| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 英文缩写词 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-32页 |
| ·影响胚性愈伤组织形成的因素 | 第19-22页 |
| ·基因型的影响 | 第19页 |
| ·植物激素的调节 | 第19-21页 |
| ·其它因素的影响 | 第21-22页 |
| ·胚性发生分子机理研究进展 | 第22-26页 |
| ·分离鉴定胚发生相关基因的方法 | 第26-29页 |
| ·基因芯片技术 | 第26-27页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH) | 第27页 |
| ·cDNA-AFLP 技术 | 第27-28页 |
| ·蛋白质组技术 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-32页 |
| 第二章 玉米遗传转化受体材料的筛选与鉴定 | 第32-42页 |
| ·材料与方法 | 第32-35页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第33-34页 |
| ·石蜡切片(蕃红-固绿染色) | 第34-35页 |
| ·电镜扫描 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·基因型和诱导培养基对玉米自交系诱导率的影响 | 第35-36页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第36页 |
| ·石蜡切片组织观察 | 第36页 |
| ·扫描电镜结构观察 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·结论 | 第40-42页 |
| 第三章 利用 cDNA-AFLP 技术分析胚性愈伤与非胚性愈伤组织基因表达 | 第42-72页 |
| ·材料与方法 | 第42-54页 |
| ·实验所需试剂、菌种和载体 | 第42-43页 |
| ·实验所需培养基和试剂的配制 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第44页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第44-45页 |
| ·cDNA-AFLP 程序 | 第45-50页 |
| ·差异条带的统计 | 第50页 |
| ·差异条带的回收 | 第50页 |
| ·再次 PCR | 第50页 |
| ·目的片段的琼脂糖回收 | 第50-51页 |
| ·目的片段的测序 | 第51-53页 |
| ·序列分析 | 第53页 |
| ·Real-time qRT-PCR 验证 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-70页 |
| ·愈伤组织总 RNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·cDNA 的合成 | 第55-56页 |
| ·cDNA-AFLP 结果与分析 | 第56-57页 |
| ·胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织基因差异表达的分析 | 第57-59页 |
| ·差异片段的回收测序 | 第59-60页 |
| ·序列分析 | 第60-67页 |
| ·胚性愈伤组织形成相关候选基因同源性分析 | 第67-68页 |
| ·Real-time qRT-PCR 验证候选基因 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| 第四章 胚性愈伤组织相关基因的克隆及序列分析 | 第72-90页 |
| ·材料与方法 | 第72-75页 |
| ·菌种及载体 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·实验所用培养基及试剂的配制 | 第72页 |
| ·实验主要仪器 | 第72-73页 |
| ·植物材料 | 第73页 |
| ·RNA 的提取以及 cDNA 的合成 | 第73页 |
| ·候选基因的电子克隆 | 第73页 |
| ·RT-PCR 验证未知基因 | 第73-74页 |
| ·琼脂糖凝胶回收、连接、测序 | 第74页 |
| ·生物信息学分析 | 第74-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-87页 |
| ·候选基因的电子克隆 | 第75-76页 |
| ·候选基因的克隆 | 第76-77页 |
| ·序列分析 | 第77-87页 |
| ·讨论 | 第87-88页 |
| ·结论 | 第88-90页 |
| 第五章 胚性发生相关基因 ZmTypA 功能分析 | 第90-108页 |
| ·材料 | 第90-92页 |
| ·菌种及载体 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90-91页 |
| ·实验所用试剂的配制 | 第91-92页 |
| ·实验所用仪器 | 第92页 |
| ·实验方法 | 第92-101页 |
| ·原核表达载体 pET-28a/ZmTypA 构建策略 | 第92-94页 |
| ·目的基因 ZmTypA 扩增 | 第94-95页 |
| ·目的基因及原核表达载体 pET-28a 的酶切和连接 | 第95页 |
| ·连接子转化 | 第95页 |
| ·IPTG 诱导表达目的蛋白 | 第95页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第95-96页 |
| ·蛋白纯化 | 第96-97页 |
| ·蛋白透析 | 第97-98页 |
| ·Western blot | 第98-99页 |
| ·绘制标准曲线 | 第99-100页 |
| ·酶活测定 | 第100-101页 |
| ·结果与分析 | 第101-106页 |
| ·ZmTypA 的克隆 | 第101页 |
| ·原核表达载体 pET-28a-ZmTypA 验证 | 第101-103页 |
| ·pET-28a-ZmTypA 原核表达 | 第103-105页 |
| ·目的蛋白 Western blot 分析 | 第105页 |
| ·酶活力测定 | 第105-106页 |
| ·讨论 | 第106页 |
| ·结论 | 第106-108页 |
| 第六章 利用蛋白质组技术分析胚性愈伤与非胚性愈伤组织蛋白差异 | 第108-140页 |
| ·材料与方法 | 第108-117页 |
| ·实验仪器 | 第108页 |
| ·试剂 | 第108-109页 |
| ·试剂配制 | 第109-110页 |
| ·植物材料 | 第110页 |
| ·植物水溶性总蛋白的提取 | 第110页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第110-111页 |
| ·样品蛋白 SDS-PAGE 分析 | 第111-112页 |
| ·蛋白双向电泳分析 | 第112-114页 |
| ·蛋白点的分析 | 第114页 |
| ·蛋白点的切取和消化 | 第114-115页 |
| ·质谱分析 | 第115-116页 |
| ·RNA 的提取 | 第116页 |
| ·Real-time qRT-PCR 验证候选基因 | 第116-117页 |
| ·结果与分析 | 第117-135页 |
| ·愈伤形成过程中 SDS-PAGE 分析 | 第117-118页 |
| ·胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织双向电泳分析 | 第118-120页 |
| ·差异蛋白点的质谱鉴定 | 第120-133页 |
| ·Real-time qRT-PCR 分析 | 第133-135页 |
| ·讨论 | 第135-139页 |
| ·结论 | 第139-140页 |
| 第七章 全文结论 | 第140-141页 |
| 参考文献 | 第141-159页 |
| 作者简介及科研成果 | 第159页 |
| 博士期间发表的论文及参加的课题 | 第159-160页 |
| 致谢 | 第160页 |
