| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·L-丝氨酸生物学意义及其应用 | 第7-8页 |
| ·L-丝氨酸的生物学意义 | 第7页 |
| ·L-丝氨酸的应用 | 第7-8页 |
| ·L-丝氨酸生产概况 | 第8页 |
| ·L-丝氨酸在微生物体内的代谢 | 第8-9页 |
| ·微生物直接发酵法合成L-丝氨酸研究进展 | 第9-10页 |
| ·微生物发酵法生产L-丝氨酸国内研究进展 | 第9-10页 |
| ·微生物发酵法生产L-丝氨酸国外研究进展 | 第10页 |
| ·微生物育种 | 第10-11页 |
| ·立题意义及研究内容 | 第11-13页 |
| ·立题意义 | 第11-12页 |
| ·研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 谷氨酸棒杆菌SYPS-062 serA 基因序列分析 | 第13-28页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·材料和方法 | 第13-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第13-14页 |
| ·培养基及培养条件 | 第14页 |
| ·工具酶 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-20页 |
| ·重组3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-PGDH)的酶活力测定 | 第20-21页 |
| ·L-丝氨酸对重组3-PGDH 活性的影响的测定 | 第21页 |
| ·实验结果和讨论 | 第21-26页 |
| ·谷氨酸棒杆菌SYPS-062 的serA 及serA~(Δ591) 基因的扩增 | 第21页 |
| ·serA 及serA~(Δ591) 基因的测序结果及编码序列分析 | 第21-22页 |
| ·重组大肠杆菌BL21(pET-28a-serA)和BL21(pET-28a-serA~(Δ591))的构建 | 第22-23页 |
| ·重组3-PGDH 蛋白的表达和纯化 | 第23-25页 |
| ·两种重组3-PGDH 的酶活性、L-丝氨酸反馈抑制作用的比较 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 第三章 谷氨酸棒杆菌SYPS-062 基因serA~(Δ591) 及sdaA 功能验证 | 第28-39页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·培养基与培养方法 | 第29页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-37页 |
| ·基因serA~(Δ591) 及serA 在谷氨酸棒杆菌SYPS-062 的增强表达 | 第33-34页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌与出发菌3-PGDH 粗酶比活力及其L-丝氨酸的差异 | 第34-35页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA 的构建 | 第35-36页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA 与出发菌株发酵产L-丝氨酸的差异 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第四章 重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))的构建及发酵性能初步研究 | 第39-48页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-41页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·培养基及培养条件 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要试仪器 | 第40页 |
| ·菌株谷氨酸棒杆菌SYPS-062 营养缺陷型的鉴定 | 第40页 |
| ·分析方法 | 第40页 |
| ·丙酮酸添加实验 | 第40-41页 |
| ·结果和讨论 | 第41-47页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))的构建 | 第41页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))生长曲线的测定 | 第41-42页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA(pJC1-tac-serA~(Δ591))种龄的确定 | 第42页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))接种量的确定 | 第42-43页 |
| ·重组谷氨酸棒杆菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))与原始菌株发酵过程比较 | 第43-44页 |
| ·添加不同浓度的丙酮酸对重组菌 SYPS-062ΔsdaA(pJC1-tac-serA~(Δ591))生长及L-丝氨酸的影响 | 第44页 |
| ·添加不同浓度酵母浸出液对重组菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))生长及L-丝氨酸的影响 | 第44-46页 |
| ·不同玉米浆浓度对重组菌SYPS-062ΔsdaA (pJC1-tac-serA~(Δ591))生长及产L-丝氨酸的影响 | 第46-47页 |
| ·本章小节 | 第47-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-50页 |
| ·主要结论 | 第48-49页 |
| ·论文工作的不足及今后工作的展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
| 附录2:核苷酸序列 | 第55-56页 |