| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 引言 | 第7-10页 |
| 第一章 材料和方法 | 第10-25页 |
| ·材料 | 第10-11页 |
| ·主要仪器设备 | 第10页 |
| ·质粒、菌株与细胞株 | 第10页 |
| ·主要试验试剂 | 第10-11页 |
| ·方法 | 第11-25页 |
| ·sp-pIRES重组表达载体的构建及鉴定 | 第11-17页 |
| ·sp22基因序列的选择与设计 | 第11页 |
| ·引物设计 | 第11-12页 |
| ·sp-dsDNA的制备 | 第12页 |
| ·sp-18T重组克隆载体的构建及鉴定 | 第12-15页 |
| ·sp-pIRES重组表达载体的构建及鉴定 | 第15-17页 |
| ·PC-3细胞的转染及稳定转染细胞克隆的筛选 | 第17-22页 |
| ·PC-3细胞的培养 | 第17页 |
| ·PC-3细胞的转染 | 第17-18页 |
| ·稳定转染细胞克隆的建立 | 第18页 |
| ·PC-3细胞内总RNA提取 | 第18-19页 |
| ·sp22 RT-PCR mRNA水平筛选阳性细胞克隆 | 第19-20页 |
| ·转染细胞CD59基因mRNA水平RT-PCR检测 | 第20-21页 |
| ·转染细胞CD59蛋白水平Western blot检测 | 第21-22页 |
| ·兔抗人CD59多克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
| ·CD59分子的生物学活性检测 | 第23-25页 |
| ·ELISA竞争抑制试验 | 第23页 |
| ·台盼蓝染色试验 | 第23页 |
| ·LDH检测 | 第23-24页 |
| ·MTT检测 | 第24页 |
| ·统计学处理 | 第24-25页 |
| 第二章 实验结果 | 第25-37页 |
| ·sp-pIRES重组表达载体的构建及鉴定 | 第25-29页 |
| ·sp-dsDNA的制备 | 第25页 |
| ·sp-18T重组克隆载体PCR及单酶切鉴 | 第25-27页 |
| ·sp-pIRES重组表达载体PCR及双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·sp-pIRES重组表达载体DNA测序鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒转染PC-3细胞的筛选及鉴定 | 第29-34页 |
| ·PC-3细胞的培养 | 第29页 |
| ·阳性细胞克隆的筛选 | 第29-32页 |
| ·Western blot检测 | 第32-33页 |
| ·ELISA竞争抑制试验检测 | 第33-34页 |
| ·功能检测 | 第34-37页 |
| ·台盼蓝染色测定补体溶细胞功能 | 第34-35页 |
| ·乳酸脱氢酶实验(LDH)测定补体杀伤率 | 第35页 |
| ·MTT法测定细胞增殖抑制率 | 第35-37页 |
| 第三章 讨论 | 第37-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 综述 | 第44-60页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
