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半滑舌鳎皮肤溃疡病病原及免疫保护研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 鳎类的疾病及免疫保护研究概况第14-25页
   ·鳎类经济价值及主要养殖种类第14页
   ·鳎类主要疾病及病原研究第14-20页
     ·鳎类主要疾病类型及病原种类第14-18页
     ·鳎类病原体研究概况第18-20页
   ·疾病控制第20-22页
     ·抗菌药物第20-21页
     ·免疫增强剂第21-22页
   ·免疫保护研究概况第22-25页
     ·免疫机能及抗病基因的研究第22页
     ·疫苗及应用第22-25页
第2章 半滑舌鳎皮肤溃疡病病原研究第25-43页
   ·材料第25-26页
     ·试验鱼第25页
     ·主要药物及试剂第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
   ·方法第26-30页
     ·病原菌分离第26页
     ·人工感染试验第26页
     ·病原菌的鉴定第26-30页
     ·胞外产物酶活性及溶血活性检测第30页
     ·药敏试验第30页
   ·结果与分析第30-40页
     ·病鱼检查结果第30页
     ·病原菌的分离及其形态特征第30-31页
     ·人工感染试验结果第31-32页
     ·生理生化特征第32-36页
     ·16S rRNA 和 gyrB 基因序列分析及系统发育树构建第36-39页
     ·胞外产物酶活性及溶血活性结果第39页
     ·药敏试验第39-40页
   ·讨论第40-43页
第3章 哈维氏弧菌灭活疫苗的制备及免疫保护的研究第43-55页
   ·材料第43-44页
     ·菌株第43页
     ·试验鱼第43页
     ·主要试验试剂第43-44页
     ·主要仪器设备第44页
   ·方法第44-48页
     ·细菌培养第44页
     ·灭活疫苗的制备第44页
     ·疫苗的安全性检测第44页
     ·半滑舌鳎免疫试验第44-45页
     ·半滑舌鳎免疫保护力的测定第45页
     ·血清的采集第45页
     ·头肾白细胞的分离第45页
     ·免疫指标的检测第45-48页
     ·数据处理第48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·疫苗制备及安全性检测第48页
     ·免疫保护力测定第48页
     ·血清凝集抗体效价第48-49页
     ·血清溶菌酶活性第49-50页
     ·血清 ACP 活性第50页
     ·血清补体活性第50-51页
     ·血清蛋白含量第51页
     ·头肾白细胞吞噬杀伤活性第51-52页
   ·讨论第52-55页
     ·血清抗体效价和相对免疫保护力第52-53页
     ·吞噬杀伤活性与免疫保护力第53页
     ·溶菌酶活性第53页
     ·ACP 活性第53页
     ·血清补体活性第53-54页
     ·血清蛋白含量第54-55页
第4章 哈维氏弧菌减毒活疫苗的制备及其特性研究第55-68页
   ·材料第55-56页
     ·菌株第55页
     ·试验用药品及试剂第55-56页
     ·主要试验器材第56页
   ·方法第56-60页
     ·减毒株的筛选第56页
     ·表型及生理生化特征分析第56-57页
     ·DNA 分析第57-58页
     ·A3 与 A3RM 的脂多糖(LPS)和外膜蛋白(OMP)的比较分析第58-60页
   ·结果与分析第60-66页
     ·表型及生理生化特征分析第60-63页
     ·DNA 分析第63-66页
   ·讨论第66-68页
第5章 减毒活疫苗对半滑舌鳎的免疫保护研究第68-79页
   ·材料第68-69页
     ·菌株第68页
     ·试验鱼第68页
     ·主要试验试剂第68-69页
     ·主要试验器材第69页
   ·方法第69-73页
     ·减毒菌株(A3RM)毒力分析第69页
     ·减毒活疫苗对半滑舌鳎的免疫处理第69页
     ·免疫保护力的测定第69页
     ·血清的采集第69-70页
     ·头肾白细胞的分离第70页
     ·免疫指标的检测第70-72页
     ·数据处理第72-73页
   ·结果与分析第73-77页
     ·减毒株的毒力分析第73页
     ·免疫保护力测定第73页
     ·血清抗体效价测定第73-74页
     ·血清溶菌酶活性检测第74页
     ·血清酸性磷酸酶(ACP)活性检测结果第74-75页
     ·头肾白细胞吞噬杀伤活性检测结果第75页
     ·头肾白细胞呼吸爆发活性检测结果第75-76页
     ·头肾白细胞 MPO 活性检测结果第76页
     ·头肾白细胞 NO 活性检测结果第76-77页
   ·讨论第77-79页
     ·鱼类的免疫接种途径对免疫保护力的影响第77-78页
     ·血清抗体效价与免疫保护力的关系第78页
     ·减毒活疫苗的免疫保护效果第78-79页
第6章 哈维氏弧菌 TN5 转座突变株的构建、筛选第79-87页
   ·材料第79-80页
     ·菌株第79页
     ·主要试验试剂第79页
     ·主要试验器材第79-80页
   ·方法第80-83页
     ·确定筛选哈维氏弧菌突变菌株所用卡那霉素的浓度第80页
     ·制备转座复合体第80页
     ·哈维氏弧菌感受态细胞的制备第80-81页
     ·转座复合体与感受态细胞的结合第81页
     ·转化子的筛选和培养第81页
     ·突变株的表型筛选第81页
     ·转座突变株的 PCR 鉴定第81-83页
   ·结果与分析第83-85页
     ·哈维氏弧菌 EZ-Tn5 突变株的构建与筛选第83页
     ·胞外蛋白酶缺失突变体的筛选第83页
     ·溶血素缺失突变体的筛选第83页
     ·突变株的 PCR 鉴定第83-85页
     ·序列测定结果第85页
   ·讨论第85-87页
     ·利用 Tn5 构建哈维氏弧菌突变株第85页
     ·胞外蛋白酶和溶血素活性缺失突变株的构建、筛选和应用第85-87页
小结与展望第87-88页
致谢第88-90页
参考文献第90-104页
附录第104-110页
在学期间发表的学术论文第110页

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