| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-41页 |
| ·代尔夫特菌研究进展 | 第13-15页 |
| ·分类学 | 第13页 |
| ·生物学特性 | 第13-15页 |
| ·耐药性 | 第15页 |
| ·烟草青枯病 | 第15-17页 |
| ·病原菌特性 | 第15页 |
| ·侵染途径 | 第15-16页 |
| ·发病原因 | 第16页 |
| ·病害症状 | 第16-17页 |
| ·烟草青枯病的防治 | 第17-22页 |
| ·抗病品种的选育 | 第17-18页 |
| ·农艺防治 | 第18-19页 |
| ·化学防治 | 第19页 |
| ·生物防治 | 第19-22页 |
| ·拮抗菌生防机理 | 第22-29页 |
| ·PGPR 的应用 | 第29-31页 |
| ·TetR 家族研究进展 | 第31-34页 |
| ·TetR 家族调控蛋白结构域 | 第31-34页 |
| ·转座子诱变法基因克隆策略研究进展 | 第34-39页 |
| ·细菌转座子的插入机制和随机诱变作用 | 第35-36页 |
| ·转座子标签技术 | 第36-39页 |
| ·本研究的立项依据、研究内容与技术路线 | 第39-41页 |
| ·立项依据 | 第39页 |
| ·研究内容 | 第39-40页 |
| ·技术路线 | 第40-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-56页 |
| ·菌株与质粒 | 第41页 |
| ·培养基与培养液 | 第41-42页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第42-43页 |
| ·DNA 提取试剂 | 第42页 |
| ·CaCl2法制备新鲜的 DH5α感受态细胞试剂 | 第42页 |
| ·PCR 试剂 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第42-43页 |
| ·连接转化试剂 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-56页 |
| ·烟草根际青枯病拮抗菌的筛选及鉴定 | 第43-44页 |
| ·抗生素固体培养基的制备 | 第44页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·PCR 引物 | 第45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第46页 |
| ·DNA 凝胶回收 | 第46-47页 |
| ·菌落的快速裂解及质粒大小的检查 | 第47-48页 |
| ·CaCl2法制备新鲜的 DH5α感受态细胞 | 第48页 |
| ·突变株的筛选 | 第48-50页 |
| ·抗药性实验 | 第48页 |
| ·转座子诱变 | 第48-49页 |
| ·拮抗缺失突变株的筛选 | 第49页 |
| ·luxA PCR 验证 | 第49-50页 |
| ·PCR 产物与载体连接 | 第50页 |
| ·克隆中插入片断的验证 | 第50-51页 |
| ·质粒大小快速检测 | 第50-51页 |
| ·菌落 PCR 验证插入片断的大小 | 第51页 |
| ·TAIL-PCR 引物的设计 | 第51-52页 |
| ·特异性引物的设计 | 第51-52页 |
| ·随机兼并引物的设计 | 第52页 |
| ·TAIL-PCR 反应体系的设计 | 第52-53页 |
| ·TAIL-PCR 反应条件的设计 | 第53页 |
| ·转座子 Tn5-1063 左侧翼序列的获得 | 第53-54页 |
| ·tetR 全基因的获得 | 第54页 |
| ·互补载体 pBR322-T 的构建 | 第54-56页 |
| ·特异性扩增 tetR 全序列 | 第54页 |
| ·酶切和回收 | 第54-55页 |
| ·连接反应 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-69页 |
| ·烟草青枯病拮抗菌的筛选 | 第56页 |
| ·拮抗菌的鉴定 | 第56-60页 |
| ·MTQ3 与 FGQ5 的形态特征及生理生化特征 | 第56-58页 |
| ·16S rDNA 序列的扩增 | 第58-59页 |
| ·鉴定 | 第59-60页 |
| ·拮抗缺失突变株的获得 | 第60-62页 |
| ·MTQ3 及 FGQ5 的耐药性试验 | 第60页 |
| ·拮抗缺失突变株的筛选 | 第60-61页 |
| ·突变株的验证 | 第61-62页 |
| ·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得 | 第62-63页 |
| ·tetR 基因全序列的获得 | 第63-64页 |
| ·tetR 功能预测 | 第64-66页 |
| ·tetR 基因互补验证 | 第66-69页 |
| ·重组质粒 pBR322-T 构建 | 第66-67页 |
| ·拮抗验证 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第81页 |