 前言第73-74页
 第二节 材料和方法第74-78页
  1. 实验材料第74页
  2. 大胡蜂毒腺cDNA文库构建第74-78页
   ·大胡蜂毒腺总RNA的提取第74页
   ·大胡蜂毒素mRNA的纯化第74-75页
   ·大胡蜂毒素cDNA文库的构建第75-76页
   ·过敏原编码序列的克隆第76页
   ·目的片段回收第76页
   ·目的产物的连接转化第76-77页
   ·目的片段的序列测定第77-78页
 第三节 结果和讨论第78-86页
  1 大胡蜂毒腺总RNA的提取及毒腺cDNA文库的构建第78页
  2 大胡蜂毒素4种过敏原编码序列的克隆第78-83页
  3 序列分析第83-86页
 第四节 本章小结第86-87页
第五章 大胡蜂毒素过敏原的致敏性和胡蜂牛虻交叉过敏反应研究第87-104页
 第一节 前言第87-89页
 第二节 材料与方法第89-92页
  1 实验材料第89页
  2 透明质酸酶活性检测第89页
  3 磷脂酶活性检测第89页
  4 丝氨酸蛋白酶活性检测第89页
  5 蛋白的过敏原性检测第89-92页
   ·免疫印迹实验(Western blot)第89-90页
   ·酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)第90页
   ·竞争性酶联免疫吸附抑制实验(Competitive Elisa inhibition)第90-91页
   ·皮肤针刺实验(Skin prick test)第91-92页
 第三节 结果与讨论第92-103页
  1 透明质酸酶活性检测第92页
  2 磷脂酶活性检测第92页
  3 丝氨酸蛋白酶活性检测第92页
  4 蛋白的过敏原性检测第92-103页
   ·利用免疫印迹法检测第92-96页
   ·竞争性酶联免疫吸附抑制实验第96-99页
   ·过敏原的皮肤针刺实验第99-103页
 第四节 本章小结第103-104页
论文总结第104-106页
本研究的意义第106-107页
参考文献第107-115页
发表论文目录第115-117页
致谢第117-119页
附录第119-122页

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