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烟草根际黑胫病拮抗菌抗生素合成的分子与生化检测

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-37页
   ·植物土传病害概况第13页
   ·烟草黑胫病第13-23页
     ·分布与危害第14页
     ·病原菌第14-15页
       ·病原菌特征第14-15页
       ·病原菌侵染途径第15页
     ·发病症状第15-16页
       ·苗期第15-16页
       ·成株期第16页
     ·流行规律及发生条件第16-17页
     ·防治措施第17-23页
       ·种植抗病品种第17页
       ·农业防治第17-18页
       ·化学防治第18-19页
       ·生物防治第19-23页
   ·植物根际促生细菌(PGPR)第23-28页
     ·PGPR 的含义第23页
     ·PGPR 的分类及主要种类第23-24页
     ·PGPR 的作用机理第24-28页
       ·产生植物促生物质第24页
       ·改善植物根际营养环境第24-25页
       ·降解污染物第25页
       ·促生防病机理第25-27页
       ·其他机制第27-28页
     ·PGPR 的应用第28页
   ·抗生素第28-34页
     ·抗生素作用及分类第28-31页
     ·农用抗生素及其作用机理第31-33页
       ·作用于病原菌细胞壁第31页
       ·作用于菌体细胞膜第31页
       ·作用于蛋白质合成系统,抑制蛋白质合成第31-32页
       ·作用于能量代谢系统或作为抗代谢物第32页
       ·抑制核酸合成第32-33页
       ·通过提高植物抗病力而防治病害第33页
       ·作用于神经系统第33页
       ·作用于呼吸代谢途径第33页
     ·农用抗生素的特点第33-34页
     ·农用抗生素的应用第34页
   ·本研究的立项依据、研究内容与技术路线第34-37页
     ·立项依据第34-35页
     ·研究内容第35-36页
     ·技术路线第36-37页
2 材料与方法第37-48页
   ·材料第37-40页
     ·根际土样第37页
     ·病原菌第37页
     ·培养基第37页
     ·引物第37-38页
     ·DNA 提取试剂第38页
     ·PCR 试剂第38-39页
     ·琼脂糖凝胶电泳试剂第39页
     ·CaCL_2法制备新鲜的 DH5α感受态细胞试剂第39页
     ·连接转化试剂第39页
     ·抗生素储存液第39页
     ·MALDI-TOF-MS 检测试剂第39-40页
     ·主要仪器第40页
   ·方法第40-48页
     ·烟草根际细菌的分离第40-41页
     ·烟草根际黑胫病拮抗菌的筛选第41页
     ·烟草根际黑胫病拮抗菌的鉴定第41-45页
       ·形态学观察及生理生化检测第41页
       ·基因组 DNA 的提取第41-42页
       ·琼脂糖凝胶电泳第42页
       ·16S rRNA 基因序列 PCR 扩增第42-43页
       ·PCR 产物纯化第43页
       ·PCR 产物的连接第43-44页
       ·E. coli DH5α感受态细胞的制备(氯化钙法)第44页
       ·转化第44-45页
       ·阳性克隆的筛选第45页
       ·16S rRNA 基因序列测定第45页
     ·抗生素合成基因检测第45-47页
       ·Iturin A 合成基因检测第45-46页
       ·Bacillomycin D 合成基因检测第46页
       ·Fengycin 合成基因检测第46页
       ·Surfactin 合成基因检测第46页
       ·其他抗生素合成基因检测第46-47页
     ·抗生素 MALDI-TOF MS 检测第47-48页
3 结果与分析第48-67页
   ·烟草根际黑胫病拮抗细菌的筛选第48页
   ·烟草根际黑胫病拮抗细菌的鉴定第48-55页
   ·抗生素合成基因检测第55-60页
     ·Iturin A 合成基因检测第55-56页
     ·Bacillomycin D 合成基因检测第56页
     ·Fengycin 合成基因检测第56-57页
     ·Surfactin 合成基因检测第57-58页
     ·其他抗生素合成基因检测第58-60页
   ·抗生素 MALDI-TOF MS 检测第60-67页
     ·Bacillus altitudinis ZAH3 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第60-61页
     ·Bacillus flexus WCH1 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第61页
     ·Delftia tsuruhatensis MTH23 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第61-62页
     ·Alcaligenes faecalis RHH48 代谢产物 MALDI-TOF MS第62-63页
     ·Kocuria palustris WCH21 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第63页
     ·Aqrobacterium tumefaciens YQH34 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第63-64页
     ·Tetrathibadter kashmirensis WCH18 代谢产物 MALDI-TOF MS 分析第64-67页
4 讨论第67-69页
5 结论第69-70页
参考文献第70-79页
附录第79-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表论文情况第82页

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