中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
文献综述部分 | 第11-27页 |
1. 石油污染物的简介 | 第11-12页 |
2. 石油污染的危害及现状 | 第12-13页 |
3. 石油污染土壤的产生途径及治理方法 | 第13-14页 |
4. 石油污染土壤的微生物的修复 | 第14-15页 |
5. 石油烃类物质的微生物降解 | 第15-19页 |
6. 优势菌群的构建以及其在生物修复中的应用 | 第19-20页 |
7. 生物强化技术在生物修复中的应用 | 第20-21页 |
8. 石油烃含量的测定方法 | 第21-22页 |
9. 参考文献 | 第22-27页 |
实验部分 | 第27-61页 |
第一章 石油烃高效降解菌的分离与鉴定研究 | 第27-41页 |
1. 材料与方法 | 第27-31页 |
·土壤样品来源 | 第27页 |
·培养基 | 第27-28页 |
·菌株的富集和分离 | 第28页 |
·菌株的16S rDNA序列测定 | 第28-31页 |
·菌株基因组DNA提取 | 第28页 |
·16S rDNA序列的PCR扩增 | 第28-29页 |
·PCR扩增产物的纯化 | 第29页 |
·16S rDNA片断与载体的连接 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
·转化 | 第29-30页 |
·转化子的验证 | 第30页 |
·质粒的小量提取 | 第30页 |
·16S rDNA序列的测定 | 第30-31页 |
·生理生化实验 | 第31页 |
·降解菌株系统发育地位的确定 | 第31页 |
2. 结果与分析 | 第31-39页 |
·石油烃降解菌株的分离 | 第31-32页 |
·降解菌株的形态、培养特征及生理生化特征 | 第32-33页 |
·降解菌株的基因组DNA提取 | 第33页 |
·降解菌株的鉴定结果及系统进化分析 | 第33-35页 |
·环境条件对降解菌株生长的影响 | 第35-39页 |
·pH对降解菌株生长的影响 | 第35页 |
·温度对降解菌株生长的影响 | 第35-36页 |
·通气量对降解菌株生长的影响 | 第36-37页 |
·NaCl对降解菌株生长的影响 | 第37页 |
·不同碳源对降解菌株生长的影响 | 第37-38页 |
·不同氮源对降解菌株生长的影响 | 第38页 |
·降解菌株的抗生素耐受情况 | 第38-39页 |
3. 结论 | 第39-40页 |
4. 参考文献 | 第40-41页 |
第二章 石油烃降解菌的降解特性研究 | 第41-52页 |
1. 材料与方法 | 第41-43页 |
·供试菌株、培养基及试剂 | 第41页 |
·菌株的培养及接种 | 第41页 |
·分析测定方法 | 第41-42页 |
·正十八烷烃含量的测定 | 第41-42页 |
·原油降解率测定 | 第42页 |
·石油中不同长度碳链烷烃的测定 | 第42页 |
·表面张力的测定 | 第42页 |
·菌体生长量的测定 | 第42页 |
·菌株W1、W2、W3质粒alkB保守片段的PCR扩增 | 第42-43页 |
2. 结果与分析 | 第43-50页 |
·降解菌株对原油的降解 | 第43页 |
·降解菌株对原油中石油烃降解谱的测定 | 第43-45页 |
·降解菌株的生长与正十八烷降解之间的关系 | 第45-47页 |
·温度对降解菌株降解正十八烷的影响 | 第47-48页 |
·pH对降解菌株降解正十八烷的影响 | 第48页 |
·NaCl%对降解菌降解正十八烷的影响 | 第48-49页 |
·降解菌株生长与培养基表面张力降低之间的关系 | 第49页 |
·降解菌株的alkB基因保守片段的扩增 | 第49-50页 |
3. 结论和讨论 | 第50-51页 |
4. 参考文献 | 第51-52页 |
第三章 复合菌群的构建及对石油污染土壤修复 | 第52-61页 |
1. 材料与方法 | 第52-54页 |
·菌株 | 第52页 |
·试验土壤 | 第52-53页 |
·优势菌群的构建 | 第53页 |
·石油污染土壤强化修复模拟实验 | 第53页 |
·土壤中石油的提取与测定 | 第53-54页 |
2. 结果与分析 | 第54-58页 |
·降解菌株对石油中不同组分的降解 | 第54页 |
·复合降解菌群的构建 | 第54-55页 |
·复合菌剂对灭菌和未灭菌土壤中石油的降解 | 第55-56页 |
·土壤pH对石油降解的影响 | 第56-57页 |
·温度对石油降解的影响 | 第57-58页 |
·接种量对石油降解的影响 | 第58页 |
3. 结论 | 第58-59页 |
4. 参考文献 | 第59-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
附录一: 相关DNA序列 | 第62-67页 |
附录二: 攻读硕士学位期间发表或已接收的论文 | 第67-69页 |
致谢 | 第69页 |