| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写词表 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 1 研究背景 | 第14-21页 |
| ·植物细胞壁蛋白 | 第14-15页 |
| ·PRGL基因 | 第15-20页 |
| ·PRPs | 第15-16页 |
| ·GASTs | 第16-19页 |
| ·AtPRGL | 第19-20页 |
| ·本论文的研究方法与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-39页 |
| ·植物材料及背景 | 第21页 |
| ·材料培养 | 第21-22页 |
| ·MS培养基培养 | 第21-22页 |
| ·MS培养基 | 第21页 |
| ·种子萌发 | 第21-22页 |
| ·土壤培养 | 第22页 |
| ·培养条件 | 第22页 |
| ·T-DNA突变体纯合株系鉴定 | 第22-24页 |
| ·T-DNA突变体纯合株系PCR鉴定 | 第22-24页 |
| ·拟南芥基因组 DNA提取 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增特异片段 | 第23-24页 |
| ·Kan抗性筛选 | 第24页 |
| ·T-DNA突变体纯合株系表型分析 | 第24页 |
| ·AtPRGL表达水平分析 | 第24-27页 |
| ·取材 | 第24页 |
| ·总 RNA提取 | 第24-25页 |
| ·总 RNA的浓度及纯度测定 | 第25页 |
| ·紫外分光光度法 | 第25页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第25页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第25-27页 |
| ·cDNA链的合成 | 第25-26页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·PCR结果的相对定量 | 第27页 |
| ·载体构建 | 第27-36页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第27-28页 |
| ·载体与菌株 | 第28-29页 |
| ·载体构建载体引物设计 | 第29-30页 |
| ·目的片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·目的片段pMD 19-T载体连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第31-32页 |
| ·目的片段分别与 T载体连接产物转化大肠杆菌 | 第32页 |
| ·目的片段分别与 T载体连接转化子的鉴定 | 第32-34页 |
| ·目的片段分别与 T载体连接转化子菌液 PCR鉴定 | 第32页 |
| ·目的片段分别与 T载体连接转化子质粒的酶切鉴定 | 第32-34页 |
| ·碱法小量提取菌液质粒 | 第32-33页 |
| ·阳性转化子酶切反应体系 | 第33-34页 |
| ·测序 | 第34页 |
| ·表达载体片段的获得 | 第34页 |
| ·目的片段的回收 | 第34页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第34-35页 |
| ·目的片段分别与表达载体的连接产物转化大肠杆菌 | 第35页 |
| ·重组转化子鉴定 | 第35页 |
| ·重组转化子 PCR鉴定 | 第35页 |
| ·重组转化子质粒的双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组转化子转化农杆菌 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第35页 |
| ·重组转化子转化农杆菌 | 第35-36页 |
| ·农杆菌阳性菌落的鉴定 | 第36页 |
| ·重组转化子 PCR鉴定 | 第36页 |
| ·重组转化子质粒的双酶切鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌浸泡法转染拟南芥 | 第36页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第36-37页 |
| ·GUS染色底物配制 | 第36-37页 |
| ·组织化学染色 | 第37页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第37-39页 |
| ·潮霉素基因PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·NPT Ⅱ基因PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-56页 |
| ·AtPRGL相关T-DNA纯合株系鉴定与相关分析 | 第39-43页 |
| ·PCR检测AtPRGL相关T-DNA纯合株系 | 第39-40页 |
| ·Kan抗性筛选 | 第40-41页 |
| ·表型分析 | 第41-42页 |
| ·未萌发种子的恢复实验 | 第42-43页 |
| ·AtPRGL的组织特异性表达 | 第43-44页 |
| ·过量表达转基因的获得及分子鉴定 | 第44-47页 |
| ·过量表达AtPRGL基因载体构建 | 第44页 |
| ·过量表达转基因植株抗性筛选 | 第44-45页 |
| ·过量表达拟转基因植株的分子鉴定 | 第45-47页 |
| ·潮霉素基因PCR鉴定 | 第45-46页 |
| ·过量表达转基因植株半定量 RT-PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·AtPRGL基因启动子转基因的获得及组织化学染色 | 第47-54页 |
| ·AtPRGL基因启动子载体构建 | 第47页 |
| ·启动子转基因植株抗性筛选 | 第47-48页 |
| ·启动子拟转基因植株的PCR鉴定 | 第48页 |
| ·启动子转基因植株的组织化学染色 | 第48-54页 |
| ·启动子转基因植物各部分组织染色 | 第48-51页 |
| ·伤害诱导与植株组织化学染色 | 第51-52页 |
| ·种子萌发与植株组织化学染色 | 第52-53页 |
| ·激素诱导与植株组织化学染色 | 第53-54页 |
| ·亚细胞定位转基因植株的获得及鉴定 | 第54-56页 |
| ·AtPRGL基因亚细胞定位载体构建 | 第54-55页 |
| ·亚细胞定位转基因植株抗性筛选 | 第55页 |
| ·亚细胞定位转基因植株分子鉴定 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-62页 |
| ·AtPRGL和种子萌发 | 第56-58页 |
| ·AtPRGL的组织表达 | 第58-60页 |
| ·AtPRGL的亚细胞定位 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
