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蝗虫微孢子虫孢壁蛋白的鉴定及功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第1章 引言第11-26页
   ·微孢子虫基本生物学特性第12-14页
     ·微孢子虫的形态与结构第12-13页
     ·蝗虫微孢子虫孢子的特征第13-14页
   ·微孢子虫的侵染机制与生活圈第14-16页
   ·蝗虫微孢子虫的研究第16-21页
     ·蝗虫微孢子虫分类地位的研究第17-20页
     ·蝗虫微孢子虫其他方面的研究第20-21页
   ·微孢子虫孢壁蛋白的研究进展第21-26页
     ·研究的目的第23-24页
     ·主要研究内容第24页
     ·实验技术路线第24-26页
第2章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白的提取、分离及鉴定第26-39页
   ·材料与设备第26-29页
     ·实验材料第26-27页
     ·主要仪器和试剂第27-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·双向电泳分离孢壁蛋白第29-32页
     ·胶内酶切与质谱鉴定第32页
   ·结果与分析第32-37页
     ·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白的提取第32-33页
     ·双向电泳分离上述四种方法提取的孢壁蛋白第33-36页
     ·质谱鉴定第36-37页
   ·小结与讨论第37-39页
第3章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 基因的克隆分析及原核表达第39-55页
   ·材料与设备第39-40页
     ·供试微孢子虫第39页
     ·仪器设备第39-40页
     ·试剂及配方第40页
   ·实验方法第40-48页
     ·蝗虫微孢子虫总 DNA 及总 RNA 的提取第40-42页
     ·cDNA 合成第42页
     ·ALSWP1 基因片段的扩增第42-43页
     ·ALSWP1 的克隆第43-44页
     ·ALSWP1 在表达载体中的克隆第44-46页
     ·重组 ALSWP1 在大肠杆菌中的原核表达第46-47页
     ·重组 ALSWP1 的纯化第47页
     ·抗血清的制备第47-48页
     ·重组 ALSWP1 的免疫印迹检测第48页
   ·实验结果:第48-53页
     ·ALSWP1 基因的克隆和载体连接第48-50页
     ·重组 ALSWP1 的表达和纯化第50-52页
     ·表达产物 western blot 的检测第52-53页
   ·结论与讨论第53-55页
第4章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 的定位研究第55-63页
   ·材料与方法第55-56页
     ·材料第55页
     ·主要试剂与仪器第55-56页
   ·实验方法第56-57页
     ·间接免疫荧光实验(IFA)第56页
     ·免疫电镜定位第56-57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·间接免疫荧光法(IFA)检测孢壁蛋白 ALSWP1 的表达情况第57-59页
     ·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 的亚细胞定位研究第59-61页
   ·结论与讨论第61-63页
第5章 孢壁蛋白 ALSWP1 的表达图谱第63-68页
   ·材料及方法第63-66页
     ·材料第63页
     ·蝗虫微孢子虫及被感染家蚕组织材料的获取第63-64页
     ·感染蝗虫微孢子虫蝗虫中肠 RNA 提取第64-65页
     ·蝗虫微孢子虫第 1 链 cDNA 的制备第65页
     ·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白基因 ALSWP1 的 RT PCR 扩增第65-66页
   ·结果与分析第66-67页
   ·结论与讨论第67-68页
第6章 蝗虫微孢子虫 ALSWP1 功能的初步探究第68-79页
   ·材料与设备第68-69页
     ·实验材料第68页
     ·试剂与设备第68-69页
   ·实验方法第69-70页
     ·谷胱甘肽 S 转移酶沉淀实验(GST pull down)第69-70页
     ·ALSWP1 的三维结构模型第70页
   ·实验结果第70-77页
     ·谷胱甘肽 S 转移酶沉淀实验分离鉴定 ALSWP1 互作蛋白第70-74页
     ·蝗虫微孢子虫 ALSWP1 的分子模型第74-77页
   ·结论与讨论第77-79页
第7章 结论与讨论第79-82页
论文创新点第82-83页
参考文献第83-90页
附录第90-91页
致谢第91页

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