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荧光定量RT-PCR检测埃博拉病毒方法的建立

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第1章 绪论第9-22页
   ·EBOV 的病原学特性第9-11页
     ·EBOV 粒子的形态和结构第9-10页
     ·EBOV 的分子生物学特性第10-11页
   ·EHF 流行病学研究情况概述第11-15页
     ·EBOV 的自然宿主第11-12页
     ·EBOV 的传播途径第12-13页
     ·EHF 流行情况概述第13-14页
     ·EBOV 的流行特征分析第14-15页
   ·EHF 的临床症状及病理变化第15页
     ·EHF 的临床症状第15页
     ·EHF 的病理变化第15页
   ·EBOV 的实验室检验方法第15-17页
     ·病毒分离法第16页
     ·电镜检查第16页
     ·血清学检测第16页
     ·PCR 检测第16-17页
   ·EHF 的治疗及疫苗的相关研究第17-18页
     ·EHF 的治疗第17页
     ·EHF 疫苗的相关研究第17-18页
   ·分子生物学检测方法检测 EBOV 的相关研究第18-21页
     ·RT-PCR 技术第19页
     ·套式 RT-PCR 技术第19-20页
     ·两步法荧光定量 RT-PCR 技术第20页
     ·一步法荧光定量 RT-PCR 技术第20页
     ·反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)第20-21页
   ·本实验的研究目的与意义第21-22页
第2章 一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 检测 EBOV-S/Z 方法的建立第22-35页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌种第23页
     ·所用载体质粒图谱第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·实验所用溶液及其配制方法第24-25页
     ·实验所用主要仪器设备第25-26页
   ·试验方法第26-29页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 引物和探针合成第26页
     ·质粒提取过程第26页
     ·体外转录制备病毒基因 RNA第26-28页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 检测方法体系和反应条件优化第28页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 检测方法敏感性试验第28-29页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 检测方法特异性试验第29页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 检测方法重复性试验第29页
   ·结果第29-33页
     ·引物和探针筛选第29-30页
     ·体外转录制备病毒基因 RNA 的鉴定第30页
     ·荧光定量 RT-PCR 方法体系和反应条件确定第30页
     ·荧光定量 RT-PCR 方法敏感性试验结果第30-32页
     ·EBOV Z/S 亚型一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 特异性试验结果第32页
     ·EBOV Z/S 亚型一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 重复性试验结果第32-33页
   ·本章小结第33-35页
第3章 SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 检测 EBOV 方法的建立第35-43页
   ·材料第35-36页
     ·菌种及所用载体质粒图谱第35-36页
     ·主要试剂第36页
     ·实验所用溶液的配制第36页
     ·主要仪器设备第36页
   ·方法第36-38页
     ·SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR引物和探针合成第36-37页
     ·体外转录制备病毒基因 RNA第37页
     ·SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 检测方法体系和反应条件优化第37页
     ·SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 检测方法敏感性试验第37页
     ·SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 检测方法特异性试验第37页
     ·SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 检测方法重复性试验第37-38页
   ·结果第38-41页
     ·引物筛选第38页
     ·体外转录制备病毒基因 RNA 的鉴定第38页
     ·EBOV 亚型 SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 方法体系和反应条件确定第38-39页
     ·EBOV SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 方法敏感性试验结果第39-40页
     ·EBOV SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 特异性试验结果第40-41页
     ·EBOV SYBR Green Ⅰ荧光定量 RT-PCR 重复性试验结果第41页
   ·本章小结第41-43页
第4章 荧光定量 RT-PCR 检测方法对不同物种的检测第43-47页
   ·材料第43页
     ·样本第43页
     ·主要试剂第43页
     ·实验所需相关溶液的配制第43页
     ·主要仪器设备第43页
   ·方法第43-45页
     ·标本采集第43-44页
     ·保存和运输第44页
     ·RNA 提取第44页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 方法对不同物种的检测第44页
     ·SYBR Green 荧光定量 RT-PCR 方法对不同物种的检测第44-45页
   ·结果第45-46页
     ·一步法 MGB 荧光定量 RT-PCR 方法对不同物种的检测结果第45页
     ·SYBR Green 荧光定量 RT-PCR 方法对不同物种的检测结果第45-46页
   ·本章小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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