| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1 烟草青枯病生物防治研究进展 | 第9-14页 |
| ·生物防治的种类 | 第9-12页 |
| ·微生物源的生物防治 | 第9-12页 |
| ·植物源抑菌活性物质的研究进展 | 第12页 |
| ·生物防治的作用机理 | 第12-13页 |
| ·无致病力菌株的作用机理 | 第12页 |
| ·芽孢杆菌的作用机理 | 第12-13页 |
| ·假单胞杆菌的作用机理 | 第13页 |
| ·生物防治存在的问题及展望 | 第13-14页 |
| 2 抗菌肽的研究进展 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽的作用机理 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽在农业上的应用 | 第15页 |
| 3 烟草青枯病拮抗菌2-Q-9的研究概况 | 第15-17页 |
| ·拮抗菌2-Q-9的分离筛选 | 第15页 |
| ·拮抗菌2-Q-9的鉴定 | 第15-16页 |
| ·拮抗菌2-Q-9的外泌抑菌物质性质研究 | 第16页 |
| ·拮抗菌2-Q-9外泌抗菌肽的纯化与鉴定 | 第16-17页 |
| 4 课题的研究内容与意义 | 第17-18页 |
| ·课题的研究内容 | 第17页 |
| ·研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 载体的构建和烟草植株的遗传转化 | 第18-28页 |
| 1 材料 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-23页 |
| ·重组转化载体pCHF3::BCCodY的构建 | 第18-19页 |
| ·用于转化的根癌农杆菌的准备 | 第19-20页 |
| ·农杆菌C58C1的感受态的制备 | 第19页 |
| ·电激转化农杆菌C58C1 | 第19-20页 |
| ·烟草遗传转化体系的建立 | 第20-21页 |
| ·烟草K326无菌苗的获得 | 第20页 |
| ·卡那霉素临界值的确定 | 第20页 |
| ·菌株的活化 | 第20页 |
| ·材料预培养 | 第20页 |
| ·浸染 | 第20-21页 |
| ·共培养 | 第21页 |
| ·脱菌及选择培养 | 第21页 |
| ·生根培养 | 第21页 |
| ·组培苗的移栽 | 第21页 |
| ·转基因烟草的PCR鉴定 | 第21-23页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·转基因烟草中nptⅡ基因和目的基因的PCR检测 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-25页 |
| ·卡那霉素临界值的筛选结果 | 第23-24页 |
| ·转基因烟草再生苗的获得 | 第24-25页 |
| ·烟草转化抗性植株的PCR检测结果 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| ·特异重组位点及特异信号序列的应用 | 第25-26页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化效率的影响 | 第26页 |
| ·预培养对烟草遗传转化的影响 | 第26页 |
| ·引物NPTⅡ以用来快速鉴定筛选转基因植株 | 第26页 |
| 5 结论 | 第26-28页 |
| 第三章 转BCCodY基因烟草的表达分析 | 第28-33页 |
| 1 实验材料 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-31页 |
| ·烟草叶片总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·引物的设计 | 第29页 |
| ·RT-PCR | 第29-31页 |
| ·反转录 | 第30页 |
| ·以cDNA为模板的PCR反应 | 第30-31页 |
| 3 结果和分析 | 第31-32页 |
| ·RNA的质量检测 | 第31页 |
| ·RNA提取和转基因植株中BCCodY基因转录水平上的RT-PCR检测 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32页 |
| ·RT-PCR是验证基因表达的有效手段 | 第32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第四章 转BCCodY基因植株的抗病性鉴定 | 第33-36页 |
| 1 材料 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草苗的获得 | 第33页 |
| ·青枯病菌RS2-1高致病菌液制备 | 第33页 |
| ·接种青枯病菌 | 第33-34页 |
| ·接种后青枯病菌的培养 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-35页 |
| 4 分析 | 第35-36页 |
| 第五章 全文结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 作者简历 | 第42页 |