摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第1章 引言 | 第11-26页 |
·微孢子虫基本生物学特性 | 第12-14页 |
·微孢子虫的形态与结构 | 第12-13页 |
·蝗虫微孢子虫孢子的特征 | 第13-14页 |
·微孢子虫的侵染机制与生活圈 | 第14-16页 |
·蝗虫微孢子虫的研究 | 第16-21页 |
·蝗虫微孢子虫分类地位的研究 | 第17-20页 |
·蝗虫微孢子虫其他方面的研究 | 第20-21页 |
·微孢子虫孢壁蛋白的研究进展 | 第21-26页 |
·研究的目的 | 第23-24页 |
·主要研究内容 | 第24页 |
·实验技术路线 | 第24-26页 |
第2章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白的提取、分离及鉴定 | 第26-39页 |
·材料与设备 | 第26-29页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·主要仪器和试剂 | 第27-29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·双向电泳分离孢壁蛋白 | 第29-32页 |
·胶内酶切与质谱鉴定 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-37页 |
·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白的提取 | 第32-33页 |
·双向电泳分离上述四种方法提取的孢壁蛋白 | 第33-36页 |
·质谱鉴定 | 第36-37页 |
·小结与讨论 | 第37-39页 |
第3章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 基因的克隆分析及原核表达 | 第39-55页 |
·材料与设备 | 第39-40页 |
·供试微孢子虫 | 第39页 |
·仪器设备 | 第39-40页 |
·试剂及配方 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-48页 |
·蝗虫微孢子虫总 DNA 及总 RNA 的提取 | 第40-42页 |
·cDNA 合成 | 第42页 |
·ALSWP1 基因片段的扩增 | 第42-43页 |
·ALSWP1 的克隆 | 第43-44页 |
·ALSWP1 在表达载体中的克隆 | 第44-46页 |
·重组 ALSWP1 在大肠杆菌中的原核表达 | 第46-47页 |
·重组 ALSWP1 的纯化 | 第47页 |
·抗血清的制备 | 第47-48页 |
·重组 ALSWP1 的免疫印迹检测 | 第48页 |
·实验结果: | 第48-53页 |
·ALSWP1 基因的克隆和载体连接 | 第48-50页 |
·重组 ALSWP1 的表达和纯化 | 第50-52页 |
·表达产物 western blot 的检测 | 第52-53页 |
·结论与讨论 | 第53-55页 |
第4章 蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 的定位研究 | 第55-63页 |
·材料与方法 | 第55-56页 |
·材料 | 第55页 |
·主要试剂与仪器 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-57页 |
·间接免疫荧光实验(IFA) | 第56页 |
·免疫电镜定位 | 第56-57页 |
·结果与分析 | 第57-61页 |
·间接免疫荧光法(IFA)检测孢壁蛋白 ALSWP1 的表达情况 | 第57-59页 |
·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白 ALSWP1 的亚细胞定位研究 | 第59-61页 |
·结论与讨论 | 第61-63页 |
第5章 孢壁蛋白 ALSWP1 的表达图谱 | 第63-68页 |
·材料及方法 | 第63-66页 |
·材料 | 第63页 |
·蝗虫微孢子虫及被感染家蚕组织材料的获取 | 第63-64页 |
·感染蝗虫微孢子虫蝗虫中肠 RNA 提取 | 第64-65页 |
·蝗虫微孢子虫第 1 链 cDNA 的制备 | 第65页 |
·蝗虫微孢子虫孢壁蛋白基因 ALSWP1 的 RT PCR 扩增 | 第65-66页 |
·结果与分析 | 第66-67页 |
·结论与讨论 | 第67-68页 |
第6章 蝗虫微孢子虫 ALSWP1 功能的初步探究 | 第68-79页 |
·材料与设备 | 第68-69页 |
·实验材料 | 第68页 |
·试剂与设备 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-70页 |
·谷胱甘肽 S 转移酶沉淀实验(GST pull down) | 第69-70页 |
·ALSWP1 的三维结构模型 | 第70页 |
·实验结果 | 第70-77页 |
·谷胱甘肽 S 转移酶沉淀实验分离鉴定 ALSWP1 互作蛋白 | 第70-74页 |
·蝗虫微孢子虫 ALSWP1 的分子模型 | 第74-77页 |
·结论与讨论 | 第77-79页 |
第7章 结论与讨论 | 第79-82页 |
论文创新点 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |
附录 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |