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莱氏野村菌微菌核的诱导培养及疏水蛋白基因Nrhyd的克隆与表达特征分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 绪论第10-22页
   ·研究的目的和意义第10-11页
   ·国内外研究现状第11-19页
     ·莱氏野村菌的研究概况第11-14页
     ·丝状真菌产孢的研究现状第14-15页
     ·疏水蛋白的研究进展第15-18页
     ·真菌微菌核结构的研究进展第18-19页
   ·研究目标、内容、技术路线第19-21页
     ·研究目标第19页
     ·研究内容第19页
     ·技术路线第19-21页
   ·本研究的创新性第21-22页
2 菌株的分离与鉴定第22-28页
   ·试验材料及仪器设备第22-23页
     ·菌株来源第22页
     ·培养基配制第22页
     ·实验所用试剂及来源第22页
     ·实验所用设备及仪器和厂家第22-23页
   ·实验方法第23-24页
     ·分离菌种第23页
     ·菌株的形态学鉴定第23-24页
     ·菌株的分子鉴定第24页
   ·结果和分析第24-28页
     ·菌株 SDNr02 的菌落形态特征第24-25页
     ·菌株的菌丝与孢子的形态鉴定结果第25-26页
     ·菌株的 rDNA-ITS 序列比对结果第26-28页
3 疏水蛋白基因的全长 CDNA 克隆第28-38页
   ·实验材料第28-29页
     ·供试菌株第28页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·主要溶液配制第29页
   ·实验方法第29-34页
     ·真菌总 RNA 的提取第29-30页
     ·RACE 扩增 Nrhyd 全长 cDNA 序列第30-33页
     ·PCR 产物与载体连接、测序第33-34页
     ·Nrhyd 基因的生物信息学及其进化分析第34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·Nrhyd 基因保守片段及 3′/5′扩增第34页
     ·Nrhyd 基因的 cDNA 克隆和序列分析第34-35页
     ·Nrhyd 基因编码氨基酸序列的特征分析第35-36页
     ·Nrhyd 基因同源性分析第36-38页
4 莱氏野村菌疏水蛋白基因 Nrhyd 表达特征分析第38-44页
   ·实验材料第38页
     ·菌株第38页
     ·培养基配制第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器设备第38页
   ·实验方法第38-40页
     ·菌株的液固培养及材料收集第38页
     ·RT-qPCR 引物设计第38-39页
     ·荧光定量 PCR 莱氏野村菌 Nrhyd 基因在液固两种培养条件下的表达第39-40页
     ·数据分析第40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·SDNr02 菌株的生长特性第40-41页
     ·基因荧光定量 PCR 分析第41-44页
5 微菌核的诱导培养及其对斜纹夜蛾的毒力测定第44-50页
   ·实验材料第44-45页
     ·供试菌株第44页
     ·供试虫源第44页
     ·主要培养基配方第44页
     ·主要试剂第44-45页
   ·方法步骤第45-46页
     ·孢悬液的配制及接种培养第45页
     ·微菌核产量、生物积累量的测定及微菌核的收集,干燥与保存第45页
     ·微菌核的活性及毒力测定第45-46页
     ·数据分析第46页
   ·结果与分析第46-50页
     ·碳源浓度及碳/氮(C/N)对莱氏野村菌生物积累量及微菌核产量的影响第46-47页
     ·莱氏野村菌微菌核生长形成过程基其剖面结构图第47-48页
     ·莱氏野村菌微菌核的活性测定结果第48-49页
     ·莱氏野村菌 MS-DE 颗粒对斜纹夜蛾的毒力第49-50页
6 讨论第50-52页
   ·Nrhyd 基因功能与表达分析第50-51页
   ·莱氏野村菌微菌核的诱导培养及其对斜纹夜蛾的毒力测定第51-52页
7 结论与后续工作安排第52-53页
   ·结论第52页
   ·后续工作建议第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59页
 A. 作者在攻读学位期间发表的论文第59页
 B. 作者在攻读硕士学位期间已申报的国家发明专利第59页

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