摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 绪论 | 第10-22页 |
·七鳃鳗适应性免疫研究进展 | 第10-13页 |
·细胞受体CD 分子 | 第10-11页 |
·可变淋巴受体(VLRs) | 第11-12页 |
·类胸腺的发现 | 第12页 |
·七鳃鳗推动脊椎动物颌骨演化新进展 | 第12-13页 |
·主要组织相容性复合体研究概述 | 第13-16页 |
·MHC 的构成及功能 | 第13-14页 |
·MHC 基因的多样性 | 第14-15页 |
·MHC 基因与抗病性关系 | 第15-16页 |
·MHCⅡ类分子进化概述 | 第16-19页 |
·MHCⅡ类分子结构组成 | 第16页 |
·MHCⅡ类分子进化机制 | 第16-17页 |
·MHC II 分子多态性维持机制 | 第17-18页 |
·MHC Ⅱ分子与CD4~+T 细胞的作用 | 第18页 |
·MHCⅡB 基因组织表达分析 | 第18-19页 |
·MHCⅡ基因的应用 | 第19-20页 |
·MHCⅡ基因在保护遗传学中的应用 | 第19页 |
·MHC Ⅱ基因在异种移植排斥中的作用 | 第19-20页 |
·本研究的目的、方法和意义 | 第20-22页 |
·研究目的及方法 | 第20页 |
·研究意义 | 第20-22页 |
2. 日本七鳃鳗主要组织相容性复合体的MHCⅡB 基因克隆 | 第22-36页 |
·材料和方法 | 第22-25页 |
·材料 | 第22-23页 |
·白细胞的分离 | 第23页 |
·总RNA 的提取 | 第23-24页 |
·设计兼并引物扩增保守序列 | 第24-25页 |
·cDNA 全序列的扩增反应 | 第25-33页 |
·CDS 区中间片段区的扩增反应 | 第25-28页 |
·cDNA3’末端快速扩增反应(3’RACE) | 第28-30页 |
·cDNA 5’末端快速扩增反应(5’RACE) | 第30-32页 |
·RACE 所得的片段序列拼接 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-35页 |
·日本七鳃鳗白细胞的总RNA 提取 | 第33页 |
·以草鱼为对照克隆目的片段实验结果 | 第33-34页 |
·MHC ⅡB 基因全长扩增 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35页 |
·七鳃鳗MHCⅡB 基因的获得 | 第35页 |
·RACE 扩增实验中的注意事项 | 第35页 |
·小结 | 第35-36页 |
3 日本七鳃鳗MHC ⅡB 基因生物信息学分析 | 第36-50页 |
·材料与方法 | 第36页 |
·结果 | 第36-48页 |
·氨基酸序列分析 | 第36-38页 |
·氨基酸理化性质及序列组成分析 | 第38-40页 |
·功能结构域预测 | 第40页 |
·氨基酸序列跨膜结构域预测 | 第40-41页 |
·信号肽结构预测 | 第41-43页 |
·二级结构的预测和分析 | 第43-44页 |
·三级结构的预测和分析 | 第44-45页 |
·日本七鳃鳗与其他物种的序列比对 | 第45-46页 |
·分子系统发育分析 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
4 日本七鳃鳗MHC ⅡB 基因组织表达特征分析 | 第50-54页 |
·半定量RT-PCR 方法的检测 | 第50-52页 |
·提取组织和细胞中的总RNA | 第50-51页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第51页 |
·七鳃鳗管家基因GAPDH 引物合成及电泳检测cDNA 第一链 | 第51页 |
·半定量RT-PCR 扩增 | 第51-52页 |
·半定量RT-PCR 扩增结果 | 第52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·MHC IIB 基因组织表达比较 | 第52-53页 |
·半定量RT-PCR 实验中注意事项 | 第53页 |
·小结 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-56页 |
本论文的创新点 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录A 中间序列 | 第64页 |
附录B 日本七鳃鳗MHCIIB-like 基因mRNA 全序列 | 第64-65页 |
附录C 日本七鳃鳗MHCIIB-like 基因CDS 区序列 | 第65页 |
附录D 日本七鳃鳗MHCIIB-like 基因CDS 区翻译后的氨基酸序列 | 第65页 |
附录E 不同物种的MHCIIB 基因的FASTA 格式氨基酸序列 | 第65-70页 |
附录F 七鳃鳗与不同物种MHCIIB 基因的比对相似性 | 第70-71页 |
研究生期间发表文章及研究成果 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |